Name: التقدمي نسبة الاستجابة لاستساغة الغذاء عالي الدهون ونسبة عالية من السكر في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 16 s
Description: تعلم تقييم تأثيرات الطعام عالي الدهون والسكر في الفئران باستخدام مهمة النسبة التصاعدية. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم آليات المكافأة الغذائية والسمنة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وقد أيد هذا المشروع من المنح المقدمة من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث كندا (355881)، ومؤسسة الكندي للابتكار.

* أهم الخطوات. 1. المعدات والبرمجيات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم التدريب والاختبار في غرف الماوس استثابي مجهزة مع اثنين من العتلات، خفيفة للغاية قابل للسحب 1 المتمركزة على جانبي وعاء طعام (انظر الجدول 1). يقع ضوء التحفيز فوق كل ذراع، وهناك ضوء منزل في الجزء العلوي من القفص. يقع موزع بيليه خارج الدائرة. وتقع كل غرفة داخل حجرة الصوت مخففة مع مروحة التهوية. وترتبط الغرف لأجهزة الكمبيوتر الشخصية مع البرمجيات الرابع MedPC عبر مجلس الوزراء &quot;التحكم الذكية&quot; واجهة. </li></ol> ملاحظة: عندما خفيفة للغاية العتلات لا تتوفر فمن المستحسن أن يتم استخدام الأنف كزة باعتبارها استجابة استثابي للدراسات الماوس. ومع ذلك، مع كل من الخيارات المتاحة نقترح اختيار خفيفة للغاية العتلات كإجراء أكثر موثوقية من التحفيز نظرا إلى أن الأنف كزة الردود يمكن أن بأثار ه بواسطة استكشافية استنشاق. <ol start="2" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم كتابة هذه البرامج MedPC المستخدمة لتشغيل المهام استثابي في تدوين رمز Medstate التي يمكن للمستخدم معرفة بمساعدة دليل البرمجة المتوفرة. برمجة يوفر مرونة للمستخدم لتعديل القوانين القائمة أو إنشاء المعلمات تجريبي فريد. ويمكن الحصول على رموز معينة مجانا من شركاء المتوسطي &quot;Medstate الترقيم مستودع&quot; <a href="http://www.mednr.com" target="_blank">http://www.mednr.com</a> . ويمكن شراء رموز إضافية من شركاء البحر المتوسط. </li></ol> 2. التأقلم الماوس وتقييد الغذاء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند وصول الفئران هي المجموعة يضم ما لا يقل عن 10 أيام للتأقلم على عكس 12 دورة الضوء / الظلام ساعة وقدم مع وصول libitum الإعلانية على مستوى تشاو والمياه. في حالتنا نحن نستخدم الكبار C57BL / 6 الفئران التي تم شراؤها من نهر تشارلز (سانت ثابت، QC). يتم تنفيذ جميع التلاعب الماوس والتجارب السلوكية خلال دورة الظلام. جميع الموالينوقد وافق cedures التي تنطوي على استخدام الحيوانات من قبل لجنة رعاية CRCHUM الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبعد ذلك الفئران منفردة تسكينهم وفرضت قيودا على المواد الغذائية (70٪ من كمية غذائهم اليومي) حتى تصل إلى 90-95٪ خالية من تغذية. وزن الجسم من أجل تسهيل الحصول على رافعة الصحافة الاستجابة وقدمت الفئران حصتها اليومية من الغذاء في قفص المنزل بعد انتهاء الدورة. عند الوصول إلى 5-10٪ وفقدان الوزن، يتم ضبط الغذائية اليومية المخصصة لتحقيق الاستقرار في انخفاض وزن الجسم للفترة المتبقية من فترة التدريب. مرة واحدة ولقد حققت معايير اكتساب الفئران (أنظر أدناه) وضعوا مرة أخرى على الجدول الزمني للتغذية libitum الإعلانية. الفئران على استعادة فقدت وزن الجسم في حوالي 3-4 أيام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم التعامل مع الفئران في غرفة اختبار لمدة 3 أيام متتالية قبل انعقاد الدورة التدريبية الأولى. في اليوم قبل بدء التدريب يتم وضعها 10-15 عالية من الدهون وارتفاع السكر (HFHS) الكريات في قفص المنزل لمنع التأثير المحتمل للneophobia الطعام على performan استثابيم. نحن نستخدم HFHS 20 ملغ، خالية من الغبار، الغذاء الكريات دقة (14 ملغ تتوفر أيضا) التي تحتوي على سعرة حرارية (48.9٪) والدهون (سيرف بيو، Frenchtown، ونيو جيرسي). </li></ol> 3. استثابي التدريب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في البداية يتم تدريب الفئران للضغط على رافعة على نسبة ثابتة (FR) -1 الجدول الزمني لتعزيز بموجبه الصحافة رافعة واحدة يتسبب في تسليم بيليه الغذائية إلى وعاء. يتم تعيين واحد فقط رافعة بأنه &quot;نشط&quot; (اثار تسليم مكافأة الغذاء)، ويقابله تخصيص العتلات اليمين واليسار بين الفئران. من المهم أن تضيف ما لا يقل عن مهلة 5 2 (TO) للجدول الزمني FR1 (FR1/TO-5)، وخلالها رافعة ضغط إضافية لا يؤدي في تسليم المواد الغذائية بيليه. هذه الفترة ليتيح الوقت للفئران لاستهلاك الغذاء بيليه، ويمكن استخدام عموميات وقتا أطول ولكن إذا كان يشعر مجرب من الضروري للنموذج الفئران. كل دورة تدريبية تستمر FR 1 ساعة أو عندما تم تسليم 50 الكريات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معايير اكتساب *: &lt;/ strong&gt; والمعايير المستخدمة لتحديد اكتساب الغذاء حافظت استثابي الاستجابة ما يلي: (1) الحد الأدنى لعدد الاستجابات الفعالة والمكافآت المكتسبة، (2) على قدر من التمييز بين دعامتين النشطة وغير النشطة، و (3) بين الدورة أداء استقرار. وتعتبر الفئران واظهار التمييز ≥ 03:01 لذراع نشط مقابل نشط والحصول على مكافآت ≥ 20 في كل دورة على مدى ثلاث جلسات متتالية من أجل تحقيق معايير اكتساب 10. وقد لاحظنا أن الغالبية (~ 75٪) من C57BL6 الفئران تتطلب حوالي 7-10 أيام من التدريب لتحقيق معايير اكتساب. الفئران التي لا تصل إلى معايير اكتساب هذا الوقت الخضوع لمزيد من التدريب لعدة أيام إضافية 1 5-7. استثنينا من فئران التجارب (~ 5٪ من الحالات) عندما لا يكون هناك تقدم كل يوم 5 تدريب اضافي. من المهم أن نضع في اعتبارنا أن اكتساب استثابي ضعف قد يكون نتيجة لبعض التدخلات الدوائية والوراثية، وينبغي بالتالي أن وثقت. &lt;/ لى&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد ثلاث جلسات متتالية للحصول على ≥ 20 الكريات، ويتم زيادة جدول زمني لFR5/TO-5 ثانية في 5 الذي يضغط رافعة نشطة تؤدي الى تسليم الغذاء بيليه. تدريب على الجدول الزمني للFR5 يستمر ثلاثة ايام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> * ثم يتم تدريب الفئران في نسبة تقدمية (PR) الجدول الزمني لتعزيز موقفها. ويمكن حساب الجدول الزمني نسبة الاستجابة خلال اختبار للعلاقات العامة وفقا للريتشاردسون وروبرتس (1996) 11 باستخدام الصيغة التالية (مقربة إلى أقرب عدد صحيح): = [5 ه (R * 0.2)] - 5 حيث R هو مساو لعدد من المواد الغذائية المكافآت حصل بالفعل زائد 1 (أي معزز المقبل). وهكذا، فإن عددا من الاستجابات المطلوبة لكسب مكافأة الغذاء يتبع الترتيب: 1، 2، 4، 6، 9، 12، 15، 20، 25، 32، 40، 50، 62، 77، 95 وهلم جرا. النسبة النهائية الانتهاء هو نقطة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دورة العلاقات العامة تستمر مدة أقصاها 1 ساعة. فشل في الضغط على رافعة في أية نتائج دقيقة في الفترة من 10 ختام الدورة. ادائهاويعتبر مانس على الجدول الزمني للعلاقات العامة لتعزيز الاستقرار عندما يكون عدد من الجوائز حصل في الدورة 1 ساعة ينحرف عن 10٪ ≤ مدة لا تقل عن 3 أيام متتالية. </li></ol> 4. تقدمية اختبار والتحقق من صحة نسبة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتحقق من صحة الغذاء حافظت استثابي الاستجابة في مهمة العلاقات العامة، يمكن للمرء أن يقيم نقطة التلاعب التالية الاستجابة معروف لتعديل مكافأة الغذاء. اختبار سهل نسبيا للاضطلاع هو الحرمان من الطعام والتي سوف تزيد من حالة تحفيزية للفأرة على الغذاء، وبالتالي زيادة نقاط. يجب أولا أن الفئران التي يتم اختبارها في مهمة العلاقات العامة خلال فترة الرضاعة libitum الإعلانية حتى يتحقق الاستقرار، والأداء خط الأساس. تتم إزالة في اليوم التالي لمشاركة الطعام &quot;خط الأساس&quot; يوم من قفص المنزل ويتم اختبارها ثم الفئران في مهمة العلاقات العامة بعد 24 ساعة من بدء الصيام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن أيضا التحقيق في ما إذا كانت إدارة هامشية من هرمون اللبتين قهمي سوف يكون له تأثير عكسي على نقطةالعتبات. وقد حلت ليبتين (AF Parlow، هرمون الوطنية وبرنامج الببتيد، جوائز كبيرة) في برنامج تلفزيوني العقيمة. وأجري اختبار للعلاقات العامة في أعقاب حقنة الملكية الفكرية من برنامج تلفزيوني في يوم واحد ثم بعد حقن هرمون الليبتين يوم (5 ملغ / كلغ) التالية. تم حقن هرمون الليبتين ساعة واحدة قبل الاختبار العلاقات العامة. وتمت مقارنة نقاط التوقف باستخدام الاقتران اختبار t (GraphPad بريزم). </li></ol> 5. ممثل النتائج عند اختبار قدرة الحرمان من الطعام لتعديل نقطة توقف عن الاستجابة على جدول زمني للعلاقات العامة من التعزيز، فإننا نتوقع تحقيق زيادة كبيرة في نقاط التوقف كما هو موضح في الشكل رقم 1. في هذه التجربة أنتجت فترة 24 ساعة من الحرمان من الطعام 1 ~ 3.6 أضعاف الزيادة في نقاط مقارنة مع تلك التي حصلنا عليها في دولة خالية من التغذية الأساسية مما يوحي أن الحرمان من الغذاء يزيد من الآثار مكافأة من المواد الغذائية. في مجال الإدارة، وعلى النقيض هامشية من هرمون اللبتين قهمي (5 مغ / كغ، IP) ساعة واحدة قبل روينبغي أن esting تخفيض نقطة الاستجابة كما هو مبين في الشكل 2. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig1.jpg" /> الشكل 1. الصوم يزيد من الآثار مكافأة من المواد الغذائية. صيام 24 ساعة زيادة كبيرة في نقاط التوقف على نسبة تقدمية (PR) الجدول الزمني للتعزيز في الفئران (ن = 4). يعني ± SEM *؛ ف &lt;.05. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig2.jpg" /> الشكل 2. اللبتين يقلل مكافأة الغذاء في الفئران. انخفضت إدارة يبتين الطرفية (5 ملغ / كلغ) عتبات العلاقات العامة استجابة نقطة توقف في الفئران (ن = 4). يعني ± SEM؛ * P &lt;0.05.

<ol><li>Fulton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetite+and+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neuroendocrinol%22%5BJournal%5D)">Appetite and reward.</a> Front. Neuroendocrinol. 31, 85-103 (2010).</li>
<li>Zheng, H., Lenard, N. R., Shin, A. C., Berthoud, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetite+control+and+energy+balance+regulation+in+the+modern+world%3A+reward-driven+brain+overrides+repletion+signals%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+Obesity%22%5BJournal%5D)">Appetite control and energy balance regulation in the modern world: reward-driven brain overrides repletion signals.</a> International journal of Obesity. 33, Suppl 2. S8-S13 (2009).</li>
<li>Skinner, B. F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSkinner%2C+BF+%22The+Behavior+of+Organisms%3A+An+Experimental+Analysis%22">The Behavior of Organisms: An Experimental Analysis</a>. , Appelton-Century. (1938).</li>
<li>Hodos, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+as+a+measure+of+reward+strength%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio as a measure of reward strength.</a> Science. 134, 943-944 (1961).</li>
<li>Hodos, W., Kalman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+increment+size+and+reinforcer+volume+on+progressive+ratio+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Anal.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effects of increment size and reinforcer volume on progressive ratio performance.</a> J. Exp. Anal. Behav. 6, 387-392 (1963).</li>
<li>Stafford, D., LeSage, M. G., Glowa, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive-ratio+schedules+of+drug+delivery+in+the+analysis+of+drug+self-administration%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Progressive-ratio schedules of drug delivery in the analysis of drug self-administration: a review.</a> Psychopharmacology. , 139-169 (1998).</li>
<li>Glass, M. J., O'Hare, E., Cleary, J. P., Billington, C. J., Levine, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+naloxone+on+food-motivated+behavior+in+the+obese+Zucker+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The effect of naloxone on food-motivated behavior in the obese Zucker rat.</a> Psychopharmacology (Berl). 141, 378-384 (1999).</li>
<li>Brennan, K., Roberts, D. C., Anisman, H., Merali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+sucrose+consumption+in+the+rat%3A+motivational+and+neurochemical+correlates+of+hedonia%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Individual differences in sucrose consumption in the rat: motivational and neurochemical correlates of hedonia.</a> Psychopharmacology (Berl). 157, 269-276 (2001).</li>
<li>Vaughan, C., Moore, M., Haskell-Luevano, C., Rowland, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+motivated+behavior+of+melanocortin-4+receptor+knockout+mice+under+a+progressive+ratio+schedule%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Food motivated behavior of melanocortin-4 receptor knockout mice under a progressive ratio schedule.</a> Peptides. 27, 2829-2835 (2006).</li>
<li>Haluk, D. M., Wickman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+study+design+variables+and+their+impact+on+food-maintained+operant+responding+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of study design variables and their impact on food-maintained operant responding in mice.</a> Behav. Brain Res. 207, 394-401 (2010).</li>
<li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats%3A+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J. Neurosci. Methods. 66, 1-11 (1996).</li>
<li>Jewett, D. C., Cleary, J., Levine, A. S., Schaal, D. W., Thompson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neuropeptide+Y%2C+insulin%2C+2-deoxyglucose%2C+and+food+deprivation+on+food-motivated+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Effects of neuropeptide Y, insulin, 2-deoxyglucose, and food deprivation on food-motivated behavior.</a> Psychopharmacology (Berl). 120, 267-271 (1995).</li>
<li>Fulton, S., Woodside, B., Shizgal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+brain+reward+circuitry+by+leptin%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Modulation of brain reward circuitry by leptin.</a> Science. 287, 125-128 (2000).</li>
<li>Figlewicz, D. P., Bennett, J. L., Naleid, A. M., Davis, C., Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraventricular+insulin+and+leptin+decrease+sucrose+self-administration+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Intraventricular insulin and leptin decrease sucrose self-administration in rats.</a> Physiol. Behav. 89, 611-616 (2006).</li>
</ol>

وترعى الإنتاج وحرية الوصول من هذه المادة عن طريق الفيديو من قبل شركة ميد، أسوشيتس

المهام تكييف هواء فعال توفر وسيلة فعالة لتقييم التغييرات في خصائص تحفيزية من المواد الغذائية. الإجراءات التجريبية تفصيلا في الوقت الحاضر الفئران مادة التدريب تصريح إلى الصحافة رافعة للحصول على مكافآت الغذاء وستابلي الرد على جدول زمني للعلاقات العامة لتعزيز موقفها. قياس كمية الغذاء المستهلكة لا يوفر قراءات نفس تدابير الاستجابة جهد المستندة منذ ليست كل العوامل التي تؤثر على الاستهلاك الغذائي تعدل الآثار مكافأة من المواد الغذائية. على سبيل المثال، استنزاف للاستعمال الجلوكوز من قبل الإدارة 2-deoxyglucose الطرفية في الفئران يزيد من كمية الطعام المستهلكة متاحة بحرية ولكن فشل في تغيير نقاط لكسر الارسال في مهمة العلاقات العامة للغذاء 12. ويمكن للعلاقات العامة نقطة توقف عن الاستجابة تعكس أيضا التغييرات في نوعية المكافآت الغذاء. على سبيل المثال، ترتبط بشكل إيجابي نقاط لكسر الارسال مع تركيز السكروز مما يدل على أن الدافع وراء الزيادة السكروز بطريقة يلي الطعم الحلو 8 </sيصل&gt;. هنا علينا أن نبرهن على 24H الحرمان من الغذاء يزيد إلى حد كبير نقاط التوقف العلاقات العامة للغذاء HFHS في الفئران. في المقابل، وجدنا أن إدارة هامشية من هرمون اللبتين قهمي انخفاضات كبيرة في نقاط التوقف عن الطعام HFHS في الفئران. هذه النتائج تتفق مع الإجراءات المبلغ عنها سابقا من الحرمان من الطعام واللبتين على عتبات مكافأة في الفئران 12-14. عند استخدام هذا البروتوكول من المهم أن نأخذ في الاعتبار أن الحصول على الغذاء حافظت تتعزز بشكل كبير استثابي الاستجابة من قبل تدريبية منتظمة (كل أيام 1-2)، وزيادة حالة تحفيزية من الفأرة عن طريق تطبيق نظام تقييد المواد الغذائية. وبالإضافة إلى ذلك، وضمان أن الفئران تبدي مستقرة نسبيا عن الاستجابة على الجدول الزمني لتعزيز واحد قبل الانتقال الى جداول أكثر تعقيدا (على سبيل المثال، إلى FR1 FR5) هو المفتاح لتقليل أداء متغير خلال الاختبار. على الرغم من تطبيق هذه الخطوات، ليس من غير المألوف للحصول على بعض التباينخصوصا بين الفئران مختلفة. لهذا السبب، ينصح بشدة لاستخدام داخل المواضيع (التدابير المتكررة) تصميم عندما يكون ذلك ممكنا لإزالة التباين عبر الموضوع. ويمكن على الرغم من داخل موضوع الاختبار ليس من الممكن للتحقيق في التعديلات الجينية مستقر (أي خروج المغلوب في مقابل السيطرة على الفئران) يمكن استخدامها لدراسة تأثير المخدرات، أو آفات حاد التلاعب الجيني (على سبيل المثال، optogenetic). السمنة والبدانة والأمراض ذات الصلة مشكلة متنامية والتي زادت على الحاجة الملحة لتحديد الجزيئات والممرات العصبية المعنية. تراكم الأدلة يسلط الضوء على الدور الهام الذي تؤديه دائرة الإثابة في الدماغ في شغف الغذائي، وزيادة السعرات الحرارية وزيادة الوزن. مهمة العلاقات العامة هي أداة قيمة لقياس أثر التلاعب العصبية أو وراثية أو الدوائية على آثار مكافأة من المواد الغذائية.

<html><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> بند </td><td> فهرس العدد </td><td> شركة </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> غرف الماوس استثابي </td><td> ENV-009A </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td> ميد شركاه المحدودة ص 319 سانت ألبانز، فيرمونت 05478، الولايات المتحدة الأمريكية الهاتف: (802) 527-2343 </td></tr><tr><td> 8 inputs/16 المدخلات الذكية لوحة التحكم اتصال </td><td> SG-716B </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> خفيفة للغاية قابل للسحب فأر رافعة </td><td> ENV-312 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> بيليه الصيدلي </td><td> ENV-203 </td><td>. MED-associates.com / &quot;الهدف =&quot; _blank &quot;&gt; ميد شركاه، وشركة </td><td></td></tr><tr><td> بيت الضوء </td><td> ENV-215 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> التحفيز الضوء </td><td> ENV-221 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">ميد شركاه، وشركة</a> </td><td></td></tr><tr><td> خالية من الغبار الدقيقة 20 مغ عالية الدهون وارتفاع السكر الكريات </td><td> F-06649 </td><td> الحيوي سيرف </td><td> الحيوي سيرف 8 شارع واحد، جناح 1 Frenchtown، ونيو جيرسي 08825، الولايات المتحدة الأمريكية الهاتف: (800) -996-9908 </td></tr></tbody></table> الجدول رقم 1. معدات ومواد محددة.

التقدمي نسبة الاستجابة لاستساغة الغذاء عالي الدهون ونسبة عالية من السكر في الفئران

Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

الأطعمة التي هي غنية في الدهون والسكر تساهم بشكل ملحوظ في معدلات الإفراط في الأكل والمتصاعد من السمنة. لا يمكن للاستهلاك الأغذية قبولا إحداث أثر مكافأة يعزز عمل، نتيجة جمعيات ويعزز السلوك في المستقبل تستهدف الحصول على هذه الأطعمة. أدلة متزايدة على أن آثار مكافأة للطاقة الكثيفة الأطعمة تلعب دورا عميقة في الإفراط في تناول الطعام ووضع السمنة وزيادة الاهتمام في دراسة الجينات والجزيئات والدوائر العصبية التي تعدل المواد الغذائية 1،2 الثواب. يمكن دراسة تأثير مكافأة من المحفزات المختلفة عن طريق قياس الرغبة في العمل للحصول عليها، كما هو الحال في المهام تكييف هواء فعال 3. اكتسبت نماذج استثابي القياس مكافأة الغذائية والاستجابات السلوكية الطوعية التي وجهت في الحصول على الغذاء. مقياس استخداما للقوة المكافأة هو إجراء استثابي المعروفة باسم نسبة تقدمية (PR) الجدول الزمني لتعزيز موقفها. 4،5 طن في العلاقات العامةنسأل، ويلزم هذا الموضوع لجعل عددا متزايدا من ردود استثابي لكل مكافأة متتالية. أظهرت دراسة رائدة من Hodos (1961) أن عدد الاجابات للحصول على مكافأة الماضي، ووصف نقطة الإيقاف، بمثابة مؤشر على قوة مكافأة 4. في حين أن الإجراءات استثابي قياس التغييرات في معدل الاستجابة وحدها لا يمكن الفصل بين التغيرات في قوة مكافأة من إحداث تغييرات في قدرة الأداء، ونقطة توقف المستمدة من الجدول الزمني للعلاقات العامة هو مقياس جيد التحقق من آثار مكافأة من المواد الغذائية. وقد استخدمت هذه المهمة العلاقات العامة على نطاق واسع لتقييم تأثير مكافأة تعاطيها والغذاء في الفئران (على سبيل المثال، 6-8)، ولكن إلى حد أقل في الفئران 9. وقد زاد من الاستخدام المتزايد للفئران معدلة وراثيا والنظام الغذائي الناجم عن نماذج الماوس السمنة مطالب باتخاذ تدابير سلوكية من مكافأة الغذاء في الفئران. في هذه المادة ونحن بالتفصيل المواد والإجراءات التي تستخدم لتدريب الفئران على الاستجابة (رافعة الصحافة) للحصول على الدهون عاليةوكريات الغذائية عالية من السكر على جدول زمني للعلاقات العامة لتعزيز موقفها. نظهر أن عتبات استجابة نقطة بعد زيادة الحرمان من الطعام وانخفاض حاد مع إدارة هامشية من هرمون اللبتين قهمي والتحقق من صحتها وبالتالي استخدام هذا النموذج الغذائي استثابي في الفئران.

في هذا التقرير تفاصيل عن البروتوكول المستخدمة لقياس آثار مكافأة عالية من الدهون الغذائية في الفئران باستخدام تقدمية مهمة نسبة تكييف هواء فعال.

تساهم الأطعمة الغنية بالدهون والسكر بشكل كبير في الإفراط في تناول الطعام وارتفاع معدلات السمنة. ويمكن أن يؤدي استهلاك الأطعمة المستساغة إلى...

تهدف التجربة التالية إلى تدريب واختبار الفئران في مهمة محفزة بالغذاء باستخدام جدول نسبة تصاعدية للتعزيز. ويتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق تقييد غذاء الفئران بنسبة 60 إلى 70% من كمية الغذاء التي تتناولها الفئران في حالة الشبع (Ad Liam)، حتى يصل نقص الوزن في الجسم إلى نسبة مستقرة تتراوح بين 5 إلى 10%. ولتعزيز اكتساب سلوك الضغط على الرافعة المحفز بالغذاء، يتم تدريب الفئران بعد ذلك على الضغط على الرافعة للحصول على مكافأة غذائية عالية الدهون والسكريات بنسبة ثابتة (fixed ratio one)، وذلك باستخدام إجراء التشكيل التلقائي.بعد ذلك، تم تدريب الفئران على الاستجابة للحصول على الطعام وفق جداول تعزيز أكثر تعقيدًا، بما في ذلك النسبة الثابتة خمسة، وأخيرًا في مهمة النسبة التصاعدية، والتي توفر مقياسًا موثوقًا للتأثيرات المجزية للطعام. بعد ذلك، وعقب تحقيق أداء مستقر في جدول النسبة التصاعدية، يتم إما حرمان هذه الفئران من الطعام لمدة تتراوح من 12 إلى 24 ساعة أو إعطاؤها حقنة داخل الصفاق من العوامل المثبطة للشهية للتحقق من التغيرات في السلوك المدفوع بالطعام في جدول تعزيز النسبة التصاعدية. وتظهر نتائج هذه التجربة أن الحرمان من الطعام يزيد من السلوك المدفوع بالطعام، بينما يؤدي إعطاء هرمون leptin المثبط للشهية إلى تقليل السلوك المدفوع بالطعام في حالة مكافآت الطعام عالية الدهون وعالية السكر.توفر مهام الإشراط العلوي وسيلة مفيدة لتقييم التأثيرات المكافئة والتحفيزية لمختلف المنبهات والسلوكيات. وتعد مهمة النسبة التصاعدية جدول تعزيز مُثبت الصلاحية على نطاق واسع، حيث استُخدمت بشكل مكثف لتقييم التأثير المكافئ للأدوية المسببة للإدمان والمكافآت الطبيعية مثل الطعام، رغم شيوع استخدامها أكثر في دراسات الجرذان؛ وقد أصبحت تطبيقات مهام النسبة التصاعدية التشغيلية على الفئران ذات أهمية متزايدة مع التطور المستمر في إنتاج نماذج الفئران المعدلة وراثياً. وعلى وجه الخصوص، فإن استخدام نماذج الفئران في أبحاث السمنة والإدراك بأن التأثيرات المكافئة للأطعمة المستساغة والغنية بالسعرات الحرارية تساهم بشكل كبير في الإفراط في تناول الطعام والسمنة، قد أكد الحاجة إلى قياس مكافأة الطعام لدى الفئران.نوضح هنا ونناقش الطرق المستخدمة لتدريب واختبار الفئران على الضغط على الرافعة للحصول على غذاء مستساغ غني بالدهون والسكريات وفق جدول نسبة تصاعدية للتعزيز. قبل البدء في البروتوكول، تأكد من أن جميع الإجراءات التي تتضمن استخدام الحيوانات قد تمت الموافقة عليها من قبل لجنة الرعاية المؤسسية للحيوانات. ويوصى بإجراء الاختبار في المرحلة المظلمة من دورة الضوء والظلام إذا لزم الأمر.يتم تكييف الفئران مع دورة عكسية من الضوء والظلام لمدة تتراوح من سبعة إلى 10 أيام. وفي هذه المرحلة، تتاح للفئران إمكانية الوصول غير المحدود (ad libitum) إلى العلف القياسي والماء. وبعد فترة التكييف هذه التي تستمر 10 أيام، يتم إسكان الفئران بشكل فردي وتقييد تغذيتها عن طريق توفير 60 إلى 70% من كمية الغذاء المتاحة بحرية حتى تصل أوزان أجسامها إلى 90 إلى 95% من أوزانها عند التغذية الحرة.يُسهل ذلك اكتساب استجابة الضغط على الرافعة؛ حيث يتم وزن الفئران يومياً. وعندما يكون فقدان الوزن بين 5 إلى 10%، يتم تعديل كمية الطعام المخصصة يومياً لتحقيق استقرار أوزان الجسم المنخفضة لما تبقى من فترة التدريب. قبل ثلاثة أيام من جلسة التدريب الأولى، تُنقل الفئران في أقفاصها الأصلية إلى غرفة الاختبار، ثم يُخرج كل فأر من قفصه على حدة، ويتم التعامل معه لمدة تتراوح بين دقيقتين إلى ثلاث دقائق. وبعد ذلك، يُعاد الفأر إلى قفصه الأصلي، وتُكيف الفئران مع الغرفة والتعامل معها لمدة ثلاثة أيام متتالية في اليوم الذي يسبق بدء التدريب.يتم وضع من 10 إلى 15 كريّة من الغذاء عالي الدهون والسكريات في القفص المنزلي لمنع التأثير المحتمل لرهاب الطعام الجديد (Neo phobia) على الأداء الإجرائي. تُستخدم هنا كريّات غذائية دقيقة خالية من الغبار عالية الدهون والسكريات بوزن 20 مليغرام، وتحتوي على 49% من دهون killer cow. يوضع كل حجرة تشغيل للفئران داخل مقصورة عازلة للصوت ومزودة بمروحة تهوية.تم تجهيز غرف التشغيل الخاصة بالفئران برافعتين قابلتين للسحب وخفيفتي الوزن للغاية، وموضعتهما على جانبي وعاء الطعام. يوجد مصباح تحفيز فوق كل رافعة، بالإضافة إلى مصباح إضاءة عام في أعلى القفص. ويقع موزع المكافآت خارج الغرفة.تتصل الغرف بجهاز كمبيوتر يعمل بنظام PC ومزود ببرنامج Med PC four عبر خزانة واجهة تحكم ذكية. يتم إدخال الفئران إلى غرفة التشغيل. يتكون نموذج التدريب الأولي من جدول تعزيز بنسبة ثابتة، حيث يؤدي ضغط واحد على الرافعة إلى تقديم كريّة غذائية في الوعاء.يتم تخصيص ذراع واحدة فقط لتكون نشطة وهي التي تحفز تقديم مكافأة غذائية. ويتم موازنة توزيع الأذرع اليمنى واليسرى بين الفئران. يتطلب التدريب أيضاً إجراء تشكيل، حيث توضع حبيبات طعام مسحوقة على الذراع لتعزيز سلوك الضغط على الذراع.خلال هذا التدريب الأولي، يؤدي الاستجابة النشطة للرافعة إلى تحفيز تقديم مكافأة غذائية، ولا يكون هناك أي تأخير بين الضغط على الرافعة وتقديم الطعام. وبمجرد أن تتعلم الفئران الضغط على الرافعة خمس مرات، تبدأ فترة مهلة (timeout) لا تؤدي خلالها عمليات الضغط الإضافية على الرافعة إلى تقديم كريّة غذائية. وتسمح فترة المهلة هذه للفئران باستهلاك الكريّة.يمكن استخدام فترات زمنية أطول للمهلة إذا لزم الأمر بعد انتهاء فترة المهلة والضغط على الرافعة النشطة. ومرة أخرى، يؤدي ذلك إلى إطلاق كريّة غذائية لكل نسبة ثابتة واحدة كل خمس ثوانٍ. تستمر جلسة التدريب على المهلة لمدة ساعة واحدة أو حتى يتم تقديم 50 كريّة.يستمر التشغيل والتدريب لمدة تتراوح من سبعة إلى 10 أيام حتى يتم اكتساب السلوك، حيث يحافظ الفئران المستجيبة على التشغيل مع إظهار تمييز بنسبة تعادل أو تزيد عن 3 إلى 1 لصالح الرافعة النشطة مقابل غير النشطة، والحصول على 20 مكافأة أو أكثر لكل جلسة. وتعتبر الفئران قد حققت معايير الاكتساب عند تحقيق ذلك على مدار ثلاث جلسات متتالية. أما الفئران التي لا تصل إلى معايير الاكتساب خلال فترة السبعة إلى 10 أيام، فتخضع لمزيد من التدريب لمدة إضافية تتراوح من خمسة إلى سبعة أيام.يتم استبعاد الفئران من الاختبار في حال عدم إحراز تقدم بحلول اليوم الخامس من التدريب. ومن المهم مراعاة أن ضعف الاكتساب الإجرائي قد يكون نتيجة لتدخلات صيدلانية وجينية معينة، ولذلك يجب توثيقه. وبعد ثلاث جلسات متتالية يتم فيها الحصول على 20 حبة أو أكثر، يتم رفع الجدول إلى بروتوكول FR 5 T 5 ثوانٍ، حيث تؤدي خمس ضغطات على الرافعة النشطة إلى تقديم حبة الطعام.يستغرق التدريب على جدول النسبة الثابتة (FR) خمس استجابات كل خمس ثوانٍ من ثلاث إلى خمسة أيام حتى يستقر الاستجابة. بعد ذلك، يتم تدريب الحيوان على جدول النسبة التصاعدية للتعزيز. ويمكن حساب جدول نسبة الاستجابة أثناء اختبار النسبة التصاعدية (PR) وفقاً لمنهج ريتشاردسون وروبرتس، حيث تكون R مساوية لعدد مكافآت الطعام التي تم الحصول عليها بالفعل، مضافاً إليها واحد.وبذلك، يتبع عدد الاستجابات المطلوبة للحصول على مكافأة غذائية الترتيب التالي: 1، 2، 4، 6، 9، 12، 15، 20، 25، 32، 40، 50، 62، 77، 95، وهكذا. وتعتبر النسبة النهائية المكتملة هي نقطة الانكسار (break point). تستمر جلسة PR لمدة أقصاها ساعة واحدة، أو حتى الفشل في الضغط على الرافعة خلال أي فترة زمنية مدتها 10 دقائق.تؤدي هذه النتائج إلى إنهاء الجلسة. يُعتبر الأداء في جدول التعزيز ذو النسبة المئوية (PR) مستقراً عندما لا يتجاوز الانحراف في عدد المكافآت المكتسبة في جلسة مدتها ساعة واحدة نسبة 20% لمدة ثلاثة أيام متتالية على الأقل. وللتحقق من أن الاستجابة العاملة في مهمة PR كانت مدفوعة بالغذاء، يتم تقييم استجابة نقطة الانقطاع (breakpoint responding) بعد إجراء تدخلات معروفة بتعديل مكافأة الغذاء. ومن الاختبارات السهلة نسبياً التي يمكن تنفيذها هو الحرمان من الغذاء، والذي من شأنه أن يزيد من الحالة التحفيزية للفأر تجاه الغذاء، وبالتالي يؤدي إلى زيادة نقاط الانقطاع.يتم اختبار الفئران أولاً في مهمة PR خلال فترة تغذية حرة (ad libitum) حتى يتم تحقيق أداء أساسي مستقر في اليوم التالي لآخر يوم من القياسات الأساسية. يُزال الطعام من القفص المنزلي، ثم تُختبر الفئران في مهمة PR بعد مرور 12 إلى 24 ساعة من بدء الصيام، أو للبحث في تأثير معاكس على عتبات نقطة الانكسار (breakpoint thresholds)، يمكن اختبار الإعطاء المحيطي للهرمون المضاد. يتم إجراء اختبار Leptin PR بعد حقن PBS داخل الصفاق (IP) في يوم واحد، ثم بعد حقن 5 mg/kg من leptin في اليوم التالي.يتم حقن Leptin قبل ساعة واحدة من اختبار PR كما هو موضح هنا. يزيد الصيام من التأثيرات المكافئة للطعام؛ حيث أدى الصيام لمدة 24 ساعة إلى زيادة نقاط الانقطاع بشكل ملحوظ في جدول النسبة التصاعدية للتعزيز لدى الفئران كما هو موضح هنا. يقلل Leptin من مكافأة الطعام في الفئران، حيث أدى إعطاء leptin الطرفي إلى خفض عتبات استجابة نقطة الانقطاع. أثناء محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر أن اكتساب استجابة التشغيل للحفاظ على الغذاء يتم تعزيزه بشكل كبير من خلال التدريب المنتظم وعن طريق زيادة الحالة التحفيزية للفأر من خلال تطبيق نظام تقييد غذائي.بالإضافة إلى ذلك، يعد ضمان إظهار الفئران لاستجابة مستقرة نسبياً في جدول تعزيز واحد قبل الانتقال إلى جداول أكثر تعقيداً أمراً أساسياً لتقليل تباين الأداء أثناء الاختبار. تمثل السمنة والأمراض المرتبطة بها مشكلة متنامية زادت من إلحاحية تحديد الجزيئات والمسارات العصبية المعنية. ويعد جدول النسبة التصاعدية أداة قيمة لقياس تأثير التدخلات البيولوجية العصبية أو الجينية أو الدوائية على التأثيرات المكافئة للطعام.

progressive-ratio-responding-for-palatable-high-fat-high-sugar-food

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

في هذا البروتوكول وصفنا من وسائل التعلم استثابي استخدام المنبهات الحسية كما معزز في الماوس. أنه لا يتطلب أي تدريب مسبق أو تقييد الغذاء ، ويسمح للدراسة السلوك بدافع من دون استخدام معزز الدوائي أو الطبيعية ، مثل المواد الغذائية.

استثابي الإحساس المفضل في الماوس

تقيم الدراسة الحالية إجراء رواية لتقييم آثار يعزز من الحلول قبولا في الفئران المختبرية: داخل الفم الإدارة الذاتية. تحقيقا لهذه الغاية، فعال الاستجابة (أي رافعة الضغط) للدفعات داخل الفم من الحلول حلوة بتركيزات مختلفة تم قياس المستمر والتدريجي على نسب جداول التعزيز.

إجراء رواية لتقييم خصائص التسليح من Tastants في الجرذان المختبرية: استثابي داخل الفم، إدارة الذات

محتوى الدهون الغذائية تأثيرات كل من كمية الطاقة والجسم تكوين الدهون في الثدييات. من خلال دراسة تفضيل الفئران للغذاء عالي الدهون في سلسلة من التجارب الاختيار، فمن الممكن لاختبار الفروق الوراثية والتدخلات الدوائية على تفضيلهم للأغذية عالية الدهون.

ميول الدهون: نموذج الرواية من سلوك الأكل في الجرذان

تكيفت هذه الدراسة بنجاح الإنسان videofluoroscopic البلع الدراسة (VFSS) طرق للاستخدام مع نماذج المرض الفئران لغرض تسهيل البحث عسر البلع متعدية.

التكيف Videofluoroscopic طرق دراسة السنونو الإنسان لكشف وتوصيف عسر البلع في نماذج الفئران الأمراض

الهدف من هذه الدراسة هو تحديد شبكات الدماغ وزعت المتعلقة مكافأة من قبل ترسيم تقنية immunohistological موثوقة باستخدام الخلوي تفعيل ج منظمات المزارعين لقياس التغيرات في وقت واحد في مسارات الدوبامين ومواقع المحطة بعد تناول الرواية من الدهون والسكر في الفئران.

كشف في وقت واحد ج-فو التنشيط من مواقع مكافأة Mesolimbic والقشري المتوسطي الدوبامين بعد ساذج السكر والدهون الابتلاع في الجرذان

وتعرض هذه الورقة بروتوكولا لتحقيق انتقال اجتماعية من تفضيل الأغذية في الفئران. المزايا والتطبيقات الممكنة لهذا الإجراء، على سبيل المثال، في الكشف عن التغيرات المبكرة في نماذج الإعلانات الماوس، يتم تمييز. وختاما، تناقش تفسير النتائج في ضوء التفاصيل الهامة.

تقييم انتقال اجتماعية من السلوكيات التفضيلات الغذائية

طريقة تقييم تأثير التدريب على المهارات الحركية هي أداة مفيدة. لسوء الحظ، يمكن أن تكون معظم التقييمات السلوكية كثيفة العمالة و/أو مكلفة. نحن نصف هنا طريقة الروبوتية لتقييم السبق (الوصول إلى فهم) مهارة في الفئران.

تقييم السبق الماهر في الفئران باستخدام مدرب تلقائي

يصف هذا البروتوكول استخدام النظام الغذائي الذي يتسم بالقبول الشديد والنمط الغربي لتناول الاطعمه الدسمة والسمنة في القوارض. نقدم هنا عرضا مفصلا لاختيار الطعام واعداده وقياسه ، وشرح العوامل المنهجية التي تساعد في توليد النمط الظاهري القوي والقابل للتكرار.

مستساغا الغربية علي غرار النظام الغذائي كافتيريا كطريقه موثوق بها لنمذجة السمنة التي يسببها النظام الغذائي في القوارض

هنا هو بروتوكول لدراسة الاكتئاب مثل والسلوك anhedonic في الفئران. فهو يجمع بين طريقتين سلوكيتين راسختين، وهما تفضيل السكروز واختبارات نقص الفقار الناجمة عن الجدة، ونظام مراقبة تلقائي للطعام والمداواة السائلة، للتحقيق بشكل غير مباشر في سلوك القوارض باستخدام معلمات بديلة.

Sucrose تفضيل واختبارات نقص في بphagia الناجمة عن الجدة في الفئران باستخدام نظام رصد الغذائية الآلي

برز تقييد توقيت تناول الطعام كتدخل واعد لتخفيف الأمراض الأيضية التي يسببها النظام الغذائي. توضح هذه المخطوطة بالتفصيل بناء واستخدام نظام فعال تم بناؤه داخليا لقياس ومعالجة تناول الطعام الإيقاعي في الفئران.

التلاعب في تناول الطعام الإيقاعي في الفئران باستخدام نظام تغذية مخصص

تم إنشاء نموذج الإفراط في تناول الطعام في الفئران باستخدام الوصول المتقطع إلى M &amp; M (طعام مستساغ للغاية مصنوع من الدهون والسكر). أظهرت الفئران التي حصلت بشكل متقطع على هذا الطعام الغني بالدهون والسكر سلوكيات شبيهة بالإجهاد ، وزيادة في تناول السعرات الحرارية ، وتفضيل هذا الطعام على الطعام القياسي مقارنة بالفئران التي لديها وصول مستمر أو معدوم إلى الطعام.

نموذج الإفراط المتقطع في الفئران

تعلم تقييم تأثيرات الطعام عالي الدهون والسكر في الفئران باستخدام مهمة النسبة التصاعدية. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم آليات المكافأة الغذائية والسمنة.

التقدمي نسبة الاستجابة لاستساغة الغذاء عالي الدهون ونسبة عالية من السكر في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات