سريع تحديد العتبة Nociceptive الحرارية في الفئران المصابة بمرض السكر

الهدف العام من هذا الإجراء هو تحديد عتبة استقبال الألم الحراري لدى الجرذان الضابطة والجرذان المصابة بداء السكري. وتتمثل الخطوة الأولى في وضع الحيوان على لوحة تسخين تزايدية ومقياس لتسكين الألم. بعد ذلك، يتم زيادة درجة حرارة اللوحة الساخنة تدريجيًا أثناء تسخين السطح.

تتم مراقبة الحيوان للتأكد من عدم ظهور أي سلوكيات دفاعية. وعند ملاحظة هذا السلوك، يتم إيقاف التسخين وتسجيل درجة حرارة الصفيحة في تلك اللحظة. وفي النهاية، يمكن الحصول على نتائج تظهر التغيرات في عتبة استقبال الألم الحراري لدى الحيوانات التي عولجت بالمسكنات أو تلك التي تعاني من الاعتلال العصبي السكري المؤلم.

تتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل الصفيحة الساخنة، والتي تُضبط عادةً على درجة حرارة تتجاوز العتبة، في أن طرقنا تزيد من درجة حرارة الصفيحة تدريجياً، مما يسمح بالتحديد الدقيق لعتبة الاستقبال الحراري للألم. يتم تحديد عتبة الاستقبال الحراري للألم أو TNT باستخدام مقياس تسكين الألم بالصفيحة الساخنة التزايدي، أو IH pam. وتتضمن مكونات هذا النظام غرفة ملاحظة من البلكسي جلاس، وصفيحة ألومنيوم يتم التحكم في درجة حرارتها، ولوحة مفاتيح تُستخدم للبرمجة، ومفتاح قدم للتحكم عن بعد في الوحدة.

يتم جمع البيانات باستخدام برنامج مخصص على جهاز كمبيوتر قريب. وبدلاً من ذلك، يمكن طباعة نسخ ورقية باستخدام منفذ تسلسلي موجود في الوحدة. ضع مرآة خلف غرفة البلكسي جلاس لزيادة وضوح رؤية سلوك الحيوان.

بعد ذلك، حدد معدلات التسخين المطلوبة بالإضافة إلى درجتي حرارة الاستعداد الأولية والقطع النهائية. اضغط على مفتاح القدم لبدء وإيقاف النظام. تحقق من تسجيل درجتي حرارة الاستعداد الأولية والقطع النهائية، بالإضافة إلى الوقت المستغرق للوصول إلى درجة الحرارة النهائية.

إذا رغب الباحث في ذلك، يمكنه اختبار النظام على نفسه، وذلك بسحب اليد من الصفيحة المعدنية عند الشعور بالألم. يجب ألا يتسبب هذا الإدراك في إلحاق أي ضرر بالجلد، ولا أن يؤدي إلى أي انزعاج لاحق.

ابدأ عملية التأقلم في الليلة السابقة عن طريق وضع الأقفاص على المنضدة التي سيتم إجراء الاختبار عليها. وقبل الاختبار بساعتين، قم بتشغيل لوحة IH لتعريف الحيوانات بضوضاء الخلفية الخاصة بالوحدة.

في هذه المرحلة، يمكن إعداد النظام واختباره كما شوهد سابقاً. بعد أن تتأقلم الحيوانات مع البيئة، ضع جرذاً برفق داخل غرفة البلكسي جلاس فوق السطح الدافئ. اترك الحيوان يستكشف الغرفة لبضع دقائق.

ابدأ الاختبار. وبمجرد أن يبدو الحيوان مسترخياً لبدء التجربة، اضغط على مفتاح القدم لبدء تسخين الصفيحة. راقب سلوك الحيوان أثناء تسخين الصفيحة.

بشكل عام، سيواجه الأشخاص الجدد في استخدام هذه الطريقة صعوبة لأن تحديد السلوك الهجومي الجماعي ليس أمراً سهلاً دائماً ويتطلب ممارسة. لا تتميز السلوكيات غير الهجومية بلعق أو هز أو رفع أي من المسام الخلفية. ومن المفيد ملاحظة أن أول سلوك يتم رصده قد يكون لعق المسام الأربعة، يليه رد فعل من المسام الخلفية.

عند ملاحظة أكثر السلوكيات حدة، اضغط على مفتاح القدم لإنهاء التجربة وإعادة الحيوان إلى قفصه الأصلي. وتُعتبر درجة الحرارة التي تثير هذا السلوك هي عتبة استشعار الألم الحرارية أو TNT للحيوان الضابط. يتم تنظيف الوحدة وتكرار الاختبار للحيوان التالي.

فيما يلي عتبات الاستجابة الحرارية للألم لدى الجرذان والفئران البالغة السليمة. وتوضح البيانات هنا أن عتبة الاستجابة الحرارية للألم (TNT) لدى الجرذان لم تتغير عند اختبارها على مدى فترة زمنية استغرقت أربعة أيام. وبالمثل، كانت عتبة الاستجابة الحرارية للألم (TNT) لدى الفئران ثابتة باختلاف الأعمار.

في هذا المثال، تم قياس عتبات التنبيه الحراري (TN TS) بشكل متكرر لجرذان شابة مصابة بداء السكري المستحدث بواسطة STZ. ويمكن ملاحظة انخفاض مستمر في عتبات التنبيه الحراري بدءاً من أسبوعين بعد استحثاث داء السكري. وهنا، تم استخدام IH pam لاختبار الخصائص المضادة للألم الحادة للمركب المسكن.

أ، أحدث المركب تأثيراً مسكناً خفيفاً في حيوانات المجموعة الضابطة مقارنة بتلك التي تلقت المواد الحاملة. ومع ذلك، كان التسكين أكثر وضوحاً في الحيوانات المصابة بالسكري التي تلقت المركب مقارنة بمجموعات الضبط التي تلقت المواد الحاملة. أثناء تنفيذ هذا الإجراء، من المهم جداً تذكر المراقبة المستمرة لسلوك الحيوان، خاصة التصرفات التي تحدث بالقرب من طرف الحيوان.