Name: القرنية تحضير الأنسجة من الجهات المانحة لغشائي keratoplasty (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-12T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: تعلم إعداد الطبقة اللاميلية للقرنية باستخدام الميكروكيراتوم الميكانيكي لزراعة الغشاء الباطن. تحقق من جودة الزرع بالمجهر الانشقاقي والمجهر العاكس لضمان نتائج جراحية مثلى وشفاء أسرع.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

بدعم جزئي من قبل NEI / EY017885 المعاهد الوطنية للصحة (RMS).

<ol><li>Melles, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+surgical+technique+for+posterior+lamellar+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">A surgical technique for posterior lamellar keratoplasty.</a> Cornea. 17, 618-626 (1998).</li>
<li>Melles, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+clinical+results+of+posterior+lamellar+keratoplasty+through+a+sclerocorneal+pocket+incision%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthal%22%5BJournal%5D)">Preliminary clinical results of posterior lamellar keratoplasty through a sclerocorneal pocket incision.</a> Ophthal. 107, 1850-1856 (2000).</li>
<li>Terry, M. A., Ousley, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Replacing+the+endothelium+without+corneal+surface+incisions+or+sutures%3A+the+first+United+States+clinical+series+using+the+deep+lamellar+endothelial+keratoplasty+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthal%22%5BJournal%5D)">Replacing the endothelium without corneal surface incisions or sutures: the first United States clinical series using the deep lamellar endothelial keratoplasty procedure.</a> Ophthal. 110, 755-764 (2003).</li>
<li>Price, F. W., Price, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet%27s+stripping+with+endothelial+keratoplasty+in+50+eyes%3A+a+refractive+neutral+corneal+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Descemet's stripping with endothelial keratoplasty in 50 eyes: a refractive neutral corneal transplant.</a> J. Refract Surg. 21, 339-345 (2005).</li>
<li>Price, M. O., Price, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet%27s+stripping+with+endothelial+keratoplasty%3A+comparative+outcomes+with+microkeratome-dissected+and+manually+dissected+donor+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthal%22%5BJournal%5D)">Descemet's stripping with endothelial keratoplasty: comparative outcomes with microkeratome-dissected and manually dissected donor tissue.</a> Ophthal. 113, 1936-1942 (2006).</li>
<li>Bahar, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrospective+contralateral+study+comparing+descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty+with+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Retrospective contralateral study comparing descemet stripping automated endothelial keratoplasty with penetrating keratoplasty.</a> Cornea. 28, 485-488 (2009).</li>
<li>Rose, L., Briceno, C. A., Stark, W. J., Gloria, D. G., Jun, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Eye+Bank-Prepared+Posterior+Lamellar+Corneal+Tissue+for+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthal%22%5BJournal%5D)">Assessment of Eye Bank-Prepared Posterior Lamellar Corneal Tissue for Endothelial Keratoplasty.</a> Ophthal. 115, 279-286 (2008).</li>
<li>Price, M. O., Baig, K. M., Brubaker, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((prospective+comparison+of+precut+versus+surgeon-dissected+grafts+for+Descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">prospective comparison of precut versus surgeon-dissected grafts for Descemet stripping automated endothelial keratoplasty.</a> Am. J. Ophthalmol. 146, 36-41 (2008).</li>
<li>Chen, E. S., Terry, M. A., Shamie, N., Hoar, K. L., Friend, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precut+tissue+in+Descemet%27s+stripping+automated+endothelial+keratoplasty+donor+characteristics+and+early+postoperative+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Precut tissue in Descemet's stripping automated endothelial keratoplasty donor characteristics and early postoperative complications.</a> Ophthalmology. 115, 497-502 (2008).</li>
<li>Terry, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Keratoplasty%3A+A+Comparision+of+Complication+Rates+and+Endothelial+Survival+between+Precut+Tissue+and+Surgeon-cut+Tissue+by+a+Single+DSAEK+Surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Trans.+Am.+Ophthalmol.+Soc%22%5BJournal%5D)">Endothelial Keratoplasty: A Comparision of Complication Rates and Endothelial Survival between Precut Tissue and Surgeon-cut Tissue by a Single DSAEK Surgeon.</a> Trans. Am. Ophthalmol. Soc. 107, 184-193 (2009).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Reference+document+E1.710+Corneal+Tissue+Preparation+for+Lamellar+Procedures%22">Reference document E1.710 Corneal Tissue Preparation for Lamellar Procedures</a>. , MidWest Eye Banks. 1-5 (2010).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Eye+Banking+Statistical+Report%22">Eye Banking Statistical Report</a>. , Bank Association of America. Washington, DC., Eye. 1-5 (2009).</li>
<li>Glasser, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+complications+during+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Tissue complications during endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 29, 1428-1429 (2010).</li>
<li>Kelliher, C., Engler, C., Speck, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+analysis+of+eye+bank-prepared+posterior+lamellar+corneal+tissue+for+use+in+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">A comprehensive analysis of eye bank-prepared posterior lamellar corneal tissue for use in endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 28, 966-970 (2009).</li>
<li>Price, F. W. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precut+tissue+for+Descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Precut tissue for Descemet stripping automated endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 27, 630-631 (2008).</li>
</ol>

دائرة الاستعلام والأمن. وودوارد وShtein ليس لديهم ما يكشف. السيد Mavin وتيتوس السيد هم موظفون من بنوك العيون الغرب الاوسط.

الطبقة الداخلية، أكثر من القرنية، والبطانة، ويحافظ على وضوح بصرية للقرنية من خلال الحفاظ على جفاف القرنية. الولايات مرض عديدة تؤثر بشكل خاص على صحة وسلامة البطانة القرنية بما في ذلك الالتهابات، وضمور، وعمليات التهابات، والإنحطاط. حتى وقت قريب، مطلوب زراعة القرنية لاستبدال بطانة القرنية المريضة كامل زرع سمك القرنية. في العقد الماضي، كانت تستهدف استبدال القرنية الخلفية بواسطة زرع سماكة القرنية الجزئية، مثل جراحة DSAEK، وقادرة على تحقيق نفس الهدف مع وقت أقصر الانتعاش. بغض النظر عن الأسلوب، يجب أن الأنسجة المزروعة تحتفظ بطانة القرنية السليمة للحفاظ على وضوح بصري في القرنية المزروعة، ونتيجة، وكلها تقنيات معالجة الأنسجة لديها خطوات إضافية لحماية بطانة القرنية. الآلي microkeratome تشريح حاليا عشره القياسية لتحضير نسيج القرنية للالقرنية البطانية. وقد تبين من استخدام microkeratome لخفض المانحة ثقب الأنسجة وسرعة انتعاش البصرية مقارنة تشريح دليل 5. اشتريت بعض الجراحين عندما قدم في البداية DSAEK، microkeratome المعدات وتنفيذ تشريح المانحة رقائقية في غرفة العمليات في بداية عملية جراحية. إذا فشل إعداد الأنسجة، فإن عملية جراحية لا بد من إلغاء تسبب إزعاج ونفقة للمريض والجراح. في عام 2006 بدأت بنوك العيون أداء تشريح microkeratome &quot;خارج الموقع&quot; في ظل ظروف متحكم بها في المعمل عين البنك في اليوم قبل الجراحة 12. إذا فشل إعداد الأنسجة في هذا الإطار، هناك متسع من الوقت لإجراء تشريح آخر مع أنسجة جديدة. تشريح Microkeratome من الأنسجة المانحة الخلفي القرنية صفاحي يتطلب تقنية لطيف ودقيق للحد من المضاعفات. يجب أن توضع في القرنية gentlذ في الغرفة الأمامية الاصطناعي (AAC) لتجنب أي ضرر للخلايا البطانية دقيق. مرة واحدة هي التي شنت القرنية والانحياز بشأن الجميح للسيارات، لا بد من وضعه في حلقة القفل وتعديلها للحصول على ختم مشددة للحفاظ على الضغط العالي داخل الغرفة ويقلل من فرص انهيار النسيج خلال تشريح microkeratome. لضمان تشريح موحدة، يتعين على رئيس microkeratome بالتناوب بطريقة مستمرة على نحو سلس. بعد تشريح، يجب مرة أخرى يتم التعامل معها بعناية الأنسجة للحد من تلف الخلايا البطانية. علاوة على ذلك، من الأهمية بمكان التأكيد على أن خفض صفاحي هو محورها وكاملة من أجل ضمان أن تكون الصفيحة الخلفية سوف تكون مناسبة للاستخدام في الجراحة 13. انثقاب القرنية المانحة هو اختلاط اللعين من هذا الإجراء، فإنه يصبح أقل تواترا من ذوي الخبرة. إذا ثقوب متكررة تحدث أثناء مرور microkeratome، فمن المهم للتحقق من خطوات عدة في هذا الإجراء. الذرةعصام يحتاج إلى أن يثبت بشكل صحيح والانحياز بشأن الجميح للسيارات. وينبغي الحصول على ختم ضيقة وارتفاع الضغط قبل مرور microkeratome وحافظت طوال الإجراء. في بعض الأحيان، الملتحمة المتبقي موجود على حافة صلبة، وتحتاج إلى تشريح قبالة قبل التركيب. يجب أن نصل microkeratome تكون حادة ودون الشقوق. وينبغي اختيار رئيس microkeratome الصحيح سمك على أساس سمك القرنية المقدرة. يجب على رئيس microkeratome أن تتأرجح بشكل صحيح قبل مرور. مع مزيد من المشاكل مع هذه التقنية، والرجوع إلى مزود microkeratome للتحقق من أن جميع المعدات تعمل بشكل صحيح. حتى عندما يكون أداؤها تماما، هناك بعض القيود على هذه التقنية. رؤساء Microkeratome المتاحة لقطع نسيج القرنية في سمك مختلف، ولكن العلاقة بين رئيس microkeratome إلى سماكة النسيج النهائية غير دقيقة مع رئيس ذاته توفير مجموعة واسعة من النسيج النهائي سمك7. وبالإضافة إلى ذلك، منحنى التعلم كبيرة موجودة ومضاعفات في إعداد أكثر شيوعا للمستخدمين الجدد. أداء تشريح رقائقية في العين وضع البنك يسمح الفنيين المدربين الذين تنفيذ هذا الإجراء عدة مرات في اليوم الواحد لتحسين تقنيتهم، وبالتالي تقليل المضاعفات الناجمة عن قلة خبرة. تعديلات تقنية لmicrokeratome بمساعدة تشريح القرنية القرنية لالبطانية وجود لها. البعض يفضل استخدام المواد اللزجة أو وسائط التخزين القرنية بدلا من حل متوازن الملح تحت زر القرنية في الغرفة الأمامية اصطناعية بهدف توفير الحماية المتزايدة للبطانة القرنية. وهناك أيضا اختلافات في طريقة لتحديد الموقع الذي ينبغي أن يبدأ في شق microkeratome. يجوز للمصارف العيون المختلفة والجراحين القرنية المختلفة لها أفضليات خاصة فيما يتعلق بكيفية يتم وضع علامة على القرنية لتحديدالغطاء الأمامي القرنية أو التوجه صفاحي الخلفي. تجدر الإشارة إلى أن الشركات المصنعة جعل معدات مماثلة لتلك المستخدمة في هذا البروتوكول. وينبغي اتباع إرشادات الشركة المصنعة خاصة مع أيهما المعدات المستخدمة. وكان يمكن الاعتماد عليها إعداد بنك العيون من نسيج القرنية تشريح لعملية جراحية DSAEK مفيدة للقبول واسع النطاق لهذه التقنية الجراحية الجديدة نسبيا. وقد خفف أي إعداد الأنسجة، والقيود العملية العديد من DSAEK - مرة واحدة الجراحين أصبح على ثقة في بنوك العيون أداء &quot;خطوة أولى&quot; في زراعة القرنية. وكانت بنوك العيون قادرة على الحفاظ على موثوق بها مع الطلب على الأنسجة المصنعة مع امدادات آمنة وفعالة، وفي الوقت المناسب من الأنسجة المانحة. ويمكن الآن عالية الجودة نسيج DSAEK أن يؤمر مقدما والتشغيل مرة غرفة والمضاعفات إعداد الأنسجة انخفضت 9، 14-15. هذا البروتوكول يصف preparatiعلى من الطعوم DSAEK من منظور تجهيز بنك العيون من نسيج القرنية المانحة، ولكن هذه التقنية قابلة للتطبيق مباشرة إلى الجراحين المهتمين في إعداد الخاصة بهم صفاحي الأنسجة القرنية المانحة، فضلا عن المهتمين في إجراء الدراسات المعملية المستندة أو السريرية على القرنية صفاحي تلك زرع. التوجهات المستقبلية لإعداد صفاحي القرنية وتشمل استخدام ليزر الفيمتو ثانية لمعالجة الأنسجة، وإنشاء &quot;رقيقة جدا&quot; DSAEK الأنسجة القرنية، أو إعداد لفائف من البطانية لغشاء القرنية Descemet في بطانة القرنية (DMEK) عملية جراحية. القرنية البطانية هو حقل الجراحة في تطور والعلاقة التكافلية بين بنك العيون وجراح القرنية سوف تستمر في تغيير كما هي الأمثل في التقنيات الجراحية.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم المعدات </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> Microkeratome </td><td> موريا </td><td> 1021174 </td></tr><tr><td> الاصطناعي قاعدة الغرفة الأمامية </td><td> موريا </td><td> 19161-562 </td></tr><tr><td> اصطناعية قبعة الغرفة الأمامية </td><td> موريا </td><td> 19172-220 </td></tr><tr><td> رئيس Microkeratome 300 </td><td> موريا </td><td> O304 </td></tr><tr><td> رئيس Microkeratome 350 </td><td> موريا </td><td> N791 </td></tr><tr><td> تعزية </td><td> موريا </td><td> 19360-3482 </td></tr></tbody></table>

القرنية تحضير الأنسجة من الجهات المانحة لغشائي keratoplasty

Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty

على مدى السنوات العشر الماضية، شهدت تقنيات زرع القرنية جراحية ثورية التغييرات 1،2. منذ تأسيسها، وقد تم زرع التقليدية سماكة القرنية لعلاج كامل لاستعادة البصر في تلك محدودة بسبب مرض القرنية. بعض العيوب لهذا النهج وتشمل درجة عالية من الاستجماتيزم بعد العملية الجراحية، وعدم الانكسار نتيجة يمكن التنبؤ بها، واضطراب على سطح العين. لقد تغير وضع القرنية Descemet في البطانية تجريد (DSEK)، زرع فقط ستروما الخلفي القرنية، غشاء Descemet، والبطانة، بشكل كبير علاج مرض بطانة القرنية. يتم تنفيذ DSEK من خلال شق أصغر، وهذا الأسلوب يتجنب عملية جراحية &quot;السماء المفتوحة&quot; مع مخاطرها من نزف أو الطرد، ويقلل من حالات الإصابة تفزر الجرح بعد العملية الجراحية، ويقلل من نتائج لا يمكن التنبؤ بها الانكسار، وربما خفض معدل رفض الزرع 3-6. ove_content &quot;&gt; في البداية، تم تنفيذ القرنية المانحة تشريح صفاحي الخلفي للDSEK يدويا 1 مما أدى إلى سماكة الكسب غير المشروع متغير والأضرار التي لحقت الأنسجة الحساسة بطانة القرنية أثناء معالجة الأنسجة. تم تشريح صفاحي الآلي (Descemet لتجريد القرنية غشائي الآلي، DSAEK) وضعت للتصدي لهذه قضايا. تشريح الآلي يستخدم نفس التقنية كما خلق LASIK القرنية رفرف بشفرة microkeratome الميكانيكية التي تساعد على خلق ترقيع نسيج موحد ورقيقة لجراحة DSAEK مع الحد الأدنى من القرنية فقدان الخلية البطانية في معالجة الأنسجة. وقد تم بنوك العيون وتوفير القرنيات سماكة الكامل لزرع جراحية لسنوات عديدة. في عام 2006، بدأت بنوك العيون لوضع منهجيات لتوريد نسيج القرنية قبل القطع للالقرنية البطانية. مع مدخلات من الجراحين القرنية، وقد وضعت بنوك العيون بروتوكولات شاملة لبأمان وفاعلية إعداد الخلفي و الأنسجة صفاحيأو DSAEK عملية جراحية. لا يمكن أن يؤديها هذا قبل الجراحة في بنك العيون. ويظهر البحث لا يوجد فرق كبير من حيث نوعية نتائج النسيج (7) أو المريض 8،9 باستخدام نسيج العين قبل القطع البنك مقابل الأنسجة الجراح الإعداد لإجراء عملية جراحية DSAEK. للجراحين معظم القرنية، وتوافر الأنسجة DSAEK قبل القطع القرنية يوفر الوقت والمال 10، ويقلل من الإجهاد على أداء تشريح المانحة القرنية في غرفة العمليات. ويرجع ذلك جزئيا من قدرة البنوك العين لتوفير مستوى عال من الجودة صفاحي الخلفي القرنية في الوقت المناسب، فقد أصبح DSAEK مستوى الرعاية لإدارة جراحية من مرض بطانة القرنية. الإجراء الذي نحن اصفا هو إعداد القرنية صفاحي الخلفي في بنك العيون لزرعها في جراحة DSAEK (الشكل 1).

زراعة القرنية البطانية هي تقنية جراحية لعلاج أمراض القرنية الخلفية. تشريح microkeratome الميكانيكية لإعداد نتائج النسيج في ترقيع أرق، أكثر متماثل مع خسارة أقل الخلية البطانية وتحسين النتائج. لا يمكن أن يؤديها التشريح في بنك العيون قبل جراحة زرع القرنية.

شهدت تقنيات جراحة زراعة القرنية تغيرات ثورية على مدار السنوات العشر الماضية1,2. ومنذ بدايتها، كانت عملية زراعة القرنية الكاملة التقليدية...

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنتاج أنسجة طعم قرنية صفائحية بشكل متسق تكون مناسبة للزراعة. يتم تحقيق ذلك أولاً من خلال إنشاء مجال معقم في غطاء التدفق الصفائحي. بعد ذلك، يتم تثبيت القرنية في غرفة أمامية اصطناعية.بعد ذلك، يُستخدم الميكروكيروتوم (microkeratome) لإجراء قطع سلس عبر القرنية وعبرها. وتتمثل الخطوة النهائية في نقل القرنية بعناية من الغرفة الأمامية الاصطناعية إلى وسط التخزين. وفي النهاية، يتم التحقق من نجاح تحضير الطعم الصفائحي عن طريق فحص القرنية باستخدام المصباح الشقي (slit lamp) وإجراء المجهر المراكبي (specular microscopy) للخلايا البطانية.تتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل عملية زراعة القرنية النافذة، في أن عملية dsec تستبدل الجزء الخلفي من القرنية فقط، مما يسمح بإجراء جراحة عبر شق صغير مع استخدام عدد أقل من الغرز، وتحقيق تعافٍ أسرع، ونتائج انكسارية محسنة. ويعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمراً بالغ الأهمية، حيث إن خطوات التشريح الصفائحي لعملية زراعة القرنية البطانية يصعب تعلمها.يلزم توخي الدقة والعناية عند قطع النسيج للحفاظ على أنسجة القرنية السليمة. ابدأ بتشغيل غاز النيتروجين في غطاء التدفق الرقائقي وضبطه على 50 إلى 60 PSI. يجب أن تشير قيمة ضغط التوربين في الوحدة إلى 3.3 إلى 3.4 bars.تأكد من أن الضغط في وحدة تحكم Moria يتراوح في حدود السبع مئة في المضختين الأولى والثانية. يجب أن يكون الضغط أقل من 200 PSI. باستخدام تقنية التعقيم، قم بتجهيز مجال معقم عبر فتح المجموعات المعقمة وأنسجة القرنية المتبرع بها، وتأكد من تعقيم مسبار قياس سمك القرنية وتنظيفه باستخدام isopropanol.بعد ذلك، وبعد إخراج المحتويات من الصينية المعقمة، قم بتوصيل خط التسريب بالصنبور القاطع (stop cock) ومد طرف الوخز الخاص بالخط إلى خارج غطاء التدفق الصفحي. ضع خط التسريب جانبًا وأخرج الصينية المعقمة. بعد ذلك، قم بوخز زجاجة من محلول ملحي متوازن وعلقها على ارتفاع أربعة أقدام تقريبًا من منطقة العمل.قم الآن بإجراء عملية فرك جراحي لمدة ست دقائق ثم جفف اليدين باستخدام منشفة معقمة. ارتدِ مئزراً معقماً وزوجين من القفازات المعقمة داخل غطاء الرأس. افتح صناديق الأدوات وضع محتوياتها على المجال المعقم.صُب 10 إلى 20 cc من محلول BSS في حوض معدني أو كوب أدوية واملأ ماصة معقمة. وباستخدام محلول BSS، قم بتوصيل صمام الإيقاف وخط التسريب بفتحة التسريب في الغرفة الأمامية واشطفها بمحلول BSS. توقف عن الشطف عندما يصبح محلول BSS مرئياً فوق المكبس.الآن، ضع الغرفة الاصطناعية فوق شاش معقم، وقم بخفض المكبس عن طريق تدوير حلقة تثبيت الطعم عكس اتجاه عقارب الساعة بمقدار خمسة مليمترات تقريبًا باستخدام الملقط. ضع القرنية في مركز المكبس بحيث يكون الجانب البطاني لأسفل، ثم قم بغسل النظام بـ BSS حتى تختفي جميع فقاعات الهواء من تحت القرنية. حرك القرنية بلطف حسب الحاجة.الآن، قم بتركيب غطاء الغرفة الأمامية في المساحات المفتوحة بحلقة القفل القاعدية وأحكم تثبيته بتدويره قليلاً بزاوية 15 درجة في اتجاه عقارب الساعة. بعد ذلك، ارفع المكبس وأكمل إحكام ربط الغرفة بالقاعدة باستخدام إصبع يرتدي قفازاً معقماً. المس الجزء العلوي من القرنية للتحقق مما إذا كان هناك ضغط كافٍ لإجراء العملية.ضع الآن مسبار قياس سماكة القرنية على سطح القرنية واطلب من المساعد تسجيل القراءة. إذا كان الانحراف المعياري أكثر من 10 microns، أعد إجراء القياس باستخدام يد ترتدي قفازًا معقمًا. انقل خرطوم التوربين إلى اليد الأخرى وقم بربط خرطوم التوربين في وحدة التحكم.بعد التخلص من القفازات الملوثة، ضع بضع قطرات من BSS على سطح القرنية ما لم يحدد الجراح غير ذلك. خلاف ذلك، اختر شفرة قطع بناءً على سمك القرنية، بحيث يكون الخيط مواجهاً لك والرقم متجهاً للأعلى. قم بتحميل الشفرة في الجانب الأيمن من رأس الميكروكيراتوم، مع البدء بالطرف المدبب أولاً.تجنب دائماً ملامسة الشفرة التي تثبت الرأس من كل جانب. قم بربطها بالتوربين، ثم اربط التوربين بخرطوم التوربين. اختبر تذبذب الشفرة عن طريق الضغط على دواسة الشفط مرة واحدة مع وضع رأس القطع في محلول BSS، وقم بتشغيل التوربين بشكل نبضي لمدة خمس ثوانٍ.الآن، قم بربط المكبس بإحكام باستخدام الأصابع. بعد ذلك، قم بتركيب الميكروكيراتوم (microkeratome) على القاعدة عند العمود ووضعه في اتجاه الساعة الخامسة. ثم اضغط مع الاستمرار على دواسة التوربين لتشغيل تذبذب الشفرة.أمسك الميكروكيراتوم (microkeratome) باستخدام إصبع السبابة والإبهام في منتصف المسافة بين قاعدة التوربين وقمته. وبحركة دائرية من المعصم، قم بإجراء قطع سلس ومنتظم عبر القرنية وعرضياً. تأكد من أن تمريرة الميكروكيراتوم سلسة ومنتظمة عبر الحفاظ على سرعة ثابتة، حيث إن عدم القيام بذلك قد يؤدي إلى عدم انتظام سمك الطعم.اترك دواسة التوربين وارفع الميكروكيراتوم (microkeratome) مباشرة إلى الأعلى بعيداً عن الوحدة، ثم قم بإيقاف تشغيل جهاز الشفط. ارتدِ قفازاً معقماً، وبالاستعانة بمساعد، أعِد فحص قراءة قياس سمك القرنية (pachymetry)، مع مراعاة أن الأنسجة رقيقة جداً وسهلة التلف.بعد ذلك، ضع بضع قطرات من محلول BSS المعقم على السرير السداوي المتبقي. ثم أعد وضع الغطاء الأمامي على القرنية داخل الغرفة. استخدم مسحة كروية لتركيز الغطاء في المنتصف بالاستعانة بالعلامات المتاحة، ولامتصاص أي محلول BSS موجود تحت الغطاء الأمامي.الآن افتح صمام الإيقاف، وأدر الغرفة جانبيًا واخفض المكبس ببطء كافٍ لمنع تشوه القرنية. قم بفك القاعدة واسمح للضغط الناتج عن تدفق BSS بدفع كوب الغرفة الاصطناعية لفصل القرنية عن الكوب. استخدم الملقط لسحب حافتها برفق عند مواضع الساعة التاسعة والثانية عشرة والثالثة.بمجرد تحريرها، أمسك الحافة عند موضع الساعة 12 وانقل القرنية بعناية إلى غرفة العرض بحيث يكون الجانب البطاني للأعلى. ثم أغلق غرفة العرض. اسمح للغطاء بالانفصال ببطء عن الغرفة الأمامية.سيضمن ذلك عدم انهيار القرنية، الأمر الذي قد يتسبب في تلف البطانة الغشائية. وأخيراً، قم بإجراء تقييم باستخدام المصباح الشقي وفحص مجهري عاكس للقرنية. بعد ذلك، قم بتبريد الغرف وتعبئة القرنية لنقلها إلى الجراح.يؤدي التشريح السليم للقرنية المانحة باستخدام الميكروكيراتوم الميكانيكي إلى الحصول على صفيحة قرنية مانحة ملساء وموحدة؛ ففي سجلات مرضية على مدار ستة أشهر، بلغ متوسط سمك القرنية قبل المعالجة 558 microns وبلغ سمك أنسجة القرنية الخلفية بعد المعالجة 158 microns. ويجب أن تحتفظ أنسجة القرنية الخلفية بكثافة عالية من الخلايا البطانية لتوفير وظيفة بطانية محسنة للمتلقي المزروع. وقد تم قياس ذلك بواسطة المجهر العاكس خلال الأشهر الستة الماضية.كانت جميع أنسجة القرنية التي اعتُبرت مؤهلة لعملية زراعة البطانة القرنية تحتوي على أكثر من 2,200 خلية بطانية لكل مليمتر مربع. وكان متوسط التغير في كثافة الخلايا البطانية (ECD) من مرحلة ما قبل المعالجة إلى ما بعدها ضئيلاً بنسبة 1.2%. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تحضير أنسجة القرنية لعملية الجراحة. وبمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن إتمامها في غضون 20 دقيقة إذا نُفذت بشكل صحيح.

corneal-donor-tissue-preparation-for-endothelial-keratoplasty

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

وتصف الورقة تقنية مبسطة لاستئصال القرنية وسلب أنسجة شبكية العين من الكرة الأرضية من الجهات المانحة جثي الإنسان. ووصف هذه التقنية هنا ستساعد على استئصال الأنسجة ذات نوعية جيدة لاستخدامها في زراعة الأعضاء، وأغراض الجراحية أو البحث دون الإضرار الأنسجة الأخرى من الكرة الأرضية العين.

أسلوب مبسط لل<em&gt; في الموقع</em&gt; استئصال القرنية ونزع الأحشاء من نسيج شبكي من الكرة الأرضية العين البشرية

تم استخدام الفئران كنموذج لدراسة العديد من أشكال الزرع ، بما في ذلك زرع القرنية.  نصف في هذا التقرير نموذج الفئران لكل من زراعة القرنية الحادة والمتأخرة.

الفئران زرع القرنية: نموذج لدراسة الشكل الأكثر شيوعا من الصلبة زراعة الأعضاء

القرنية البطانية هي تقنية جراحية تتطور باستمرار ونتيجة التقدم في زرع الطعوم أرق مع كل الخلافة 1. هنا نقدم تقنية لتسيطر تشريح الأنسجة اليدوية للسماح الفصل الآمن وتكرار من البطانة والأغشية ديسميه من أزرار لزرع القرنية والصلبة المانحة 2.

القرنية تحضير الأنسجة المانحة لديسميه غشاء القرنية غشائي

&lt; p class = 'jove_content'&gt; يقترح إجراء ليزر بالكامل في عملية الزرع البطانية. تعتمد التقنية الجراحية على استخدام ليزر الفيمتو ثانية لتحضير الأنسجة المانحة. ثم يتم استخدام تقنية اللحام بالليزر لتأمين البطانة المانحة في الموضع الصحيح.

&quot;جميع ليزر&quot; البطانية زراعة

يتم تقديم مثال على العلاج الجيني للفيروسات الغدية في القرنيات البشرية المزروعة بالأعضاء المصابة بالسكري نحو تطبيع التئام الجروح المتأخر وتقليل تعبير علامات الخلايا الجذعية الظهارية بشكل ملحوظ في هذه القرنيات. كما يصف تحسين هذه العملية في الثقافات الظهارية القزحية المخصبة بالخلايا الجذعية.

العلاج الجيني الفيروسة الغدانية لمرضى السكري اعتلال القرنية: التأثيرات على شفاء الجروح ووقف علامة الخلية التعبير في الإنسان القرنيات الجهاز مثقف والخلايا الظهارية الحوفي

ويصف هذا البروتوكول رواية ثلاثية الأبعاد في المختبر نموذجا، حيث القرنية الخلايا اللحمية والخلايا العصبية متمايزة مثقف معا المساعدة في دراسة وفهم التفاعلات بين أنواع الخلايا اثنين.

هندسة أنسجة القرنية: في المختبر نموذجا للتفاعلات Stromal العصب القرنية البشرية

نحن نصف استخدام الفحص المجهري للتماسك البصري كامل المجال كطريقة لتقييم الجودة العالية لسدى المتبرع بالقرنية. يمكن استخدام هذا البروتوكول لتحديد السمات التي تدل على الصحة أو المرض ، ويهدف إلى تحسين فحص واختيار الأنسجة المانحة ، وبالتالي نتائج رأب القرنية.

الفحص المجهري للتماسك البصري كامل المجال للتحليل الشبيه بالأنسجة لخصائص اللحمة في ترقيع القرنية

هنا ، يتم تقديم بروتوكول خطوه بخطوه لاعداد وزراعه الخنازير الانقسام أزرار القرنية. كما يظهر هذا النموذج العضوي المزروع عاده معدلات وفيات الخلايا في غضون 15 يوما ، مقارنه بالقرنيات المتبرعة البشرية ، فانه يمثل النموذج الأول الذي يسمح للزراعة طويلة الأجل من القرنيات غير البشرية دون أضافه السامة ديكسان.

نموذج ثقافة الجهاز البطانية القرنية الخنازير باستخدام أزرار القرنية الانقسام

هنا، نقدم بروتوكولا لفصل الخلايا الانفية القرنية (CEC) من غشاء Descemet (DM) باستخدام النيوديميوم: YAG (Nd:YAG) ليزر كنموذج مرض الجسم الحي السابق لاعتلال القرنية المغرور (BK).

تطوير نموذج تجريبي غير باضع بمساعدة الليزر لفقدان الخلايا الانهوفية القرنية

يصف هذا البروتوكول الخطوات الحرجة المطلوبة لإنشاء وتنمية ثقافات الخلايا البُلية القرنية من النباتات المنفّزة للأنسجة البشرية أو الأغنام. كما يتم تقديم طريقة لباطن القرنية الخلايا الفرعية على المواد الحيوية الميمبية.

نمو الإنسان والأغنام القرنية خلايا الخلايا الانبذيلية على الأغشية الحيوية

تجريد Descemet's Stripping Only هو إجراء تجريبي حيث يقوم المرضى الذين يعانون من الأمعاء القرنية المركزية الناتجة عن حثل القرنية البطانية Fuchs بتجريد غشاء Descemet للخلايا الطرفية لتجديد الطبقة البطانية. نقدم منهجية جديدة تحاكي DSO في القرنيات البشرية الضمور خارج الجسم الحي مع الشفاء المتسارع الذي يحفزه eFGF1 (NM141).

نموذج لزراعة أعضاء القرنية البشرية لتجريد Descemet فقط مع الشفاء المتسارع الذي يحفزه عامل نمو الخلايا الليفية المصمم هندسيا 1

تعلم إعداد الطبقة اللاميلية للقرنية باستخدام الميكروكيراتوم الميكانيكي لزراعة الغشاء الباطن. تحقق من جودة الزرع بالمجهر الانشقاقي والمجهر العاكس لضمان نتائج جراحية مثلى وشفاء أسرع.

القرنية تحضير الأنسجة من الجهات المانحة لغشائي keratoplasty

استكشف المزيد من الفيديوهات