A فأر معدل وفيات منخفض الموديل بالتشنج الدماغي لتقييم تأخر بعد نزيف تحت العنكبوتية التجريبية

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنتاج تشنج وعائي دماغي متأخر. في نموذج القوارض للنزيف تحت العنكبوتية البشري ، تتمثل الخطوة الأولى في جمع الدم الذاتي من شريان الذيل البطني. بعد ذلك ، يتعرض الغشاء القذالي أتلانتو.

بعد إزالة السائل الشوكي الدماغي ، يتم حقن الدم من خلال الغشاء. يتم إغلاق الجروح ، وبعد فترة من الزمن ، يتم جمع العينات لتحليلها. أخيرا ، يتم قياس التعديلات في مناطق المقطع العرضي للأوعية باستخدام الطرق النسيجية والمورفومترية.

سنتحدث اليوم عن طريقة يمكن أن تساعد في الإجابة على الأسئلة العلمية الرئيسية في مجال الأوعية الدموية العصبية ، مثل ما هي العلاقة بين التشنج الوعائي الدماغي والخلل الوظيفي العصبي اللاحق بعد النزيف تحت العنكبوتية ، مما يدل على الإجراء. اليوم سيكون الفني الرئيسي ، ميشيل كايل ، الذي يعمل في مختبري للبدء في تأكيد العمق المناسب للتخدير في فأر مخدر. عندما تصبح جاهزا ، قم بإعداد المنطقة الجراحية حول المنطقة تحت القذالية.

بعد ذلك ، ضع في وضع ضعيف على طاولة الجراحة. تعقيم الذيل مع البيتادين. قم بعمل شق مستقيم في خط الوسط بطول سنتيمتر واحد على الجانب البطني من الذيل ، وحدد بعناية شريان الذيل.

وضع قسطرة الأوعية الدموية بدقة في الشريان الذيل. باستخدام قسطرة معقمة قياس 26 ، قم بتقشير الشريان الذيل ، وتؤكد عودة الدم الجيدة الوضع المناسب لقسطرة الأوعية الدموية. أدخل غطاء انزلاق الحقن لإيقاف تدفق الدم حتى الحاجة إليه لاحقا.

بعد ذلك ، أدر الفئران إلى وضع الانبطاح ومسح المنطقة المحلوقة باستخدام Betadine. ابدأ بعمل شق عمودي في خط الوسط في مؤخرة الرقبة. بعد ذلك بصراحة ، قم بتشريح أنسجة المنطقة تحت القذالية حتى يتم تصور الغشاء القذالي في أتلانتا.

بمجرد عزل هذا الغشاء الأبيض اللامع ، قم بثقب الصهريج بإبرة قياس 25. أثناء تثبيت الإبرة بعناية في مكانها ، اسحب 0.5 مل من السائل النخاعي الدماغي في حقنة. يتم ذلك لموازنة التغير في الضغط داخل الجمجمة الذي يحدث عند حقن الدم.

بعد إزالة السائل النخاعي الدماغي ، اسحب 0.15 مل من الدم الشرياني من الذيل وحقنها ببطء في صهريج ماجنا. بعد الحقن ، اترك الإبرة في مكانها لمدة 30 ثانية. لضمان التخثر في الفضاء تحت العنكبوتية ، اسحب الإبرة بعناية ، وأغلق الشق بالكامل.

باستخدام جهاز تدبيس ، ضع شاشا معقما على شريان الذيل وضع في وضع الانبطاح على سطح دافئ مع الرأس بزاوية 20 درجة لمدة 20 دقيقة. هذا يسمح للدم بالتجمد في الصهاريج حول الشريان القاعدي بعد توقف النزيف ، استخدم السندات البيطرية لإغلاق الشق وكرر الحقن. بعد 48 ساعة ، بعد خمسة أيام من الحقنة الثانية بعد القلب والتروية وقطع الرأس ، أمسك الرأس بقوة بيد واحدة واستخدم عظم RUR لإزالة الجمجمة.

احرص على عدم إتلاف الدماغ تحته. استخرج الدماغ وجذع الدماغ بعناية من قبو الجمجمة وضعهما في محلول 4٪ بارا فورمالديهايد. قم بتخزين العينات على أربع درجات مئوية لمدة 48 ساعة.

بعد 48 ساعة ، انقل العينات إلى محلول سكروز بنسبة 30٪ حيث ستبقى لمدة أربعة أيام. بعد أربعة أيام ، قم بإنشاء أقسام من العينات تبدأ من الشريان المخيخي السفلي وتنتهي بالشريان المخيخي العلوي. بعد أربعة أيام ، استخدم ناظم البرد لقطع 12 ميكرون من العينات بدءا من الشريان المخيخي السفلي الأمامي وتنتهي بالشريان المخيخي العلوي.

قطع 20 قسما لكل. يتم عرض عينات جذع الدماغ من المصابة بالنزيف تحت العنكبوتية وبدونها. لاحظ تجمع الدم في الفضاء تحت العنكبوتية حول الشريان القاعدي.

يمثل هذا حجما كافيا من الدم للحث على تشنج الأوعية. تظهر هذه الصورة أقساما من الشريان القاعدي من كلتا المجموعتين. كانت مساحة المقطع العرضي للتجويف أصغر ولديها تمويج كبير في الصفيحة المرنة الداخلية في الفئران المصابة بنزيف تحت العنكبوتية.

في المقابل ، كان الشريان القاعدي من مجموعة التحكم في المحلول الملحي أكبر في المساحة ولم يكن به صفيحة مرنة داخلية مموجة. يوضح هذا الرسم البياني الشريطي أن مساحة المقطع العرضي لتجويف الشريان القاعدي كانت أصغر بكثير في الدم المحقون مقارنة بالحيوانات المحقونة المالحة بسبب التشنج الوعائي. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الحصول على دم أخصائي من شريان الذيل البطني ، وفضح الغشاء القذالي أتلانتو ، وحقن الدم في الفضاء تحت العنكبوتية لإعادة إنتاج نموذج النزيف تحت العنكبوتية للقوارض.

شكرا لمشاهدة هذا الفيديو.