November 4th, 2012
توضح هذه المقالة إدارة لوكس الموسومة البكتيريا على الفئران واللاحقة في الجسم الحي التحليل باستخدام التصوير تلألؤ بيولوجي IVIS.
يصف هذا الفيديو استخدام التصوير الحيوي لكامل الجسم لدراسة الاتجار بالبكتيريا في الفئران الحية ، مع التركيز على الكشف عن نمو البكتيريا داخل البكتيريا الغريبة للورم تقدم فئة جذابة من ناقلات علاج السرطان ، وتمتلك قدرة طبيعية على النمو بشكل تفضيلي داخل الأورام ، بعد الإعطاء الوريدي الذي ينمو إما خارج الخلايا السرطانية أو داخلها. تسهل السلالات البكتيرية المصممة للتعبير عن كاسيت جين لوكس الكشف عن البكتيريا والأورام المتزامنة. إن قيمة المراقبة الطولية غير الغازية للسلالات البكتيرية في الجسم الحي مقبولة جيدا ، مما يقلل من استخدام ويولد بيانات أكثر صلة من الناحية الإحصائية من فحوصات نقطة النهاية.
يتضمن هذا الإجراء تحريض الأورام تحت الجلد في الفئران. يسمح للأورام بالتطور والمراقبة بمرور الوقت. يتم إعطاء البكتيريا وتخضع الفئران لتصوير التلألؤ البيولوجي في نقاط زمنية مخصصة للتجارب الموضحة هنا.
تحدث الأورام تحت الجلد في الفئران ذات الخلفية المناعية أو التصدة الصعترية. اعتمادا على اختيار xenograft ، تزرع بكتيريا نوع Lux من الأنواع المرغوبة مثل ه القولونية ، كثقافات بين عشية وضحاها. يتم غسل الخلايا البكتيرية وإعادة تعليقها بالتركيز المطلوب للإعطاء عن طريق الوريد.
10 إلى ستة. يتم استخدام الخلايا البكتيرية بحجم حقن 100 ميكرولتر بشكل روتيني. يتم تحضير الفئران التي تحمل أورام تحت الجلد بشكل روتيني 100 ملم حجم كوبي للعلاج.
باستخدام إبرة حقنة قياس 29 ، يتم حقن التعليق البكتيري في وريد الذيل الجانبي. البكتيريا تتكاثر بشكل تفضيلي داخل كتلة الورم بمرور الوقت. تستمر البكتيريا داخل الورم في التكاثر لعدة أسابيع ويمكن اكتشافها عن طريق IVUS Imaging ما بين ثلاثة وستة أيام.
بعد الإعطاء للتصوير الحيوي ، يتم وضع الفئران الحية والمخدرة داخل غرفة 37 درجة من IVUS. إذا رغبت في ذلك ، يمكن تصوير العديد من الفئران في وقت واحد. يتم جمع الصور الفوتوغرافية والضوئية المضيئة باستخدام كاميرا CCD مبردة في إعدادات البرنامج المطلوبة.
اعتمادا على جهاز التصوير ، يمكن إجراء تحليل ثنائي أو ثلاثي الأبعاد. يتم تحقيق علاقة قوية وخطية بين أعداد البكتيريا داخل الورم ومستويات الضوء المنتج إذا سمحت بذلك. يمكن أيضا اكتشاف تقدير موثوق لأعداد البكتيريا في الجسم الحي LX التي تعبر عن البكتيريا من أعماق الجسم.
يتمتصور لوكس التي تعبر عن البكتيريا المتعايشة المستعمرة للأمعاء لعدة أسابيع. إدارة ما بعد التجويف مما يدل على فائدة التصوير الحيوي لتحليل البكتيريا التي تعبر عن لوكس داخل البحث.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
تصف هذه المقالة استخدام التصوير الحيوي للمجسم الكامل لدراسة حركة البكتيريا في الفئران الحية. يركز على اكتشاف نمو البكتيريا داخل الطعوم الغريبة للأورام، مما يسلط الضوء على إمكانات البكتيريا كمتجهات للعلاج من السرطان.
Bioluminescent bacterial imaging enables real-time, non-invasive tracking of bacterial trafficking in vivo, supporting preclinical evaluation of bacterial vectors for cancer therapy. This approach reduces animal usage while providing longitudinal, quantitative data on tumor targeting and bacterial persistence. The method enhances predictive confidence in early-stage therapeutic vector development by visualizing spatial and temporal dynamics of bacterial localization within tumors.
The method integrates into the discovery continuum from early vector screening through preclinical validation, enabling iterative design-build-test cycles for bacterial therapeutics.