January 5th, 2015
استقرار الفقري ضروري لتقليل التباين، وإنتاج إصابات في النخاع الشوكي التجريبية متسقة. باستخدام استقرار الجهاز مخصصة بالتزامن مع الجهاز المسبار جامعة نيويورك / MASCIS، لقد أثبتنا هنا المعدات والإجراءات المناسبة لتوليد عنق الرحم (C5) إصابات في النخاع استنساخه HEMI-contusive العمود الفقري لدى الفئران البالغة.
الهدف العام من هذا الإجراء هو توليد إصابة متسقة ودقيقة وقابلة للتكرار في الحبل الشوكي باستخدام مثبت فقري جديد ، والذي يمكن استخدامه مع العديد من أجهزة اصابات النخاع الشوكي. يتم تحقيق ذلك عن طريق تشريح الأنسجة المحيطة بفقرات عنق الرحم بعناية ، مع توخي الحذر لتقليل النزيف. الخطوة الثانية هي وضع في جهاز التثبيت وتثبيت الفقرات باستخدام أذرع التثبيت المسننة.
بعد ذلك ، قم بإجراء استئصال الصفيحة الفقرية لكشف المنطقة المستهدفة من الحبل الشوكي. تتمثل الخطوة الأخيرة في تركيب جهاز التثبيت على شكل حرف U على كتل جامعة نيويورك ، والاصطدام ، وإجراء SCI يتم إنشاء إصابة الحبل الشوكي المعدية القابلة للتكرار المتسقة في النهاية باستخدام جهاز التثبيت الجديد. سنوضح اليوم استخدام جهاز التثبيت الجراحي الفريد الخاص بنا مصحوبا بمصطدم الحبل الشوكي بجامعة نيويورك لإنشاء إصابات متسقة وقابلة للتكرار في الحبل الشوكي.
نستخدم جهاز التثبيت هذا في مختبرنا لتوليد إصابات الحبل الشوكي وكذلك لعمليات الزرع والحقن المجهري والصورة. ابدأ هذا الإجراء بتنظيف سطح الجراحة بنسبة 70٪ من الإيثانول. ضع وسادة تدفئة على منطقة الجراحة وقم بتشغيل وسادة التدفئة.
ثم ضع مسحات الشاش المعقمة والقطن وأدوات الأوتوكلاف الجراحية في منطقة الجراحة. بعد تغطية السطح بستارة جراحية معقمة ، استخدم معقم دقيق للتعقيم بين الجراحة للأدوات الجراحية. قم أيضا بتنظيف المثبت بنسبة 70٪ من الإيثانول قبل العمليات الجراحية وبينها.
الآن تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق مع الكيتامين زيلازين ، وتأكيد عمق التخدير عن طريق تحفيز قرصة إصبع القدم. ثم ضع مرهما واقيا على عيون لمنع جفاف القرنية. بعد ذلك ، احلق الجزء الخلفي من الجرذ من منتصف منطقة الصدر إلى رأسه.
ثم قم بإزالة الفراء باستخدام مكنسة كهربائية مزودة بفلتر HEPA. بعد ذلك ، ضع البيتادين على المنطقة المحلوقة كمقشر جراحي ونظف المنطقة بمناديل كحول الأيزوبروبيل بنسبة 70٪. حقن تحت الجلد 0.01 إلى 0.05 ملليغرام لكل كيلوغرام من البوبرينورفين وخمسة ملليغرام لكل كيلوغرام من الكاربروفين قبل إجراء الجراحة.
يجب بعد ذلك إعطاء البوبرينورفين كل ثماني إلى 12 ساعة والكاربروفين مرة واحدة يوميا خلال الأيام الأربعة إلى السبعة الأولى بعد الجراحة بعد ذلك ، ضع الجرذ في المنطقة الجراحية Prewarm. استخدم شفرة مشرط لإجراء شق خط الوسط من ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات على الجلد من قاعدة الرأس بشكل معدد إلى منتصف الصدر. ثم حدد خط الوسط للفافة والعضلات تحت الجلد الأمامية للغدة السباتية في أسفل الرقبة.
قطع شبه المنحرف والعضلات الأخرى على طول خط الوسط لتقليل النزيف. ابحث عن الأنسجة الدهنية الكامنة وراء العضلات عند خط الوسط. قطع العضلات الطفيلية بشكل لطيف.
بعد ذلك فصل طبقات العضلات باستخدام ضام الأنسجة الصغيرة حتى يتم الوصول إلى مستوى عملية T الصدرية الشائكة. ثم قطع العضلات المتصلة بعملية T اثنين الشائكة واستخدام هذا الهيكل كمعلم تشريحي. بعد ذلك ، قم بإزالة الطرف الغضروفي للعملية الشائكة T لتحسين رؤية فقرات عنق الرحم.
افصل العضلات المجاورة الشوكية بشكل جانبي عن العمليات الشائكة والصفائح ، ومع ذلك ، قم بتجنيب العضلات التي تغطي الصفيحة C3 لمنع النزيف. بعد ذلك ، قم بقص العضلات فوق اللاميني بشكل جانبي باتجاه الجوانب الموجودة على جانبي العمود الفقري. بعد أن تتعرض اللاميني الشوكي ، ضع في القناة على شكل حرف U من المثبت.
حدد موقع الفقرات C الخمس عن طريق حساب العمليات الشائكة من معلم T اثنين إلى T واحد C سبعة و C ستة وأخيرا C خمسة. في هذا الإجراء ، ضع ذراعي المثبت المصنوع من الفولاذ المقاوم للصدأ لتعليق عن طريق وضع الحواف المسننة للذراعين أسفل الجوانب الجانبية للفقرات C من خمس إلى ست فقرات. بعد تثبيت الذراعين مع وضع الفقرات في مكانها ، اضبط جهاز التثبيت لضمان تسوية العمود الفقري وتوسيطه.
أخيرا ، قم بقفل الذراعين عن طريق شد مسامير الإبهام الخاصة بالمثبت هناك. ثم قم بقطع الأربطة بين عمليات العمود الفقري واللاميني عند C أربعة إلى خمسة و C من خمسة إلى ستة. من أجل تحديد هامش الصفيحة C five باستخدام micro ron ، قم بقص نصف الصفيحة على اليمين C خمسة من أجل SCI.
بعد استئصال الصفيحة الفقرية ، انقل باستخدام المثبت من الطاولة الجراحية إلى جهاز الإصابة. قم بتأمين مع المثبت على حامل مثبت على جهاز الإصابة. قم بمحاذاة المكبس بدقة مع هدف الحبل الشوكي باستخدام مناور صغير جانبي تحت تكبير عالي.
حدد موقع مناطق دخول الجذر الظهري C five و C الستة على سطح الحبل الشوكي الظهري المكشوف دون استئصال الأذن الدوراني. صوب المكبس في منتصف DRE Zs المحددين وفي منتصف الطريق بين خط الوسط والحافة الجانبية للحبل الشوكي. باستخدام جهاز اصطدام الكتل بجامعة نيويورك برأس قطره 2.5 ملم ، قم بإنتاج كدمة C five HEMI بواسطة قضيب 10 جرام بارتفاع 12.5 ملم.
تحقق من الإصابة بصريا من خلال الكدمة الموجودة على الحبل الشوكي وتحقق من معلمات الإصابة التي يوفرها برنامج جامعة نيويورك. ثم خياطة العضلات والأنسجة الرخوة وأغلق شق الجلد بدبابيس جراحية. ضع مرهما مضادا للبكتيريا على موقع الجراحة وقم بإعطاء 5.0 مل من محلول ملحي معقم 0.9٪ تحت الجلد على للترطيب.
بعد ذلك ، ضع في بيئة يتم التحكم فيها بالحرارة مع توفير طعام رطب على الفراش وزجاجة ماء ذات صنبور طويل لسهولة الوصول إليها موضوعة على أرضية القفص. تقديم الرعاية لضمان الشفاء الكافي قبل إعادة إلى قفص المنزل. يوضح هذا الشكل قراءة لتأثير جيد جدا مع قياسات البيانات للنسبة المئوية للخطأ للتأثير ، وسرعة القضيب ، والارتفاع الأولي ، ووقت البدء ، وتقع جميع القيم بشكل جيد ضمن نافذة الخطأ المقبول.
على العكس من ذلك ، توضح هذه اللوحة البيانات الناتجة عن تأثير غير لائق ناتج عن التثبيت غير السليم للعمود الفقري والخطأ أثناء تصفير قضيب الاصطدام على سطح الحبل الشوكي. قبل تحديد ارتفاع قضيب الاصطدام ، يعمل جهاز التثبيت هذا على شل حركة الحبل الشوكي. ومع ذلك ، فإن الميزة العظيمة لهذا الجهاز هي التنقل الذي يوفره لنقل المستقر من طاولة جراحية إلى محطة الحقن المجهري للزرع إلى جهاز تأثير أو محطة تصوير.
يسمح تثبيت العمليات الفقرية الجانبية بتثبيت الفقرات المحددة ذات الأهمية ، مما يسمح بإصابة الحبل الشوكي الأكثر قابلية للتكرار يعد الاتساق والتكاثر من العوامل الحاسمة للنماذج التجريبية لإصابات الحبل الشوكي من أجل تقليل التباين وتحسين توضيح تأثيرات العلاج ، وكلها مهمة للتطبيق نحو الترجمة السريرية وإيجاد علاج لإصابة الحبل الشوكي.
تقدم هذه المقالة طريقة لإنشاء إصابات متسقة وقابلة للتكرار في الحبل الشوكي في الفئران البالغة باستخدام مثبت فقراتي جديد. تهدف الإجراء إلى تقليل التباين في إصابات الحبل الشوكي التجريبية من خلال استخدام جهاز تثبيت مخصص إلى جانب جهاز التأثير NYU/MASCIS.
Reliable preclinical spinal cord injury (SCI) models are critical for translational neuroscience and therapeutic development. This vertebral stabilization method addresses a key reproducibility bottleneck by minimizing spinal column movement during contusive injury, directly impacting the predictive confidence of SCI studies. Enhanced model consistency supports robust target validation and risk-adjusted portfolio advancement in neuroregeneration pipelines.
This stabilization method integrates at the interface of early discovery, lead identification, and preclinical validation for SCI and neuroregeneration programs.