موسع داخل الرغامى التنبيب لدراسة علم الأمراض وعلم وظائف الأعضاء من الرئة ماوس

الهدف العام من هذا الإجراء هو استخدام التنبيب داخل القصبة الهوائية لدراسة آثار العلاجات التجريبية على فسيولوجيا وأمراض الرئة المتطابقة. يتم تحقيق ذلك عن طريق قياس فأر التحكم أولا بحجم مماثل للفأر التجريبي من الفم إلى نقطة تشعب الشعب الهوائية في الرئة. بعد ذلك ، استخدم نظام إضاءة التنبيب BioLite لتحديد موقع القصبة الهوائية.

ثم تتم إزالة الألياف الضوئية بسرعة بعد إدخالها وترك القسطرة في مكانها. في الخطوة الأخيرة ، يضاف محلول يحتوي على العلاج التجريبي إلى الرئتين من خلال القسطرة. في النهاية ، يمكن تصور الانتشار المتساوي للجزيء محل الاهتمام في جميع أنحاء الرئة من خلال استخدام صبغة خضراء مصاحبة.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على طرق التنبيب الأخرى هي أنه باستخدام تقنيتنا ، يسهل نظام التخلص من الألياف الضوئية موقع الدراجة ثلاثية العجلات بالإضافة إلى وضع القسطرة ، مما يضمن التوصيل الأمثل للمادة ذات الأهمية في الرئة. سيتم توضيح الإجراء في الموقع ، ما بعد OC من مختبري قبل بدء الإجراء ، قم بقياس الطول بين الفم ونقطة الشعب الهوائية باستخدام فأر تدريب مماثل الحجم لتحديد الطول المناسب للقسطرة التي سيتم إدخالها أثناء التنبيب. ثم ضع مرهما بيطريا على كلتا عيني التجربة المخدر.

بعد عدة دقائق ، اضغط على قدم لتأكيد التخدير ، ثم ضع على التنبيب. الوقوف بزاوية حوالي 60 درجة. اربط القواطع العلوية فوق شريط مطاطي صغير موجود في الجزء العلوي من الحامل لتثبيت في مكانه ، ثم استخدم طرف Q لسحب لسان الماوس برفق إلى جانب واحد.

أصعب جانب في هذا الإجراء هو تحديد موقع القصبة الهوائية بوضوح ، وهي منفصلة عن أسو فيرغوس والتي يجب إدخال القسطرة فيها. من أجل النجاح ، تأكد من أن الحنجرة مضاءة جيدا بواسطة الألياف الضوئية ، وأن تكون على دراية بالاتجاه الذي يجب إدخال القسطرة فيه. أدخل نظام التنبيب بعناية حتى يتم تصور الحنجرة بمساعدة دليل يشبه الألياف البصرية.

بمجرد تصور لسان المزمار والغضاريف اللامية ، أدخل الألياف فوق لسان المزمار وبين الغضاريف اللامية التي تقدم النظام حتى يتم إدخال طول القسطرة المحدد مسبقا. بمجرد وضع القسطرة في مكانها ، قم بإزالة دليل الألياف البصرية بسرعة للسماح للحيوان بالتنفس عادة ثم قم بإدارة محلول الاهتمام في القسطرة. سيؤدي التنبيب الجيد إلى امتصاص المحلول على الفور عبر الأنبوب إلى الرئتين.

بمجرد امتصاص المحلول في الرئتين ، قم بإزالة الماوس من الحامل ووضعه مرة أخرى في القفص الأصلي. راقب الماوس حتى يبدأ في الحركة. بمجرد التأكد من صحة ، أعد القفص إلى رفه.

في التجارب الأولية ، تم استخدام محلول الصبغة الخضراء لتنبيب الفئران للممارسة. تم استئصال الرئتين على الفور بعد التنبيب لفحص مدى توزيع اللون بالتساوي. لوحظت الصبغة في معظم أجزاء الرئة مما يشير إلى التنبيب الناجح.

ثم تم تطبيق هذه التقنية لدراسة التليف الرئوي الناجم عن البليومايسين باستخدام C 57 BL ستة فئران بعد ثلاثة أسابيع من التنبيب داخل القصبة الهوائية باستخدام البليومايسين أو المحلول الملحي كعنصر تحكم. تم فحص الرئتين عن طريق التحليل النسيجي لفحص تطور التليف الناجم عن البيوميسين. لم يكن هناك تليف مرئي عند التكبير المنخفض أو العالي في رئتي المعالجة بالمحلول الملحي.

في المقابل ، أصيبت الفئران بالتنبيب بليومايسين بالتليف في جميع أنحاء رئتيها كما كان واضحا في كل من صور التكبير المنخفضة والعالية. كان محتوى هيدروكسي برولين أعلى في رئتي الفئران المعالجة بالبليومايسين مقارنة برئتي الفئران المعالجة بالمحلول الملحي. مما يدل على أن الفئران المعالجة بالبلومايسين تصاب بالتليف الرئوي.

ثم تم تغطية المنطقة المتضررة بشبكة شبكية من 121 نقطة وتم حساب عدد التقاطعات أو النقاط المتساقطة فوق المناطق الليفية والتعبير عنها كنسبة مئوية من إجمالي 121 نقطة ، وكانت النسبة المئوية للمناطق المتضررة التي تم عدها على هذا النحو متناسبة مع كمية البليومايسين التي يتم إعطاؤها. تأكد من الحصول على فكرة مسبقة عن مدى عمق القسطرة التي يجب إدخالها في القصبة الهوائية والتأكد من امتصاص المحلول من خلال القسطرة إلى الرئة بمجرد إضافتها.