Name: شبكية العين مفرزة النموذجي في القوارض بواسطة حقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-09-11T15:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 58 s
Description: اكتشف طريقة إنشاء انفصال شبكي تجريبي في القوارض باستخدام حقن هيالورونات الصوديوم تحت الشبكية. تتيح هذه التقنية دراسة موت خلايا المستقبلات الضوئية وتقييم العلاجات المحتملة بشكل موثوق.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

نشكر يندي تشاو لدعمها في استعراض نقدي. وأيد هذا العمل من قبل بوش ولومب الشبكية والجسم الزجاجي زمالة (HM)، ومنحة EY014104 المعهد الوطني للعيون (JWM)، بحوث لمنع العمى مؤسسة (DGV)، ليونز صندوق أبحاث العيون (DGV)، والتبرع السخي من عائلة Yeatts (JWM وDGV).

أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقا للجمعية للبحوث في مجال الرؤية وبيان العيون لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية، والمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها في ماساتشوستس العين والأذن المستوصف جنة رعاية الحيوان. 1. المعالجة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الماوس عمره 8 أسابيع مع حقن داخل الصفاق من خليط من 60 ملغ / كغ الكيتامين و 6 ملغ / كغ زيلازين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع شعيرات. يتم ذلك لأنها تتداخل مع التصور ووضع الصك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمدد التلميذ مع 5٪ و 0.5٪ فينيليفرين تروبيكاميد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع أهداب. يتم ذلك أيضا لأنها تتداخل مع التصور ووضع الصك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق التخدير الموضعي (0.5٪ بروباراكايين هيدروكلوريد حل العيون). </li></ol> 2. الجراحة تحت المجهر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين الماوس في نقاط البيع الجانبيةition مع الأنف نحو الجراح. يتم تنفيذ قرصة أخمص القدمين إلى تأكيد التخدير الجراحي، وارتدى قفازات معقمة قبل بدء الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شق الملتحمة الزمنية في حوف الخلفي وفصل الملتحمة من الصلبة. تجنب اختراق الصلبة. بعد هذه الخطوة، فهم الملتحمة في حوف مع ملقط للسيطرة على العين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء شق الصلبة الختم الذاتي باستخدام غيض من إبرة G 30 مع شطبة وأشار المباراة. جعل نفق الصلبة من خلال الصلبة واختراق الصلبة في المشيمية (الشكل 1). تجنب اختراق شبكية العين. في حالة حدوث نزيف المشيمية ويخرج من خلال الجرح الصلبة، مع إجراء قبض الرمح الجراحية حتى يتوقف النزيف. وسوف يكون هذا الجرح الصلبة مع ضغط العين ذاتيا مختومة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقب القرنية مع إبرة 30 G لتخفيف الضغط داخل العين. استخدام إبرة موازية لالقزحية لتجنب اصابة القزحية والعدسة خلال البريدn حاول في الغرفة الأمامية. فإن ضغط العين يسبب الجرح لختم الذاتي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج إبرة G 33 متصلة ميكرولتر حقنة هاميلتون 10 في الفضاء تحت الشبكية مع شطبة وأشار إلى أسفل (نحو العين الداخلية)، وحقن 3.5 ميكرولتر هيالورونات الصوديوم بلطف لفصل الشبكية العصبي الحسي من RPE الكامنة. تجنب اختراق شبكية العين مع إبرة 33 G لأن هيالورونات الصوديوم سوف يذهب الى الفضاء الزجاجي ولكن ليس الفضاء تحت الشبكية إذا تم اختراق شبكية العين. أيضا، وتجنب حقن السريع لأنه سيخلق المسيل للدموع عن طريق الفم، وسوف هيالورونات الصوديوم تتسرب إلى الغرفة الأمامية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا تدفق الخلط المائي الخروج من ثقب القرنية عن طريق دفع القرنية حول ثقب القرنية مع ملقط لضبط ضغط العين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكيد غياب التسرب من الجرح الصلبة باستخدام الرمح الجراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للحد من خطر تسرب هيالورونات الصوديوم، ووضع الغراء cyanoacrylate الجراحية علىالجرح الصلبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أعد الملتحمة إلى موقعها الأصلي باستخدام الغراء cyanoacrylate الجراحية. أن يزيد هذا من الحد من مخاطر تسرب هيالورونات الصوديوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فحص قاع العين باستخدام غطاء زجاجي والتأكد من إنشاء RD الفقاعي دون نزف تحت الشبكية. </li></ol> 3. بعد العلاج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق مرهم مضاد حيوي للعين باسيتراسين للحد من خطر العدوى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الفئران على وسادة التدفئة لمنع التخدير (مزيج من الكيتامين وزيلازين) من التسبب في انخفاض درجة حرارة الجسم لاحقا إلى انخفاض ضغط الدم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الفئران إلى قفص الحيوان بعد أن توقظ من التخدير. رصد الفئران يوميا لمضاعفات. إذا نشأت أي مضاعفات، الموت ببطء الفئران كما هو موضح أدناه. </li></ol> 4. تضحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الفئران عن طريق خلع عنق الرحم بعد الحقن داخل الصفاق من 100 ملغ / كغ بنتوباربيتال الصوديوم، وenucleaالشركة المصرية للاتصالات عيون في نقاط زمنية مناسبة لكل تجربة (لا يظهر). تجنب الضغط على العين أثناء استئصال بسبب هيالورونات الصوديوم قد يتسرب. يجب أن يكون ال RDs الفقاعي المستمرة لمدة 14 أيام على الأقل. </li></ol>

<ol><li>Anderson, D. H., Guerin, C. J., Erickson, P. A., Stern, W. H., Fisher, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+recovery+in+the+reattached+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Morphological recovery in the reattached retina.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 27, 168-183 (1986).</li>
<li>Cook, B., Lewis, G. P., Fisher, S. K., Adler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptotic+photoreceptor+degeneration+in+experimental+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Apoptotic photoreceptor degeneration in experimental retinal detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 990-996 (1995).</li>
<li>Zacks, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caspase+Activation+in+an+Experimental+Model+of+Retinal+Detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Caspase Activation in an Experimental Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 44, 1262-1267 (2003).</li>
<li>Zacks, D. N., Han, Y., Zeng, Y., Swaroop, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+Signaling+Pathways+and+Stress-Response+Genes+in+an+Experimental+Model+of+Retinal+Detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Activation of Signaling Pathways and Stress-Response Genes in an Experimental Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 47, 1691-1695 (2006).</li>
<li>Nakazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cytokine+responses+to+retinal+detachment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Vis%22%5BJournal%5D)">Characterization of cytokine responses to retinal detachment in rats.</a> Mol. Vis. 12, 867-878 (2006).</li>
<li>Nakazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+Necrosis+Factor-Mediates+Photoreceptor+Death+in+a+Rodent+Model+of+Retinal+Detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Tumor Necrosis Factor-Mediates Photoreceptor Death in a Rodent Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 1384-1391 (2011).</li>
<li>Hisatomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relocalization+of+apoptosis-inducing+factor+in+photoreceptor+apoptosis+induced+by+retinal+detachment+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Relocalization of apoptosis-inducing factor in photoreceptor apoptosis induced by retinal detachment in vivo.</a> Am. J. Pathol. 158, 1271-1278 (2001).</li>
<li>Hisatomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+role+of+photoreceptor+apoptosis+in+functional+damage+after+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Critical role of photoreceptor apoptosis in functional damage after retinal detachment.</a> Curr. Eye Res. 24, 161-172 (2002).</li>
<li>Nakazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte+chemoattractant+protein+1+mediates+retinal+detachment-induced+photoreceptor+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Monocyte chemoattractant protein 1 mediates retinal detachment-induced photoreceptor apoptosis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 104, 2425-2430 (2007).</li>
<li>Trichonas, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor+interacting+protein+kinases+mediate+retinal+detachment-induced+photoreceptor+necrosis+and+compensate+for+inhibition+of+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Receptor interacting protein kinases mediate retinal detachment-induced photoreceptor necrosis and compensate for inhibition of apoptosis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 107, 21695-21700 (2010).</li>
<li>Roh, M. I., Murakami, Y., Thanos, A., Vavvas, D. G., Miller, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Edaravone%2C+an+ROS+Scavenger%2C+Ameliorates+Photoreceptor+Cell+Death+after+Experimental+Retinal+Detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Edaravone, an ROS Scavenger, Ameliorates Photoreceptor Cell Death after Experimental Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 3825-3831 (2011).</li>
<li>Mantopoulos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tauroursodeoxycholic+acid+%28TUDCA%29+protects+photoreceptors+from+cell+death+after+experimental+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Tauroursodeoxycholic acid (TUDCA) protects photoreceptors from cell death after experimental retinal detachment.</a> PLoS One. 6, e24245(2011).</li>
<li>Yang, L., Bula, D., Arroyo, J. G., Chen, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventing+retinal+detachment-associated+photoreceptor+cell+loss+in+Bax-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Preventing retinal detachment-associated photoreceptor cell loss in Bax-deficient mice.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 648-654 (2004).</li>
<li>Cebulla, C. M., Ruggeri, M., Murray, T. G., Feuer, W. J., Hernandez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectral+domain+optical+coherence+tomography+in+a+murine+retinal+detachment+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Spectral domain optical coherence tomography in a murine retinal detachment model.</a> Exp. Eye Res. 90, 521-527 (2010).</li>
<li>Secondi, R., Kong, J., Blonska, A. M., Staurenghi, G., Sparrow, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundus+Autofluorescence+Findings+in+a+Mouse+Model+of+Retinal+Detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fundus Autofluorescence Findings in a Mouse Model of Retinal Detachment.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 5190-5197 (2012).</li>
<li>Machemer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+retinal+detachment+in+the+owl+monkey.+IV.+The+reattached+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Experimental retinal detachment in the owl monkey. IV. The reattached retina.</a> Am. J. Ophthalmol. 66, 1075-1091 (1968).</li>
<li>Ross, W., Lavina, A., Russell, M., Maberley, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+correlation+between+height+of+macular+detachment+and+visual+outcome+in+macula-off+retinal+detachments+of+%3C+or+%3D+7+days%27+duration%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">The correlation between height of macular detachment and visual outcome in macula-off retinal detachments of < or = 7 days' duration.</a> Ophthalmology. 112, 1213-1217 (2005).</li>
<li>Glatt, H., Machemer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+subretinal+hemorrhage+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Experimental subretinal hemorrhage in rabbits.</a> Am. J. Ophthalmol. 94, 762-773 (1982).</li>
<li>Toth, C. A., Morse, L. S., Hjelmeland, L. M., Landers, M. B. 3rd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrin+directs+early+retinal+damage+after+experimental+subretinal+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Fibrin directs early retinal damage after experimental subretinal hemorrhage.</a> Arch. Ophthalmol. 109, 723-729 (1991).</li>
<li>Benner, J. D., Hay, A., Landers, M. B. 3rd, Hjelmeland, L. M., Morse, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrinolytic-assisted+removal+of+experimental+subretinal+hemorrhage+within+7+days+reduces+outer+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Fibrinolytic-assisted removal of experimental subretinal hemorrhage within 7 days reduces outer retinal degeneration.</a> Ophthalmology. , 101-672 (1994).</li>
<li>Bhisitkul, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+intravitreal+triamcinolone+acetonide+against+photoreceptor+apoptosis+in+a+rabbit+model+of+subretinal+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of intravitreal triamcinolone acetonide against photoreceptor apoptosis in a rabbit model of subretinal hemorrhage.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 4071-4077 (2008).</li>
<li>Zeng, R., Zhang, Y., Shi, F., Kong, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Experimental+Mouse+Model+of+Retinal+Detachment%3A+Complete+Functional+and+Histologic+Recovery+of+the+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">A Novel Experimental Mouse Model of Retinal Detachment: Complete Functional and Histologic Recovery of the Retina.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 1685-1695 (2012).</li>
<li>Leon, S., Yin, Y., Nguyen, J., Irwin, N., Benowitz, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lens+injury+stimulates+axon+regeneration+in+the+mature+rat+optic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lens injury stimulates axon regeneration in the mature rat optic nerve.</a> J. Neurosci. 20, 4615-4626 (2000).</li>
<li>Murakami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+choroidal+neovascularization+via+brief+subretinal+exposure+to+a+newly+developed+lentiviral+vector+pseudotyped+with+Sendai+viral+envelope+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Inhibition of choroidal neovascularization via brief subretinal exposure to a newly developed lentiviral vector pseudotyped with Sendai viral envelope proteins.</a> Hum. Gene Ther. 21, 199-209 (2010).</li>
<li>Kong, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-complementary+AAV5+vector+facilitates+quicker+transgene+expression+in+photoreceptor+and+retinal+pigment+epithelial+cells+of+normal+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Self-complementary AAV5 vector facilitates quicker transgene expression in photoreceptor and retinal pigment epithelial cells of normal mouse.</a> Exp. Eye Res. 90, 546-554 (2010).</li>
</ol>

ماساشوستس للعيون والأذن المستوصف له مصلحة ملكية في ثلاث براءات الاختراع الأمريكية الموجهة لاستخدام verteporfin. بالإضافة إلى ذلك، ماساتشوستس العين والأذن المستوصف لديها ملكية في بعض طلبات براءات الاختراع الموجهة إلى تدمير الانتقائي للneovasculature المشيمية تحت الشبكية لعلاج الضمور البقعي وغيرها من الاضطرابات. ماساشوستس للعيون والأذن المستوصف يتلقى الإتاوات نتيجة لهذه البراءات وطلبات البراءات والدكتور ميلر يحصل على حصة من نفس وفقا لماساتشوستس للعيون والأذن المستوصف في السياسة المؤسسية وإجراءات براءات الاختراع، والذي يتضمن أحكام تقاسم الملوك. المؤلف الدكتور جوان جورج ميلر، وهو عضو مجلس إدارة في الماضي والمساهم السابق ألكون، وشركة، ويعمل حاليا كمستشار لألكون؛ إيماجين في مجال التكنولوجيا الحيوية، وشركة؛ ISIS الصيدلة؛ Kalvista الصيدلة؛ Regeneron صيدلة، وشركة و ONL التداوي، LLC. يقدم الدكتور ديمتريوس G. Vavvasكمستشار لشركة روش، جينينتيك، كالا الصيدلة.

وقد تم الإبلاغ عن عدة طرق لإنشاء نموذج RD في عيون القوارض 3-15، 22. معظمهم من استخدام الحقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم لأنه هو مادة لزجة تستخدم عادة أثناء الجراحة العين في البشر، وليس أنه يرتبط مع أي سمية العين المعروف 1-15. هيالورونات الصوديوم، بدلا من المعتاد المالحة أو الفوسفات مخزنة المالحة (PBS)، ويزيد من مدة RD. الطرق للحقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم استخدام أحد النهجين: نهج transvitreal 3-6 أو نهج بطريق الصلبة 7-15. يتم تنفيذ كلتا الطريقتين مع المراقبة من قاع. في النهج transvitreal، هو عرض حاقن تحت الشبكية في تجويف الجسم الزجاجي، يتم إنشاء retinotomy في الشبكية الطرفية، ويتم حقن هيالورونات الصوديوم في الفضاء تحت الشبكية. في هذه الطريقة، يتم إجراء اثنين من الدموع في شبكية العين، مما يزيد من خطر الشبكيةل نزف التي قد تذهب الى الفضاء تحت الشبكية. بالإضافة إلى ذلك، هناك خطر الإصابة العدسة عند إنشاء retinotomy. هناك عدة طرق لتعديل النهج بطريق الصلبة. في معظم هذه الطرق 7-12، بعد تخفيض ضغط العين مع ثقب الغرفة الأمامية، وإبرة G 30 متصلة حقنة مليئة هيالورونات الصوديوم يتم إدراجها مباشرة في الفضاء تحت الشبكية من خلال الملتحمة، الصلبة، المشيمية، وRPE. ثم يتم حقن هيالورونات الصوديوم في الفضاء تحت الشبكية. خطر الشبكية المسيل للدموع وإصابة العدسة باستخدام هذا الأسلوب بطريق الصلبة أقل من أن استخدام النهج transvitreal. ومع ذلك، فإن ثقب المحرز في الصلبة بواسطة إبرة 30 G كبيرة، خصوصا للعيون الماوس، وهيالورونات الصوديوم حقنها في الفضاء تحت الشبكية تسرب بسهولة من العين من خلال الجرح الصلبة. هذا يؤدي إلى انخفاض، RD أقل الثابتة والمتغيرة أكثر موت الخلايا المستقبلة للضوء. وعلاوة على ذلك، في حال حدوث نزيف في المشيميةالخطوة ثقب الصلبة، فإن نزيف تنتشر في الفضاء تحت الشبكية لأن ضغط العين قد انخفض قبل حقن هيالورونات تحت الشبكية. يمكن أن العديد من العوامل التي تؤثر تأثير RD على الشبكية منفصلة، ​​بما في ذلك نزيف تحت الشبكية وارتفاع واستمرار RD 16-21. خلية مستقبلة للضوء الزيادات الموت مع ارتفاع متزايد من RD 16، 17، وتلف الخلايا المستقبلة للضوء قد تكون أكثر واسعة الانتشار بسبب انخفاض الأكسجين والعناصر الغذائية الأساسية من المشيماء الشعيرية مع ارتفاع RD مقارنة RD الضحلة. نزف تحت الشبكية هي أيضا سامة للخلايا مستقبلة للضوء 18-21؛ الآليات المحتملة لهذا التسمم في انفصال الشبكية وتشمل نقص الأكسجة واضطراب التمثيل الغذائي التي كتبها نزف تحت الشبكية كحاجز نشرها، والعصبية المباشرة الناجمة عن مكونات الدم (مثل الحديد). إصابة العدسة، والتي تم الإبلاغ عن أن يكون لها تأثير وقائي على RETIخلايا العقدة نال 23، قد تؤثر أيضا على موت الخلايا المستقبلة للضوء بعد تحريض RD. بالإضافة إلى ذلك، إذا لم يتم اغلاق موقع الجرح الدخول، هيالورونات الصوديوم قد يتسرب مع التلاعب العين أثناء قلع. هذا قد يؤدي إلى تصنيف خاطئ لRD الضحلة كما، والتي قد تؤثر بدورها على تفسير النتائج. نحن تعديل طريقة بطريق الصلبة للحقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم لزيادة استنساخ المصمم وخفض معدل النزف تحت الشبكية. في خطوة حاسمة من هذا البروتوكول هو خلق شق الصلبة الختم الذاتي باستخدام إبرة G 30، والذي يمنع تسرب هيالورونات الصوديوم بعد الحقن. على عكس الطرق السابقة، يتم تنفيذ هذا البروتوكول من دون مراقبة من قاع بحيث يتم إيلاء اهتمام أكبر على الجرح الصلبة. تطبيق الغراء كما يمنع هيالورونات الصوديوم من تسرب من العين. في تجربتنا، فإن معدل النزف تحت الشبكية مع هذا البروتوكول ثكما أقل بكثير من تلك التي مع البروتوكولات الأخرى. في حالة حدوث نزيف المشيمية خلال الخطوة شق الصلبة، فإنه سيتم الخروج من العين من خلال الجرح الصلبة لأنه يتم تنفيذ هذه الخطوة قبل خفض ضغط العين. إذا نزف المشيمية يحدث بعد تخفيض ضغط العين وانفصال الشبكية العصبي الحسي، وتشريح الدم في الفضاء تحت الشبكية. وجدنا هذا أن يحدث في حوالي 5٪ من الحالات على النقيض من حوالي 10-20٪ مع غيرها من التقنيات. ينبغي استبعاد هذه الحيوانات من التحليل. ويمكن أيضا أن تستخدم هذه التقنية للحقن تحت الشبكية من بوساطة ناقلات نقل الجينات لاستهداف خلايا مستقبلة للضوء أو RPE 24، 25. لأن السيارة النموذجية (PBS، المالحة) لهذه الحقن بشكل ملحوظ أقل لزوجة من هيالورونات الصوديوم، تعاني التقنيات القياسية بأكثر التسريبات. تقنية الموضحة هنا، عن طريق الحد من هذه المخاطر، ويجعل تجارب نقل ناقلات أكثر استنساخه ويمكن الاعتماد عليها.

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/video/50660/">Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate</a>. The footnotes were removed from the abstract due to redundancy in the introduction.

Erratum: Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

يحدث موت الخلايا المستقبلة للضوء وانخفاض البصرية لاحقا عندما يتم فصل خلايا مستقبلة للضوء في شبكية العين من الأساسي الظهارة الصبغية. وينظر الفصل المادي بين المستقبلات الضوئية في مختلف اضطرابات الشبكية، بما في ذلك الضمور البقعي المرتبط بالعمر (AMD)، اعتلال المشيمية و الشبكية المصلي المركزي، واعتلال الشبكية السكري، واعتلال الشبكية الخداج، وكذلك تشرمي المنشأ (أي الناجم عن انقطاع في شبكية العين) انفصال الشبكية ( RD). حقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم هو النموذج المقبول على نطاق واسع لخلق RD الذي يؤدي إلى موت الخلايا المستقبلة للضوء، وتوفير نظرة ثاقبة على الفيزيولوجيا المرضية لمبصرة انحطاط 1-15. تنكس مبصرة تحت الشبكية الناجم عن حقن هيالورونات الصوديوم، لأول مرة في عام 2001 7، في الاستفادة من دورة زمنية معقولة (أيام إلى أسابيع). ومع ذلك، يمكن أن يكون التباين كبيرا من فقدان خلية مستقبلة للضوء من الحيوان الى أنيمالتر بسبب اثنين من العوامل الرئيسية التي تؤثر على موت الخلايا المستقبلة للضوء بعد RD: 1) ارتفاع ومدة RD، و 2) وقوع نزف تحت الشبكية. هناك منحنى التعلم حاد التقنية إلى طريقة التي تساهم في كل من العوامل. زيادة انحطاط خلية مستقبلة للضوء مع ارتفاع RD، والمسافة بين الصباغ الظهارية في شبكية العين (RPE) وطبقة المستقبلات الضوئية يزيد 16-17. بما يتفق مع هذه التقارير، وأظهرت التجارب السابقة لدينا المزيد من الموت مبصرة في ال RDs الفقاعي من ال RDs الضحلة. وأفيد أيضا أن نزف تحت الشبكية هي سامة للخلايا مستقبلة للضوء ويؤثر موت الخلايا مبصرة 18-21. وبالمثل، لاحظنا المزيد من الموت مبصرة في ال RDs مع نزف تحت الشبكية من ال RDs دون نزف تحت الشبكية. وبالتالي، وتقنيات للحد من التباين لابد من التركيز على تحقيق ارتفاعات ثابت من RD مع تجنب نزيف تحت الشبكية. لدينا طريقة معدلة من فيducing RD يمكن أن تجعل الفقاعي استنساخه وRD الثابتة على نفس الموقف من العين مع نادر الحدوث النزف تحت الشبكية. أجرينا عملية جراحية باستخدام نهج الزمنية لأنه من الأسهل لتحقيق حقل المنطوق أوسع مقارنة مع المواقع الأخرى. بعد شق الملتحمة، يتم إجراء شق الصلبة الختم الذاتي باستخدام إبرة G 30. يتم إنشاء نفق الصلبة، تليها الاختراق الصلبة في المشيمية. في حالة حدوث نزيف المشيمية في هذه الخطوة، فإن النزف خروج العين من خلال الجرح الصلبة، والنزيف يمكن وقفها من قبل قبض مع الرمح الجراحية. ثم يتم إجراء ثقب الغرفة الأمامية من القرنية لتقليل ضغط العين. هذا هو خطوة مهمة لحقن تحت الشبكية وحدها سوف يؤدي إلى زيادة ضغط العين مع انسداد الشريان الشبكية الناتجة ونقص تروية الشبكية الداخلية. ثم يتم إدخال إبرة G 33 متصلة ميكرولتر حقنة هاميلتون 10 في الفضاء تحت الشبكية، و 3.5 μ؛ يتم حقن ل هيالورونات الصوديوم بلطف لفصل الشبكية العصبي الحسي من RPE الكامنة. وعلى النقيض من الأساليب الأخرى لحمل RD التي يتم تنفيذها تحت الملاحظة قاع، يتم تنفيذ هذه التقنية تحت الملاحظة المباشرة. منذ الجرح الصلبة هو الختم الذاتي، سوف هيالورونات الصوديوم لا يتسرب بعد الحقن. أخيرا، يتم وضع الغراء على الجرح الصلبة، ويتم تثبيتها الملتحمة إلى موقعها الأصلي. هذه الخطوات تستمر أيضا يقلل من خطر تسرب هيالورونات الصوديوم. حقن 3.5 ميكرولتر هيالورونات الصوديوم يخلق ال RDs استنساخه (50٪ من الشبكية) في أعين الفئران عمره 8 أسابيع. خلق الجرح الختم الذاتي هو الخطوة الأكثر أهمية في إجراء تعديل لدينا لأنه يمنع هيالورونات الصوديوم حقن من تسرب من العين، مما يسمح الفقاعي استنساخه و RDS الثابتة.

<table><tbody><tr><td>Ketaject</td><td>Phoenix</td><td>2010025</td><td></td></tr><tr><td>AnaSed</td><td>LLOYD</td><td>4004821</td><td></td></tr><tr><td>5٪ فينيليفرين / 0.5٪ تروبيكاميد</td><td>صيدلية</td><td></td><td></td>ماساتشوستس للعيون</tr><tr><td>والأذن 0.5٪ بروباراكايين هيدروكلوريد محلول العيون</td><td>AKORN</td><td>17478-263-12</td><td></td></tr><tr><td>Provics</td><td>Alcon</td><td>8065183085</td><td></td></tr><tr><td>Webglue</td><td>باترسون بيطري</td><td>07-8566128</td><td></td></tr><tr><td>مجهر</td><td>لايكا</td><td>MG90</td><td></td></tr><tr><td>30G1 / 2 PrecisionGlide إبرة</td><td>BD</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>Weck-Cel Eye Spears</td><td>Beaver-Visitec</td><td>0008685</td><td></td></tr><tr><td>10 ميكرولتر حقنة</td><td>هاميلتون</td><td>7635-01</td><td></td></tr><tr><td>مقياس 33 ، إبرة 0.5 بوصة</td><td>هاميلتون</td><td>7803-05</td><td></td></tr><tr><td>18x18mm غطاء زجاجي</td><td>فيشر علمي</td><td>18-548A</td><td></td></tr></tbody></table>

شبكية العين مفرزة النموذجي في القوارض بواسطة حقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

حقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم هو طريقة مقبولة على نطاق واسع على إحداث انفصال الشبكية (RD). ومع ذلك، فإن ارتفاع ومدة RD أو حدوث نزيف تحت الشبكية يمكن أن تؤثر على موت الخلايا المستقبلة للضوء في شبكية العين منفصلة. وبالتالي، فإنه من المفيد لخلق ال RDs استنساخه دون نزف تحت الشبكية لتقييم موت الخلايا المستقبلة للضوء. نحن تعديل طريقة ذكرت سابقا لخلق الفقاعي و RDS المستمرة في موقع استنساخه مع نادر الحدوث النزف تحت الشبكية. في خطوة حاسمة من هذه الطريقة تعديل هو خلق شق الصلبة الختم الذاتي، والتي يمكن منع تسرب هيالورونات الصوديوم بعد الحقن في الفضاء تحت الشبكية. لجعل شق الصلبة الختم الذاتي، يتم إنشاء نفق الصلبة، تليها الاختراق الصلبة في المشيمية مع 30 G الإبرة. على الرغم من أن نزف المشيمية قد تحدث خلال هذه الخطوة، قبض مع الرمح الجراحية يقلل من معدل تنحنح المشيميةorrhage. يسمح هذا الأسلوب نموذج أكثر استنساخه وموثوق بها للوفاة مبصرة في الأمراض التي تنطوي على مثل RD RD تشرمي المنشأ، واعتلال الشبكية من الخداج، واعتلال الشبكية السكري، واعتلال المشيمية و الشبكية المصلي المركزي، والضمور البقعي المرتبط بالعمر (AMD).

لتقييم استمرار RD التي أدلى بها هذا البروتوكول، أدلى cryosections في أيام 3 و 7 و 14 بعد تحريض RD. واستخدمت ستة عيون لكل نقطة زمنية. تم استخدام الهيماتوكسيلين ويوزين (HE) تلطيخ لتصور أقسام. أظهر جميع المقاطع RD الفقاعي تقترب العدسة (الشكل 2). أظهرت عين واحدة نزيف تحت الشبكية في يوم 7. لم تظهر أي علامات على عيون أي عدوى أو إصابة العدسة. <img src="/files/ftp_upload/50660/50660fig1.jpg" alt="الشكل 1" fo:content-width="4.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50660/50660fig1highres.jpg" /> الشكل 1. خلق شق الصلبة الختم الذاتي. يظهر هذا التخطيطي صورة مستعرضة من العين الفأر العادي. خط أحمر يشير إلى شق الصلبة الختم الذاتي. نفق الصلبة تليها الاختراق الصلبة في المشيمية مع 30 G إبرة يخلق شق الصلبة الختم الذاتي. هذا الجرح الصلبةوسوف يكون مع ضغط العين، والتي يمكن منع تسرب هيالورونات الصوديوم بعد الحقن في الفضاء تحت الشبكية وتحقيق مفارز الشبكية الفقاعي المستمرة ذاتيا مختومة. <img src="/files/ftp_upload/50660/50660fig2.jpg" alt="الرقم 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50660/50660fig2highres.jpg" /> الشكل 2. بالطبع وقت انفصال الشبكية. وتظهر هذه الصورة قاع انفصال الشبكية الفقاعي دون نزف تحت الشبكية مباشرة بعد الجراحة. Cryosections مع الهيماتوكسيلين ويوزين (HE) عرض تلطيخ مستمرة انفصال الشبكية الفقاعي دون نزف تحت الشبكية من خلال 14 يوم على الأقل.

إنشاء مفارز الشبكية التجريبية مع ارتفاع استنساخه ومستمرة من مفرزة، ودون نزف تحت الشبكية، المهم لدراسة الفيزيولوجيا المرضية لفقدان خلية مستقبلة للضوء في شبكية العين مرض وتقييم التدخلات العلاجية المحتملة. هنا، ونحن التقرير مثل هذا الأسلوب في التفاصيل.

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث انفصالات شبكية تجريبية بارتفاع انفصال مستدام وقابل للتكرار دون حدوث نزيف تحت الشبكية. ويتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق شق الملتحمة الصدغية عند الليمب الخلفي لفصل الملتحمة عن الصلبة. وفي الخطوة الثانية، يتم استخدام طرف إبرة عيار 30 لعمل شق في الصلبة ذاتي الإغلاق وثقب في القرنية.بعد ذلك، يتم حقن sodium urinate في الحيز تحت الشبكية لفصل الشبكية الحسية العصبية عن ظهارة صباغ الشبكية الكامنة تحتها. وفي الخطوة النهائية، يوضع غراء cyanoacrylate على جرح الصلبة ويُعاد تثبيت الملتحمة في موضعها الأصلي، مما يقلل من خطر تسرب sodium hall urinate. وفي النهاية، يتم فحص قاع العين باستخدام غطاء زجاجي للتأكد من إحداث انفصال شبكي كتلي دون حدوث نزيف تحت الشبكية.يمكن أن تؤدي الطرق الحالية لتقليل انفصال الشبكية في القوارض إلى تباين في ارتفاع واستمرارية انفصال الشبكية، مما يؤدي إلى قياس معدلات غير متسقة لموت الخلايا. وباستخدام هذه التقنية، يمكن إحداث انفصالات شبكية فقاعية ومستمرة وقابلة للتكرار مع تقليل مخاطر النزيف تحت الشبكي، مما يسمح بتوفير نموذج موثوق لانفصال الشبكية في القوارض. ويعد إحداث انفصال الشبكية التجريبي في القوارض بسيطاً نسبياً من حيث التنفيذ، وله مسار زمني معقول، وهو مشابه جداً للمرض البشري.لذا، فهو نموذج ممتاز لدراسة آليات موت الخلايا المستقبلة للضوء والعلاجات الرامية إلى منع فقدان البصر. وفي اضطرابات التنكس الشبكي، وبما أن موت الخلايا المستقبلة للضوء يتفاوت في الشبكية المنفصلة، فمن المفيد إحداث انفصال قابل للتكرار دون حدوث نزيف تحت الشبكية. وذلك لأن زيادة مدة انفصال الشبكية أو حدوث نزيف تحت الشبكية يمكن أن يؤثرا على موت الخلايا المستقبلة للضوء.بعد تخدير فأر يبلغ من العمر ثمانية أسابيع، قم بتقليم شوارب الحيوان، ثم قم بتوسيع حدقة العين باستخدام محلول يحتوي على 5% phenyl rine و 0.5% tropic تحت مجهر جراحي. قص أهداب الحيوان، وطبق تخديرًا موضعيًا باستخدام محلول عيني بتركيز 0.5% propane hydrochloride. ضع الفأر في وضعية جانبية بحيث يكون الأنف مواجهًا للجراح، ثم قم بعمل شق في الملتحمة الصدغية عند الحاجز الخلفي، مع فصل الملتحمة عن الصلبة باستخدام ملقط.أمسك الملتحمة عند اللم وهو الحافة الملونة للتحكم في العين. ثم أمسك إبرة مقاس 30 gauge بحيث يكون طرفها المائل متجهاً للأعلى. استخدم سن الإبرة لعمل نفق عبر الصلبة، بحيث تخترق الصلبة وصولاً إلى المشيمية دون اختراق الشبكية.بعد ذلك، مع إمساك الإبرة ذات القياس 30 gauge بشكل موازٍ للقزحية، يتم ثقب القرنية لخفض الضغط داخل العين. والآن، مع توجيه الشطب إلى الأسفل، يتم إدخال إبرة ذات قياس 33 gauge متصلة بمحقنة Hamilton سعة 10 µL في الحيز تحت الشبكي، ثم حقن 3.5 µL من sodium urinate.سيؤدي ذلك إلى فصل حوالي 50% من الشبكية الحسية العصبية عن ظهارة صباغ الشبكية الكامنة. باستخدام الملقط، اضغط على القرنية حول ثقب القرنية للسماح للخلاط المائي بالتدفق من خلال ثقب القرنية، ثم استخدم رمحاً سليلوزياً جراحياً للتأكد من عدم وجود تسريب من جرح الصلبة لتقليل خطر تسريب يورينات الصوديوم. ضع غراء السيانوأكريليت على جرح الصلبة ثم أعد تثبيت الملتحمة في وضعها الأصلي.استخدم غطاءً زجاجياً لفحص قاع العين والتأكد من إحداث انفصال شبكي كروي دون حدوث نزيف تحت الشبكية. وأخيراً، ضع مرهمًا مضادًا حيويًا في العين لتقليل خطر الإصابة بالعدوى. حافظ على الفأر فوق وسادة تدفئة لمنع انخفاض درجة حرارة الجسم.بعد انخفاض ضغط الدم، يُعاد الحيوان إلى قفصه بعد إفاقته من التخدير. ولتقييم استمرارية انفصال الشبكية الناتج عن هذا البروتوكول، تم إعداد مقاطع تجميدية في الأيام الثالث والسابع والرابع عشر بعد تحفيز الانفصال.تم استخدام ست عيون لكل نقطة زمنية، واستُخدم صبغ الهيماتوكيسلين والإيوزين لتصوير المقاطع التي أظهر كل منها كتلة من انفصال الشبكية تقترب من العدسة.لم تظهر أي من العيون أي علامات على العدوى أو إصابة العدسة. وبمجرد إتقان هذه الجراحة، يمكن إجراؤها في حوالي خمس دقائق. وأثناء محاولة القيام بهذا الإجراء، من المهم تنفيذ كل خطوة برفق لتجنب التسبب في تسرب الصوديوم، أو حدوث نزيف تحت الشبكية نتيجة الإضاءة العالية، أو إصابة العدسة، حيث يمكن أن تؤدي كل هذه العوامل إلى موت الخلايا المستقبلة في الشبكية المنفصلة. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن تكتسب فهماً جيداً لكيفية إحداث انفصال شبكية تجريبي في القوارض مع تحقيق ارتفاع انفصال مستدام وقابل للتكرار دون حدوث نزيف تحت الشبكية.

retinal-detachment-model-rodents-subretinal-injection-sodium

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

المصدر: Park, S. W., et al. النهج الحزوي - الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية للعلاج الجيني في الفئران صبغة الشبكية الظهارية. J. Vis. Exp. (2015)يصف الفيديو طريقة الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية في ظهارة صبغة الشبكية (RPE) في نموذج الفأر. يفصل الإجراء من التخدير وإعداد العين إلى التوصيل الدقيق لنواقل الفيروسات ، مما يضمن تكامل الجينات والتعبير عنها في RPE.

الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية في ظهارة صبغة الشبكية في نموذج الفأر

نقدم هنا بروتوكولا مقبولا من قبل المجتمع بتنسيق وسائط متعددة لحقن بلعة من خلايا RPE تحت الشبكية في الفئران والفئران. يمكن استخدام هذا النهج لتحديد إمكانات الإنقاذ وملامح السلامة وقدرات البقاء على قيد الحياة لخلايا RPE المطعمة عند زرعها في نماذج حيوانية لتنكس الشبكية.

أداء تحت الشبكية الحقن في القوارض لتسليم خلايا الظهارة الصبغية الشبكية في تعليق

في شبكية العين الظهارة الصبغية (RPE) تعتبر بديلا الاستراتيجيات والعلاج الجيني لعدة ظروف التنكسية الشبكية. للترجمة السريرية، يطلب من النماذج الحيوانية عين الكبيرة لدراسة التقنيات الجراحية المطبقة في المرضى. هنا نقدم نموذجا أرنب لعملية جراحية تحت الشبكية الموجهة نحو زرع RPE، التي هي متعددة وفعالة من حيث التكلفة.

خطوة بالبروتوكول الخطوة لجراحة تحت الشبكية في الأرانب

الحقن تحت الشبكية هي التقنية الأكثر شيوعا لتوصيل العوامل العلاجية الكبيرة مثل البروتينات والنواقل الفيروسية إلى المستقبلات الضوئية وظهارة صبغة الشبكية. يتم وصف طريقة بديلة في الفئران تستهدف بنجاح الفضاء تحت الشبكية بأقل قدر من الضرر الجانبي وأوقات التعافي السريعة.

بديل والمصادق عليها طريقة حقن للوصول إلى الفضاء تحت الشبكية<i&gt; عبر</i&gt; نهج Transcleral الخلفي

حقن سوبريتينال قد طبقت على نطاق واسع في الدراسات الإكلينيكية للعلاج باستبدال الخلايا الجذعية لكبر السن البقعي. في هذه المقالة تصور، يصف لنا تقنية حقن سوبريتينال أقل مخاطرة واستنساخه وتعديل التحديد عن طريق نهج ترانس-سكليرال لتوصيل الخلايا إلى عيون الفئران.

وضع البروتوكول المكرر لزرع الخلايا الظهارية الصبغية الشبكية البشرية ترانس-سكليرال سوبريتينال في عيون الفئران

هنا نظهر نهجاً جديداً لاستخدام التصوير المقطعي التماسك الضوئية المجال الطيفي عالية الدقة (الموارد البشرية-التنمية المستدامة-أكتوبر) لمساعدة إيصال وكلاء العلاج الجيني في الفضاء سوبريتينال وتقييم تغطية مساحية وتميز حيوية مستقبله.

القرار أولتراهيغ الماوس الضوئية التماسك التصوير المقطعي لمساعدة الحقن داخل مقلة العين في أبحاث العلاج الجيني الشبكية

يمكن أن تكون الخلايا الظهارية الصبغية الشبكية كعلاج استبدال خلية لشكل متقدمة من الجفاف المرتبطة بالسن البقعي. ويصف هذا البروتوكول توليد نموذج كبير العينين من ضمور الجغرافية وزرع الخلايا الظهارية الإنسان صبغة الشبكية المستمدة من الخلايا الجذعية الجنينية سوبريتينال إلى هذا النموذج من المرض.

سوبريتينال زرع الخلايا الظهارية الصبغية الشبكية المستمدة من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية إلى نموذج كبير العينين من ضمور الجغرافية

الرئيسيات غير البشرية (NHP) هي نموذج مثالي لدراسة العلاجات الخلوية للشبكية البشرية بسبب أوجه التشابه التشريحية والجينية. تصف هذه المخطوطة طريقة للزرع تحت الزرع تحت الجبهي للخلايا الظهارية الصباغية الشبكية في عين NHP واستراتيجيات لمنع المضاعفات أثناء الجراحة المرتبطة بالتلاعب البقعي.

زرع ظهارة صبغة الشبكية في نموذج الرئيسيات غير البشرية لأمراض الشبكية التنكسية

يقدم هذا البروتوكول نهجا عبر الصلبة موجها بالرؤية عبر الحدقة لتقديم الطعوم الخلوية تحت الشبكية بأمان ودقة ، مع معدل منخفض من المضاعفات الجراحية ، في متلقي الفئران مع أو بدون تنكس الشبكية.

زرع الطعوم تحت الشبكية الموجهة عبر الحدقة في نموذج فأر تنكس الشبكية

توضح هذه المقالة طرق الحقن تحت الشبكية في الفئران ، باستخدام التصور أثناء الجراحة للتحكم في كل من موقع الحقن ومنطقة انفصال الشبكية.

التصور أثناء الجراحة للحقن تحت الشبكية وانفصال الشبكية في الفئران

اكتشف طريقة إنشاء انفصال شبكي تجريبي في القوارض باستخدام حقن هيالورونات الصوديوم تحت الشبكية. تتيح هذه التقنية دراسة موت خلايا المستقبلات الضوئية وتقييم العلاجات المحتملة بشكل موثوق.

شبكية العين مفرزة النموذجي في القوارض بواسطة حقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم

استكشف المزيد من الفيديوهات