Name: A نموذج من الفئران تحت العنكبوتية نزف (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 40 s
Description: تعلم إجراء نزيف تحت العنكبوتية في الفئران باستخدام نموذج موحد يعتمد على ثقب الشريان داخل التجويف. يتيح هذا الأسلوب مراقبة الضغط داخل الجمجمة والتدفق الدماغي لضمان ظروف فسيولوجية دقيقة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

يتم تمويل البحوث الحالية من قبل مؤسسة البحوث Solorz-زاك.

وتعرض جميع العمليات الجراحية للمراجعة الأخلاقية والتي وافقت عليها حكومة بافاريا العليا (الرقم المرجعي: 55.2-1-54-2532.3-13-13 و-2532-136-11). الحيوانات هم من الذكور C57BL / 6 الفئران مع وزن الجسم من حوالي 25 غرام. 1. إعداد الحيوان <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لحث التخدير عن طريق وضع الماوس في غرفة. تدفق غرفة مع 5٪ isoflurane وحتى يفقد الحيوان وعيه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن التخدير خلط الغشاء البريتونى: الفنتانيل (0.05 ملغ / كلغ)، ميدازولام (5 ملغ / كلغ) وmedetomidine (0.5 ملغ / كلغ). تحقق ردود الفعل قبل وبانتظام أثناء العملية. بإعادة حقن ثلث المبلغ الأولي للساعة للحفاظ على التخدير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التنبيب orotracheally مع أنبوب مصنوع من 20 G القسطرة الوريدية 11. لالتنبيب إصلاح الحيوان على منصة مائلة (30 درجة)، سحب اللسان مع ملقط عازمة، تصور الحبال الصوتية تحت مجهر التشغيل وادخال أنبوب في القصبة الهوائيةخلال الإلهام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس في وضعية الرقود والتحقق من موضع الصحيح من أنبوب مع قطعة من القطن أو microcapnograph. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط أنبوب التنبيب إلى تنفس صناعي. تهوية الفأر مع هواء الغرفة تستكمل مع 25٪ أكسجين مع تواتر 180-220 الأنفاس / دقيقة وحجم المخ من 200-250 ميكرولتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط أنبوب التنبيب إلى microcapnograph. الحفاظ على نهاية الزفير PCO 2 في 30 ملم زئبقي عن طريق ضبط تردد التهوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج التحقيق في درجة الحرارة المستقيم ووضع الحيوان على وسادة التدفئة من أجل الحفاظ على 37 درجة مئوية درجة حرارة الجسم الأساسية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق الاستشعار pulsoximeter الحلقي على مخلب الخلفيتين الأيمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح الجلد فوق الجمجمة مع زوج من مقص. يجب أن يكون شق حوالي 0.5 سم طويلة وبين الأذن والعين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح العضلات الصدغي الأيسر مع مشرط من العظم الصدغي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الغراء مقياس الجريان دوبلر الليزر (LDF) على التحقيقالعظم الصدغي الأيسر. تعقد لجنة التحقيق في موقف ثابت حتى يصلب الغراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حفر حفرة حوالي 1.5 مم مع حفر الأسنان في العظم الصدغي الأيسر. تبريد العظام مع المياه المالحة لمنع ضرر الحرارة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج التحقيق ICP في تجويف الجمجمة. دفع كما ظهريا ممكن لمنع تلف الأنسجة الدماغية والنزيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان التحقيق هو في موقف الحق، وإصلاح، وختم ذلك مع الأسمنت. السماح للجفاف الاسمنت لمدة 5 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحويل الماوس بعناية إلى موقف ضعيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاستمرار مراقبة ضغط الدم، يقثطر الشريان الفخذي الأيسر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاتصال القسطرة الفخذية إلى جهاز مراقبة ضغط الدم. </li></ol> 2. SAH التعريفي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح الجلد مع زوج من مقص من القص إلى الذقن (2 سم). تشريح النسيج الضام بصراحة ودفع الغدد اللعابية جانبا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح الشريان السباتي المشترك الأيسر (CCA) وتعبئة ذلك. الحفاظ علىالعصب المبهم، الذي يعمل في نفس غمد النسيج الضام مثل التقييم القطري المشترك. التحرك الجمجمة وفضح وتعبئة ICA واللجنة الاقتصادية لأفريقيا باستخدام نفس التقنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ligate اللجنة الاقتصادية لأفريقيا كما cranially بقدر الإمكان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نظم مبكرا اثنين من أكثر لعملية ربط خيوط حول اللجنة الاقتصادية لأفريقيا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسد التقييم القطري المشترك وICA مؤقتا مع microclips. ضع microclips مع قضيب microclip. تأكد من تطبيقها لقطات بشكل صحيح عن طريق سحب بلطف الى الوراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع حفرة لخيوط الإدراج في اللجنة الاقتصادية لأفريقيا مع مقص السفينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج خيوط البرولين 5-0 مع 12 ملم طول في اللجنة الاقتصادية لأفريقيا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق موقع الإدراج مع واحد ربط ترتيبها مسبقا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة microclips مع قضيب microclip من التقييم القطري المشترك وICA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع خيوط مع ملقط في ICA حتى تطلع برنامج المقارنات الدولية. ارتفاع مفاجئ في برنامج المقارنات الدولية يشير إلى نزيف الاستقراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب خيوط فورا وligate اللجنة الاقتصادية لأفريقيا عن طريق إغلاق كل من العلاقات العامةعملية ربط earranged على التوالي. هذا يمنع النزيف من موقع الإدراج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خياطة الجرح الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد المعلمات الفسيولوجية للحيوان لمدة 20 دقيقة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة برنامج المقارنات الدولية وتحقيقات LDF وخياطة الجرح الجلد. </li></ol> 3. نهاية التجربة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يروي الحيوان transcardially مع 20 مل من المياه المالحة (درجة حرارة الغرفة)، يليه 20 مل من PFA 4٪ في برنامج تلفزيوني (4 درجات مئوية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح الدماغ من الجمجمة. قطع الجمجمة في خط الوسط وبين تجاويف المدارية. ثم قشر العظام من الدماغ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقييم التوزيع الدم في الفضاء تحت العنكبوتية. </li></ol> 4. الاعتبارات في حالة البقاء على قيد الحياة جراحة (لا يظهر في شريط الفيديو) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن كاربروفين (4 ملغ / كغ تحت الجلد) لتسكين بعد العملية الجراحية مباشرة بعد التخدير تحريض. خلال فترة المراقبة بعد العملية الجراحية كاربروفين (4 ملغ / كغ تحت الجلد) يتم حقن كل 24 ساعة. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدلا من الغازية قياس ضغط الدم الاستفادة من نظام مراقبة ضغط الدم موسع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإنهاء التخدير حقن تحت الجلد وكلاء استعداء: النالوكسون (1.2 ملغ / كلغ)، فلومازينيل (0.5 ملغ / كلغ) وatipamezole (2.5 ملغ / كلغ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ينزع الأنبوب الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد أن إستعاد من ردود الافعال وضع الحيوان في غرفة مسخن. الحفاظ على الحيوانات في حوالي 32 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم فحص الحيوانات بانتظام للتنفس عفوية وحالتهم العامة خلال الساعات الأولى بعد الجراحة. إذا تأثر جذع الدماغ الحيوانات ومشاكل في التنفس، وينبغي أن الموت الرحيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم فحص الحيوانات اليومية لحالتهم العامة ووزن الجسم فضلا عن العجز العصبية والحسية 15. </li></ol>

<ol><li>Cahill, J., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subarachnoid+hemorrhage%3A+is+it+time+for+a+new+direction%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction.</a> Stroke. 40, 86-87 (2009).</li>
<li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subarachnoid+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 369, 306-318 (2007).</li>
<li>Lin, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage-induced+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm.</a> J. Neurosci. Methods. 123, 89-97 (2003).</li>
<li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 183, 136-140 (2009).</li>
<li>Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+induction+of+subarachnoid+hemorrhage+in+mice+by+intracranial+pressure+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring.</a> J. Neurosci. Methods. 190, 164-170 (2010).</li>
<li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li>
<li>Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26, 1279-1283 (1995).</li>
<li>Kamii, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amelioration+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+transgenic+mice+overexpressing+CuZn-superoxide+dismutase%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Amelioration of vasospasm after subarachnoid hemorrhage in transgenic mice overexpressing CuZn-superoxide dismutase.</a> Stroke. 30, 867-871 (1999).</li>
<li>Parra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage+associated+cerebral+vasospasm%3A+methodological+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol.+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis.</a> Neurol. Res. 24, 510-516 (2002).</li>
<li>Broderick, J. P., Brott, T. G., Duldner, J. E., Tomsick, T., Leach, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+and+recurrent+bleeding+are+the+major+causes+of+death+following+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Initial and recurrent bleeding are the major causes of death following subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 25, 1342-1347 (1994).</li>
<li>Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+intraoperative+monitoring+of+blood+pressure+and+arterial+pCO2+during+surgical+anesthesia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Non-invasive intraoperative monitoring of blood pressure and arterial pCO2 during surgical anesthesia in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 159, 261-267 (2007).</li>
<li>Hockel, K., Trabold, R., Scholler, K., Torok, E., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+anesthesia+on+pathophysiology+and+mortality+following+subarachnoid+hemorrhage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Transl.+Stroke+Med%22%5BJournal%5D)">Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Exp. Transl. Stroke Med. 4, 5(2012).</li>
<li>Wang, Z., Schuler, B., Vogel, O., Arras, M., Vogel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+optimal+anesthetic+protocol+for+measurements+of+cerebral+autoregulation+in+spontaneously+breathing+mice%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">What is the optimal anesthetic protocol for measurements of cerebral autoregulation in spontaneously breathing mice?</a> Exp. Brain Res. 207, 249-258 (2010).</li>
<li>Schwartz, A. Y., Masago, A., Sehba, F. A., Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat%3A+a+refinement+of+the+endovascular+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Experimental models of subarachnoid hemorrhage in the rat: a refinement of the endovascular filament model.</a> J. Neurosci. Methods. 96, 161-167 (2000).</li>
<li>Feiler, S., Plesnila, N., Thal, S. C., Zausinger, S., Scholler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+matrix+metalloproteinase-9+to+cerebral+edema+and+functional+outcome+following+experimental+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrovasc.+Dis%22%5BJournal%5D)">Contribution of matrix metalloproteinase-9 to cerebral edema and functional outcome following experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Cerebrovasc. Dis. 32, 289-295 (2011).</li>
</ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

خيارات العلاج بعد SAH شحيحة ومعظمها عديمة الجدوى. لذا الفيزيولوجيا المرضية من تلف في الدماغ بعد النزفية يحتاج إلى أن يفهم كذلك من أجل تحديد أهداف علاجية جديدة وتطوير مناهج علاجية جديدة. موحدة ونماذج حيوانية استنساخه بشكل جيد في الحيوانات المعدلة وراثيا، أي الفئران، تعتبر حاسمة لمثل هذه التحقيقات. أصبح نموذج فريق العمل نموذجا يستخدم على نطاق واسع لSAH لأنه يشبه البشر في الفيزيولوجيا المرضية بشكل وثيق، ولكن ما يعوق استخدامه في استنساخ الفئران عن طريق انخفاض وتقلب الشخصية ال...

SAH هو نوع فرعي السكتة الدماغية مع أقل نتائج مفيدة للمرضى: 40٪ من المرضى يموتون في غضون شهر بعد 1 النزيف ونادرا ما يكون الناجين نتيجة إيجابية سريريا. وتحدث الغالبية العظمى من SAHS عفوية (80٪) من خلال تمزق تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة والتي يقع معظمها على طول الأمامي والخلفي التواصل الشريان، الشريان القاعدي، والشريان الدماغي الأوسط (MCA) 2. مثل تمدد الأوعية الدموية يصعب نموذج في الحيوانات، وبالتالي يتم تنفيذ النماذج الحيوانية من SAH إما عن طريق حقن الدم في الفضاء / البطينين الدماغي تحت العنكبوتية أو عن طريق ثقب اللف سفينة تحت العنكبوتية. حقن الدم الذاتي في ماجنا صهريج من السهل القيام بها وقابلة للتكرار، حيث بلغ حجم الدم يمكن التحكم مباشرة 3. للأسف بعض جوانب الفيزيولوجيا المرضية SAH، على سبيل المثالإصابة السفينة، لا يمكن أن تكون على غرار هذا الإجراء. آخر النهج التقني لتحريض SAH هو افتتاح الوريد داخل الصهريج 4. ومع ذلك، فإن فريق العمل داخل اللمعة في فرع MCA يبدو أن الإجراء الذي نماذج الفيزيولوجيا المرضية في البشر أوثق 5. وقد تم تطوير أسلوب ووصف لأول مرة في الفئران عن طريق Bederson والزملاء، وفي الوقت نفسه من خلال Veelken وزملاؤه 6،7. في وقت لاحق تم تعديل نموذج ثقب داخل اللمعة على الفئران 8،9. يتم إدراج خيوط في الشريان السباتي الخارجي (ECA) وتأهل إلى قاعدة الجمجمة عن طريق الشريان السباتي الداخلي (ICA). عند نقطة المتفرعة من MCA خيوط يثقب السفينة ويؤدي الى نزيف في الفضاء تحت العنكبوتية في قاعدة الجمجمة. الدم ثم يوزع في الفضاء تحت العنكبوتية المتبقية على طول الشقوق والأوعية الدموية. نزيف توقفت قبل تشكيل جلطة في موقع ثقب، ولكن rebleedings، ذوي الخوذات البيضاءوغالبا ما تكون ضارة معنوى في المرضى 10، يمكن أن يحدث. وفقا لذلك، اصبحت نموذجا خيوط اللف نموذج SAH تستخدم على نطاق واسع خلال السنوات القليلة الماضية. العيب أكثر ما ذكر من طراز خيوط انثقاب هو أن نزيف حجم لا يمكن التحكم فيها مباشرة، وبالتالي قد تكون متغيرة. يمكن أن تخفض بشكل كبير من قبل هذا التباين رقابة مشددة من علم وظائف الأعضاء الحيوانية وآخر النزفية-ICP. الفئران لديها ميزة كبيرة أن عددا كبيرا من السلالات المعدلة وراثيا المتوفرة. ولكن نظرا لصغر حجمها تميل العمليات الجراحية لتكون أكثر تعقيدا مما كانت عليه في الأنواع الكبيرة، مثل الفئران أو الأرانب. وبالتالي فإن خفض الحجم تقنيات المتقدمة للفئران على الفئران في كثير من الأحيان لا يؤدي إلى النتائج المرجوة، على سبيل المثال كما الفئران لديها محدودة جدا وزن الجسم وحجم الدم التقنيات موسع لضغط الدم وتحليل غازات الدم وكذلك لتشبع الهيموجلوبين ورصد معدل ضربات القلبيجب أن تطبق كلما كان ذلك ممكنا. وفقا لذلك، فإن الهدف من المنشور الحالي هو وصف نموذج ثقب خيوط للSAH في الفئران وإظهار كيف يمكن تنفيذ هذا النموذج بطريقة موحدة وقابلة للتكرار للغاية.

<tbody><table><tr><td colspan = "4" ><قوي>قوي المعدات < / قوي></td></tr> <tr><td>عملية المجهر</td><td>Leica</td><td>KL2500</td><td></td></tr><tr><td>مبخر الأيزوفلوران</td><td>هارفارد إنسترومنتز</td> جهاز التنفس الصناعي <td>المبخر</td><td></td></tr><tr><td></td><td>التدفق المستمر هوغو ساكس</td><td>مينيفنت 845</td><td></td></tr><tr><td>ميكروكابنوغراف</td><td>هوغو ساكس</td><td>نوع 340</td><td></td></tr><tr><td>تحكم في درجة الحرارة</td><td>FHC</td><td>DC تحكم</td><td></td>في درجة</tr><tr><td>الحرارة حفر الأسنان</td><td>Paggen</td><td>Labset- N</td><td></td></tr><tr><td>مراقب ICP</td><td>Codman</td><td>ICP مراقب</td><td></td></tr><tr><td>ضغط الدم</td><td>AD Instruments</td><td>Bridge Amp مضخة حقنة FE221</td><td></td></tr><tr><td></td><td>World Precision</td><td>Instruments SP101IZ</td><td></td></tr><tr><td>مقياس نبض</td><td>كينت Scientific</td><td>MouseSTAT</td><td></td></tr><tr><td>LDF</td><td>Perimed</td><td>Periflux 5000</td><td></td></tr><tr><td>مراقب البيانات التناظرية</td><td>AD Instruments</td><td>Power Lab 16/35</td><td></td></tr><tr> <td colspan = "4" ><قوي> مادة < / قوي ></td></tr> <tr><td>الأسمنت لتثبيت مسبار ICP</td><td>Speiko</td><td>Carboxylate غراء الأسمنت</td><td></td></tr><tr><td>لتثبيت مسبار LDF</td><td>غراء بوب سميث إندستريز</td><td>سيانواكريليت (ماكسي كيور ومجموعة إنستا)</td><td></td></tr><tr><td>القسطرة الوريدية</td><td>جونسون جونسون</td><td>جيلكو المجنحة القسطرة الوريدية. REF 4076</td><td>أنابيب أنبوب التنبيب المعدلة</td></tr><tr><td>لقسطرة الفخذ</td><td>أنابيب</td><td>البوليثين الطبية ذات التجويف الدقيق سميث ؛ معرف 0.28 مم OD 0.61 مم ؛ REF 800/100/100</td><td>قطع إلى خيوط بطول 30 سم</td></tr><tr><td>لثقب الوعاء الدموي</td><td>Ethicon</td><td>Prolene 5-0</td><td>قطع إلى طول 12 مم</td></tr><tr><td>معدات جراحية</td><td>Fine Scientific Instruments</td><td>ملقط طبي # 5 ، مقص الوعاء 8 سم ، مشبك صغير 4 مم الفك</td><td></td></tr></tbody></table>

a نموذج من الفئران تحت العنكبوتية نزف

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

في هذا المنشور الفيديو يتم تقديم نموذج الفأر موحدة من نزيف تحت العنكبوتية (SAH). نزيف يسببها دائرة اللف ويليس انثقاب (فريق العمل) وثبت من خلال الضغط داخل الجمجمة (ICP) الرصد. وبذلك يتم التوصل إلى توزيع الدم متجانسة في الأماكن المحيطة تحت العنكبوتية تداول الشرايين وشقوق المخيخ. يتم الاحتفاظ فسيولوجيا الحيوان التنبيب والتهوية الميكانيكية، والرصد المستمر على الخط من مختلف الفسيولوجية والقلب والأوعية الدموية المعلمات: درجة حرارة الجسم، النظامية ضغط الدم ومعدل ضربات القلب، والهيموغلوبين التشبع. وبالتالي الضغط نضح الدماغي يمكن رصدها بإحكام مما أدى إلى حجم أقل من الدم متغير extravasated. وهذا يسمح لتوحيد أفضل من اللف ثقب خيوط في الفئران ويجعل نموذج كامل تكرار للغاية. وبالتالي فإنه متاحة بسهولة للدراسات الدوائية والفيزيولوجية المرضية في النوع البري وراثيةغيرت لاي الفئران.

معدل الوفيات بمجرد يتقن تقنية جراحة الإجراء لا تثير أي وفيات أثناء العملية. النزيف أيضا لا يمكن أن يتحقق في جميع الحيوانات تقريبا. وفيات ما بعد الجراحة هو 30-40٪ مع معظم الحيوانات تموت في يوم 1 بعد الجراحة (الشكل 5). تقدر ICP بعد SAH برنامج المقارنات الدولية قبل النز...

يوصف نموذج الفأر موحدة من نزيف تحت العنكبوتية من قبل الدائرة داخل اللمعة ويليس ثقب. ويتم رصد ثقب السفينة وتحت العنكبوتية النزيف عن طريق مراقبة ضغط داخل القحف. بالإضافة تسجل مختلف المعايير الحيوية والتي تسيطر عليها للحفاظ على الظروف الفسيولوجية.

A نموذج من الفئران تحت العنكبوتية نزف

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث نزيف موحد تحت العنكبوتية في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق توصيل المخدر أولا بأجهزة المراقبة للإشراف على الظروف الفسيولوجية أثناء الجراحة. الخطوة الثانية هي تطبيق أجهزة استشعار للتروية الدماغية وقياس الضغط داخل الجمجمة كمعلمات رئيسية لتحريض النزيف.بعد ذلك ، يحدث النزيف تحت العنكبوتية عن طريق ثقب خيوط الأوعية الدموية. الخطوة الأخيرة هي تنقيط وعزل الدماغ لتصور توزيع الدم المفرط. الميزة الرئيسية لأداء هذه التقنية في الفئران بدلا من ريكس هي أنه يمكننا الاستفادة من المعدلة وراثيا.بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لأن التنبيب ، ومراقبة علم وظائف الأعضاء متعدد الوسائط ، وكذلك إعداد الأوعية الدموية يمثل تحديا كبيرا في الفئران. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم الخطوات الجراحية. ستظهر الإجراء كاثرين شولا ، طالبة دكتوراه من مختبري.لديها أكثر من عامين من الخبرة في أداء نموذج SAH هذا. لبدء المكان ، يقوم مخدر على منصة مائلة يعمل تحت المجهر بسحب اللسان بملقط منحني لتحديد موقع الحبال الصوتية. بمجرد تصورها ، قم بالتنبيب أثناء الإلهام باستخدام أنبوب مصنوع من قسطرة وريدية عيار 20.بعد ذلك ، ضع الماوس في وضع الانبطاح وتحقق من الموضع الصحيح للأنبوب بقطعة من القطن أو كابنوغراف صغير إذا تم وضعه بشكل صحيح. قم بتوصيل أنبوب التنبيب بجهاز التنفس الصناعي. قم بتهوية الماوس بهواء الغرفة ، مع 25٪ أكسجين.قم بتوصيل أنبوب التنبيب بجهاز الكابنوغراف الدقيق. حافظ على الضغط الجزئي للزفير النهائي لثاني أكسيد الكربون عند 30 ملم من الزئبق عن طريق ضبط تردد التهوية. بعد إدخال مسبار درجة حرارة المستقيم ، ضع على وسادة تدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37 درجة مئوية ، ضع مستشعر مقياس التأكسج النبضي الحلقي على المخلب الخلفي الأيمن.بعد ذلك ، قم بعمل شق من العين إلى الأذن. اسحب الجلد وقم بتشريح العضلة الصدغية اليسرى من العظم الصدغي. بمجرد تعريضه ، قم بلصق مسبار مقياس تدفق دوبلر بالليزر على العظم الصدغي الأيسر.امسك المسبار في وضع ثابت حتى يصلب الغراء. احفر حفرة يبلغ قطرها حوالي 1.5 ملم في العظم الصدغي الأيسر أثناء الحفر. تبريد العظم بالمحلول الملحي.لمنع التلف الحراري ، أدخل مسبار الضغط داخل الجمجمة في تجويف الجمجمة وادفعه للأمام ظهريا قدر الإمكان لمنع تلف الأنسجة والنزيف. بمجرد وضع المسبار بشكل صحيح ، قم بتثبيته وإغلاقه بالأسمنت واتركه يجف لمدة خمس دقائق. عندما يجف الأسمنت ، أدر الماوس بعناية إلى وضع ضعيف.باستخدام التقنيات القياسية ، قم بقسطرة الشريان الفخذي الأيسر لمراقبة ضغط الدم بشكل مستمر. بمجرد وضعها في مكانها ، قم بتوصيل قسطرة الفخذ بجهاز مراقبة ضغط الدم. أولا ، افتح الجلد بزوج من المقص من القص إلى الذقن حادة.قم بتشريح النسيج الضام وادفع الغدد اللعابية جانبا لكشف الشريان السباتي المشترك الأيسر. اعزل CCA عن الأنسجة المحيطة ، مع الحرص على عدم إتلاف العصب المبهم الموجود في نفس غمد النسيج الضام. بعد ذلك ، قم بتعريض وعزل الشريان السباتي الداخلي والشريان السباتي الخارجي بعناية.بمجرد عزلها ، قم بربط ECA إلى أقصى حد ممكن ، وقم بترتيب ربطين إضافيين مسبقا حول ECA لاستخدامهما لاحقا باستخدام انسداد قضيب ، CCA و ICA مؤقتا باستخدام مشابك دقيقة. اسحب المشابك برفق للخلف للتأكد من وضعها بشكل صحيح. لتحريض النزيف ، نستخدم خيوط البرولين بطول 12 ملم خمسة صفر.قم بقطع ثقب صغير في ECA باستخدام مقص الوعاء وأدخل الفتيل. بمجرد وضع الفتيل في مكانه ، أغلق موقع الإدخال باستخدام أحد الأربطة المرتبة مسبقا. بعد ذلك ، قم بإزالة المشابك الدقيقة باستخدام قضيب المشبك الصغير للحث على النزيف.تقدم الفتيل إلى ICA حتى يرتفع برنامج المقارنات الدولية. يشير الارتفاع المفاجئ لبرنامج المقارنات الدولية إلى تحريض النزيف ، وسحب الفتيل على الفور وربط ECA عن طريق إغلاق كلا الروابط المرتبة مسبقا على التوالي. هذا يمنع النزيف خارج موقع الإدخال.خياطة الجرح الجلدي ومراقبة المعلمات الفسيولوجية للحيوان لمدة 20 دقيقة أخرى. في نهاية هذه الفترة ، قم بإزالة كل من مجسات ICP و LDF بعد التروية القلبية العابرة. قم بإزالة الدماغ وتقييم توزيع الدم في الفضاء تحت العنكبوتية قبل النزيف ، يبلغ دور المقارنات الدولية حوالي أربعة ملليمترات.يؤدي نزيف الزئبق إلى زيادة حادة في برنامج المقارنات الدولية تصل إلى 120 ملم. ثم تستقر قيم برنامج المقارنات الدولية الزئبقية في غضون خمس دقائق عند حوالي 30 ملم من الزئبق. بالإضافة إلى ذلك ، يرتفع ضغط الدم مباشرة بعد النزيف.تظهر قيم مقياس تدفق دوبلر بالليزر التمثيلي التعريفي بعد تحريض النزيف انخفاضا كبيرا في إعادة تروية التروية الدماغية إلى مستوى مختلف بشكل فردي يحدث في غضون خمس دقائق بعد الإهانة. في هذا المثال ، لوحظ توزيع الدم على طول الشرايين التي تغذي الدماغ والشقوق المخيخية. بعد ثلاث ساعات من النزيف ، تشير الخطوط الحمراء إلى توزيع الدم على طول الشرايين التي تغذي الدماغ.كان الجانب المماثل للنزيف مغطى بدم أكثر من نصف الكرة المقابل الذي شوهد. فيما يلي منحنى البقاء على قيد الحياة بعد SAH في 49 ذكرا ، C 57 BL ستة فئران. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم مراقبة الظروف الفسيولوجية لتأمين كمية قابلة للتكرار من النزيف بعد تطوره.مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال النزيف تحت الشبكية لاستكشاف آليات مسار نقص التروية الدماغية في وقت مبكر بعد الإهانة.

a-murine-model-of-subarachnoid-hemorrhage

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

أم الدم نزيف تحت العنكبوتية (SAH) والذي يحدث نزيف في الفضاء تحت العنكبوتية عندما تمزق تمدد الأوعية الدموية. في حين كانت معدلات الاعتلال والوفيات من هذا الحدث على انخفاض بسبب النهج تحسين العلاج، وخطر بالتشنج بعد نزيف تحت العنكبوتية لا يزال هو نفسه كما كان قبل عدة سنوات. كانت أهمية إنشاء نموذج حيواني شاملة وقابلة للتكرار لتحديد بدء الأحداث من تشنج وعائي دماغي محور البحوث منذ أول استخدام للالفئران في نموذج بالتشنج التجريبية في عام 1979 من قبل...

A فأر معدل وفيات منخفض الموديل بالتشنج الدماغي لتقييم تأخر بعد نزيف تحت العنكبوتية التجريبية

يوضح الفيديو تحريض النزيف تحت العنكبوتية عن طريق الانثقاب داخل الأوعية الدموية في نموذج الفأر. يتم إجراء شق في منطقة عنق الفأر المخدر للوصول إلى الشريان السباتي المشترك وتشعبه. يتم إدخال خيوط من خلال الشرايين لثقب فرع الشريان داخل الجمجمة ، مما يؤدي إلى نزيف تحت العنكبوتية.

تحريض نزيف تحت العنكبوتية في نموذج الفأر من خلال الانثقاب داخل الأوعية الدموية

يوضح هذا الفيديو إجراء إنشاء نموذج فئران نزيف تحت العنكبوتية. يتم زرع فأر مخدر بمجسات لقياس الضغط داخل الجمجمة وتدفق الدم الدماغي. يتم تحديد الموقع المستهدف ، ويتم إدخال الإبرة في وضع ما قبل التصاميم. ثم يتم حقن الدم الذاتي في الفضاء تحت العنكبوتية ، مما يزيد من الضغط داخل الجمجمة ويقلل من تدفق الدم الدماغي ، مما يؤسس النموذج.

إنشاء نموذج فأر نزيف تحت العنكبوتية الناجم عن حقن الدم الذاتي

يجمع نموذج النزيف تحت العنكبوتية (SAH) التجريبي الذي يتم التحكم فيه بالضغط داخل الجمجمة في الأرنب بين الإجراءات القياسية - قنية الشريان تحت الترقوة وثقب الصهريج الماغنا عبر الجلد ، والذي يتيح المحاكاة الدقيقة للحالات الفيزيولوجية المرضية البشرية بعد SAH. نقدم إرشادات خطوة بخطوة ونناقش النقاط الجراحية الرئيسية لإنشاء SAH التجريبي الناجح.

الأرنب نموذج الدم تحويلة لدراسة الحاد وعقابيل في وقت متأخر نزيف تحت العنكبوتية: الجوانب التقنية

والهدف من هذه المادة هو تقديم أسلوب يسمح بإعادة بناء ثلاثي الأبعاد لشجرة الأوعية الدموية للمخ في الفئران بعد الدقيقة المحسوبة التصوير المقطعي وتحديد كميات من شرائح كامل السفينة التي يمكن استخدامها لقياس بالتشنج الدماغي في مورين نماذج من نزيف تحت العنكبوتية.

أسلوب حجمي للتحديد الكمي للمخ بالتشنج في نموذج موريني نزيف تحت العنكبوتية

وصفنا في هذا البروتوكول نموذج الماوس تحت العنكبوتي القياسي (SAH) عن طريق حقن مزدوج من الدم الكامل الذاتي في ماجنا سيستيرنا. تمثل درجة عالية من توحيد إجراء الحقن المزدوج نموذجًا متوسطًا إلى حادًا من SAH مع أمان نسبي فيما يتعلق بالوفيات.

مزدوجة الحقن المباشر للدم في ماغنا سيستيرنا كنموذج للنزف تحت العنكبوتية

لا يزال النزف تحت العنكبوتية يحمل عبئا كبيرا من الوفيات والمراضة لدى الإنسان. لتسهيل إجراء مزيد من البحث في الحالة والفيزيولوجيا المرضية ، يتم تقديم نموذج حقن واحد قبل chiasmatic.

حقنة واحدة من الدم الذاتي قبل Chiasmatic للحث على نزيف تحت العنكبوتية التجريبي في نموذج الفئران

نقدم هنا نموذجا موحدا للفأر SAH ، الناجم عن ثقب خيوط الأوعية الدموية ، جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) بعد 24 ساعة من العملية لضمان موقع النزيف الصحيح واستبعاد الأمراض الأخرى ذات الصلة داخل الجمجمة.

نموذج ثقب الأوعية الدموية الداخلية للنزيف تحت العنكبوتية جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI)

نموذج الفئران من التئام الجروح الجلدية التي يمكن استخدامها لتقييم المركبات العلاجية في إعدادات الفسيولوجية والمرضية في جسم المريض.

نموذج الفئران من التئام الجروح

التعديلات النسيجية والكيميائية الحيوية بعد تمدد الأوعية الدموية الاستبعاد endograft لا تزال غير واضحة. وصفنا نموذجا جديدا من زرع endograft على تمدد الأوعية الدموية الفئران. من خلال تحليل خثرة مع وبدون المثابرة تيار الدورة الدموية واجهة، وتقييم المواد الحيوية الجديدة اللف، وهذا النموذج يساعد على فهم أفضل اللف تمدد الأوعية الدموية البيولوجيا المرضية الاستبعاد.

نموذج الفئران من جديد اللف الأورطي إصلاح تمدد الأوعية الدموية

تعلم إجراء نزيف تحت العنكبوتية في الفئران باستخدام نموذج موحد يعتمد على ثقب الشريان داخل التجويف. يتيح هذا الأسلوب مراقبة الضغط داخل الجمجمة والتدفق الدماغي لضمان ظروف فسيولوجية دقيقة.

A نموذج من الفئران تحت العنكبوتية نزف

استكشف المزيد من الفيديوهات