Name: كله من جبل Immunolabeling الشم مستقبلات الخلايا العصبية في ذبابة الفاكهة الهوائي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-05-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 21 s
Description: استكشف تقنية التصبيغ المناعي الكامل للهوائيات في ذبابة الفاكهة Drosophila لتصوير الخلايا العصبية الشمية المتنوعة. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم آليات تنوع المستقبلات الشمية في علم الأعصاب.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذه الدراسة من قبل وزارة التربية المدعومة من برنامج لمؤسسة البحوث الاستراتيجية في الجامعات الخاصة ومنحة JSPS الشباب عالم B لحزب التحرير ونود أن نشكر Ohtake Norihito لتحرير مقاطع الفيديو.

1. إعداد لوحة التفاح <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيج 12.5 ز آغار، 125 مل 100٪ عصير التفاح المتاحة تجاريا، 12.5 غرام جلوكوز، و 375 مل H 2 O. الميكروويف الخليط لمدة 1-2 دقائق وتصب في صحن الثقافة 3 سم الخلية. تخزين عند 4 درجات مئوية. </li></ol> 2. عبر الوراثية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الصليب الوراثية ممثل التالية: </li></ol> Or49a-mCD8 :: GFP / CYO خ ث 1118 3. تشريح وتلطيخ بروتوكول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الذبابة ثم قطع رأسه يطير عموديا من خلال عقد ذلك باستخدام ملقط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع بعناية الهوائيات التي تحتوي على جزء على صفيحة التفاح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع الجزء الثالث من الهوائي باستخدام مقص تشريح غرامة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع 90 ميكرولتر من الحل التثبيت (4٪ بارافورمالدهيد 0.1٪ في PBST (PBS مع 0.1٪ تريتون X-100)) إلى وسط الطبق الثقافة أسفل الزجاج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلطف نقل antenn تشريحAE بإبرة حادة مباشرة إلى الحل التثبيت. إذا لزم الأمر، يغرق جسديا هوائيات في الحل باستخدام إبرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان لمدة 40 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (RT). غسل هوائيات 0.4٪ في PBST (PBS مع 0.4٪ تريتون X-100)، في كل 3X 10 دقيقة، وابقائها في نفس الطبق. استخدام نصائح الأصفر إلى إزالة وإضافة حل PBST. استخدام 90 ميكرولتر من محلول الغسيل في كل مرة. ملاحظة: لا تضع الطبق إلى شاكر خلال المناعية. قبل إزالة أو إضافة الحل في طبق، وجعل جميع الهوائيات في وسط الطبق باستخدام الإبرة وإضافة أو إزالة بعناية الحل من على حافة الطبق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منع هوائيات مع 90 ميكرولتر من 5٪ مصل الحصان العادي في 0.1٪ PBST لمدة 20 دقيقة في RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد إزالة عرقلة الحل، واحتضان هوائيات مع 90μl من الأجسام المضادة الأولية 0.1٪ في PBST تحتوي على 5٪ مصل الحصان لمدة 48 ساعة في 4 درجات مئوية في وعاء مبلل كما هو موضح سابقا <sتصل&gt; 8. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل هوائيات 6X 0.4٪ في PBST 10 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان هوائيات مع 90 ميكرولتر من الأجسام المضادة الثانوية في PBST 0.1٪ تحتوي على 5٪ مصل الحصان لمدة 48 ساعة في 4 درجات مئوية. غسل 6X 10 دقيقة باستخدام 0.4٪ PBST. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتركيب هوائيات، وإزالة PBST من الطبق ثقافة قدر الإمكان وإدخال تدريجيا اثنين من تركيزات مختلفة من الجلسرين للهوائيات. أولا إضافة 40٪ الجلسرين إلى الطبق ل1-2 دقائق؛ ثم إزالة هذا وإضافة 80٪ الجلسرين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخراج بعناية هوائيات (بما في ذلك 80٪ الجلسرين) من الطبق الثقافة باستخدام غيض الأصفر ووضعها على شريحة. وضع بلطف ساترة على رأس وختم حواف ساترة مع طلاء الأظافر. هوائيات هي الآن جاهزة للتصوير بواسطة المجهر مضان. </li></ol>

<ol><li>Christensen, T. A., White, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChristensen%2C+TA+%22Representation+of+olfactory+information+in+the+brain+In+The+Neurobiology+of+Taste+and+Smell%22">Representation of olfactory information in the brain In The Neurobiology of Taste and Smell</a>. , New York. 201-232 (2000).</li>
<li>Ache, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+common+strategy+for+transducing+olfactory+information%5BTitle%5D)+AND+%22Sem.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Towards a common strategy for transducing olfactory information.</a> Sem. Cell Biol. 5, 55-63 (1994).</li>
<li>Bargmann, C. I., Hartwieg, E., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant-selective+genes+and+neurons+mediate+olfaction%5BTitle%5D)+AND+%22C.+elegans.+Cell%22%5BJournal%5D)">Odorant-selective genes and neurons mediate olfaction.</a> C. elegans. Cell. 13, 515-527 (1993).</li>
<li>Barth, A. L., Justice, N. J., Ngai, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asynchronous+onset+of+odorant+receptor+expression+in+the+developing+zebrafish+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Asynchronous onset of odorant receptor expression in the developing zebrafish olfactory system.</a> Neuron. 16, 23-34 (1996).</li>
<li>Firestein, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+the+olfactory+system+makes+sense+of+scents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">How the olfactory system makes sense of scents.</a> Nature. 413, 211-218 (2001).</li>
<li>Stockinger, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+circuitry+that+governs+Drosophila+male+courtship+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Neural circuitry that governs Drosophila male courtship behavior.</a> Cell. 121, 795-807 (2005).</li>
<li>Endo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+modification+of+Notch+targets+in+olfactory+receptor+neuron+diversification%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Chromatin modification of Notch targets in olfactory receptor neuron diversification.</a> Nat Neurosci. 15, 224-233 (2011).</li>
<li>Karim, M. R., Moore, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+analysis+of+Drosophila+larval+peripheral+sensory+neuron+dendrites+and+axons+using+genetic+mosaics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Morphological analysis of Drosophila larval peripheral sensory neuron dendrites and axons using genetic mosaics.</a> J Vis Exp. , (2011).</li>
<li>Suh, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+population+of+olfactory+sensory+neurons+mediates+an+innate+avoidance+behaviour+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila.</a> Nature. 431, 854-859 (2004).</li>
<li>Sachse, S., Galizia, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+inhibition+for+temporal+and+spatial+odor+representation+in+olfactory+output+neurons%3A+A+calcium+imaging+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Role of inhibition for temporal and spatial odor representation in olfactory output neurons: A calcium imaging study.</a> J Neurophysiol. 87, 1106-1117 (2002).</li>
<li>Hallem, E. A., Ho, M. G., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+odor+coding+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of odor coding in the Drosophila antenna.</a> Cell. 117, 965-979 (2004).</li>
<li>Vosshall, L. B., Wong, A. M., Axel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+olfactory+sensory+map+in+the+fly+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">An olfactory sensory map in the fly brain.</a> Cell. 102, 147-159 (2000).</li>
<li>Couto, A., Alenius, M., Dickson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular%2C+anatomical+and+functional+organization+of+the+Drosophila+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Molecular, anatomical and functional organization of the Drosophila olfactory system.</a> Curr Biol. 15, 1535-1547 (2005).</li>
<li>Clyne, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant+response+of+individual+sensilla+on+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Invert+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Odorant response of individual sensilla on the Drosophila antenna.</a> Invert Neurosci. 3, 127-135 (1997).</li>
<li>Vosshall, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+spatial+map+of+olfactory+receptor+expression+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A spatial map of olfactory receptor expression in the Drosophila antenna.</a> Cell. 96, 725-736 (1999).</li>
<li>Wang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+calcium+imaging+reveals+an+odor-evoked+map+of+activity+in+the+fly+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Two-photon calcium imaging reveals an odor-evoked map of activity in the fly brain.</a> Cell. 112, 271-282 (2003).</li>
</ol>

والكتاب ليس لديهم ما يكشف.

تشريح الهوائي ذبابة الفاكهة وصفنا بسيطة وسهلة لأداء في بيئة المختبر. لضمان تشريح ناجحة، لا بد من استخدام مقص ذو حدين غرامة. بينما المناعية الهوائي تشريح، فمن المهم لاحتضان لهم في حاوية مملوءة رطوبة لتجنب التبخر من الحل الضد. الهوائي تشريح لديه ميل لتطفو في الحل. وسوف تستخدم 0.1٪ تريتون في برنامج تلفزيوني أثناء التثبيت وعرقلة خطوات تسهيل غمر الهوائي في الحل وضمان أفضل تلطيخ. يمكن استخدام &quot;طبق ثقافة أسفل الزجاج&quot; الحد من الخسائر في الهوائيات خلال المناعية وضمان كمي...

ويستخدم نظام حاسة الشم للتمييز بين مجموعة متنوعة وهائلة من جزيئات الرائحة، وبعد ذلك لإرسال المعلومات الناتجة إلى مراكز المخ العليا. يستخدم هذا المدخل إلى التحكم بدقة السلوكيات الحيوانية الأساسية، مثل التغذية والتزاوج 1-6. كما يرتبط كل نوع الخلايا العصبية الشمية مع مجموعة محددة من الروائح، وتنويع الخلايا العصبية مستقبلات الشم (ORN) و هو ضروري لالسليم وظيفة الجهاز الشمي 7. علم الوراثة ذبابة الفاكهة تمكننا من إجراء تحقيق واحد على مستوى الخلية التي تنطوي على الآليات الجزيئية المرتبطة بالتنمية ORN وظيفة فسيولوجية 8-16. وقد مكنتنا كله المناعية جبل ذبابة الفاكهة هوائيات لفهم بمزيد من التفصيل الآليات الجزيئية المشاركة في تنويع الخلايا العصبية مستقبلات الشمية (ORN) ق 7. هنا نقدم وصفا شاملا لطريقة بسيطة لميلانhieve هذا.

<table><tbody><tr><td>Stemi DV4 تشريح المجهر</td><td>Zeiss</td><td>Stemi DV4</td><td></td></tr><tr><td>أطباق ثقافة القاع الزجاجي&nbsp;</td><td>شركة MatTek</td><td>P35G-0-10-C</td><td></td></tr><tr><td>مقص التشريح</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>الفئران المضادة</td> ل <td>ELAV الدراسات التنموية بنك الورم الهجين</td><td>7E8A10</td><td>التخفيف 1: 200</td></tr><tr><td>الفأر المضاد ل GFP</td><td>Invitrogen</td><td>A11122</td><td>التخفيف 1:400</td></tr><tr><td>الحمار المضاد للأرانب IgG</td><td>Jackson مختبرات البحوث المناعية</td><td>711-225-152</td><td>التخفيف 1:200</td></tr><tr><td>مختبرات الحمار المضادة للفئران IgG</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>712-165-150</td><td>التخفيف 1:200</td></tr></tbody></table>

كله من جبل immunolabeling الشم مستقبلات الخلايا العصبية في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الهوائي

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

جزيئات الرائحة ربط المستقبلات هدفهم بطريقة دقيقة ومنسقة. كل مستقبلات تعترف إشارة محددة والتبديلات هذه المعلومات إلى الدماغ. على هذا النحو، وتحديد كيفية نقل المعلومات الشمية إلى الدماغ، وتعديل كل من الإدراك والسلوك، والتحقيق الوقائع الموضوعية. ومن المثير للاهتمام، وهناك أدلة الناشئة التي تشارك تنبيغ الخلوية والنسخي العوامل في تنويع حاسة الشم مستقبلات الخلايا العصبية. هنا نقدم ككل قوية الأسلوب جبل الوسم المناعية لفحص حاسة الشم في الجسم الحي منظمة مستقبلات الخلايا العصبية. باستخدام هذا الأسلوب، حددنا جميع الخلايا العصبية مستقبلات حاسة الشم مع الأجسام المضادة لمكافحة ELAV، علامة عموم العصبية المعروفة وOr49a-mCD8 :: GFP، والخلايا العصبية مستقبلات الشمية أعرب تحديدا في الدوري الاميركي للمحترفين الخلايا العصبية باستخدام الأجسام المضادة لمكافحة GFP.

ضمان أن كلا من تشريح والتثبيت يتم تنفيذها بسرعة هي عامل رئيسي في تحقيق النجاح مع هذا البروتوكول. باستخدام مقص غرامة ملقط وحاسم أيضا. بعد المناعية، تم فحص الفلورسنت المسمى هوائيات تحت المجهر متحد البؤر. نحن عادة ما تأخذ أقسام 1μm باستخدام عدسة 20x و. نحن وصفت الدوري الاميركي للمحترفين 7 ORNs باستخدام Or49a-mCD8 :: GFP وعدها عدد من الدوري الاميركي للمحترفين ORNs في البرية من نوع الهوائي. المترجمة غشاء الخلية مراسل mCD8-GFP وهكذا ينظر إلى التعبير في الشكل 2 المعروضات غشاء ...

هنا نصف عملية التلوين المناعي الكامل لهوائيات ذبابة الفاكهة ، والتي تمكننا من فهم الآليات الجزيئية المشاركة في تنويع الخلايا العصبية المستقبلة الشمية (ORN) بشكل أفضل.

كله من جبل Immunolabeling الشم مستقبلات الخلايا العصبية في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الهوائي

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

الهدف العام من التجربة التالية هو تصوير العصبونات المستقبلة للشم باستخدام صبغ قرون الاستشعار بكامل تركيبها. أولاً، يتم تخدير الذبابة لقطع رأسها عمودياً. بعد ذلك، يوضع رأس الذبابة المُشرح على شريحة تفاحة.ثم اقطع الجزء الثالث من قرن الاستشعار وضعه في طبق زراعة ذو قاعدة زجاجية لإجراء الكيمياء النسيجية المناعية. بعد تثبيت قرون الاستشعار على شريحة زجاجية، يمكننا تصور الأنواع المختلفة من العصبونات المستقبلة للشم من خلال المجهر البؤري. نحن نعمل على الجهاز الشمي.يُستخدم الجهاز الشمي للتمييز بين مجموعة متنوعة من الجزيئات الأخرى. وتسمح النطاقات الواسعة من العصبونات الشمية المتميزة الموجودة ضمن هذا الجهاز بالنقل الدقيق والمنسق للمعلومات من المستقبلات المستهدفة إلى العصبونات داخل الدماغ. سنقوم اليوم بشرح طريقة صبغ قرون الاستشعار كاملة للكشف عن تنوع هذه العصبونات المستقبلة للشم.لضمان نجاح صبغ العينة الكاملة وقرون الاستشعار، من الضروري تحضير دفعة جديدة من المثبت مباشرة قبل البدء في البروتوكول. يتم تخدير الذبابة، ثم يتم قطع رأس الذبابة عمودياً عن طريق تثبيت جسمها بملقط. بعد ذلك، توضع قرون الاستشعار المفصولة بعناية على طبق تفاح.اقطع القطعة الثالثة من قرن الاستشعار باستخدام مقص تشريح دقيق. ضع 90 Microliters من محلول التثبيت في مركز الطبق. وباستخدام إبرة حادة، انقل قرن الاستشعار الذي تم تشريحه برفق مباشرة إلى محلول التثبيت.اترك عملية التثبيت الآن لتستمر دون مقاطعة لمدة 40 دقيقة في درجة حرارة الغرفة لإنهاء التثبيت. اغسل قرني الاستشعار ثلاث مرات باستخدام PBST لمدة 10 دقائق لكل غسلة أثناء إزالة محلول الغسيل. أولاً، اجمع كل قرني الاستشعار في مركز الطبق باستخدام إبرة.بعد ذلك، قم بإزالة المحلول من جانب الطبق. ولا داعي للرج أثناء التحضين. وللتحضير لعملية الصبغ، قم بإزالة غسلة PBST الأخيرة وحجب قرون الاستشعار المثبتة عن طريق ملء الحجرة بـ 90 µL من مصل الحصان بتركيز 5% في PBST بتركيز 0.1%، ثم استبدل محلول الحجب بالأجسام المضادة الأولية المخففة في خليط من مصل الحصان بتركيز 5%.في محلول PBST، تُستخدم الأجسام المضادة الأولية وهي mouse anti GFP بتخفيف 1 إلى 400، وrat anti eof بتخفيف 1 إلى 200، وذلك لمنع جفاف عينات قرون الاستشعار. ضع منديلاً مبللاً في غطاء طبق الزرع ولفه بـ paraform، ثم ضع طبق الزرع في حاوية بلاستيكية تحتوي على مناديل مبللة.قم بتحضين قرون الاستشعار في الأجسام المضادة الأولية لمدة 48 ساعة عند درجة حرارة أربع درجات مئوية. ثم قم بإزالة الأجسام المضادة الأولية غير المرتبطة عن طريق الغسل ست مرات في محلول PBST لمدة 10 دقائق لكل غسلة، وذلك بشكل مماثل لإجراء إزالة المثبت الموصوف سابقاً.بعد غسل العينات بمحلول PBST لمدة ساعة، يُضاف محلول الأجسام المضادة الثانوية المخفف في خليط من مصل الخيول بتركيز 5% في PBST؛ في هذا المثال، الأجسام المضادة هي anti rabbit IgG و anti rat IgG. قم بتغطية الوعاء بورق الألومنيوم من هذه النقطة فصاعدًا لمنع التبييض الضوئي (photobleaching)، ثم يتم تحضين الهوائيات في الجسم المضاد الثانوي لمدة 48 ساعة عند درجة حرارة 4 °C.في هذه المرحلة، أصبح الهوائي جاهزاً للتثبيت. قم بإزالة أكبر قدر ممكن من محلول PBST من طبق الزرع، وابدأ تدريجياً في إضافة الجلسرول إلى الهوائيات. بعد ذلك، أضف جلسرول بتركيز 40% إلى الطبق لمدة دقيقة إلى دقيقتين، ثم قم بإزالته وأضف جلسرول بتركيز 80% واتركه لمدة خمس دقائق.كشف التلوين الفلوري عن العصبونات الإيجابية لـ Elof والعصبونات الشمية المستهدفة. ومن خلال دمج هذا الإجراء مع طرق مماثلة أخرى، بما في ذلك توليد الفسيفساء الجينية للعصبونات الشمية، نأمل في بدء التحكم الميكانيكي في تمايز العصبونات الشمية والإجابة على أسئلة علمية مهمة أخرى.

whole-mount-immunolabeling-olfactory-receptor-neurons-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

وصفنا تقنية أنشئت لقياس وتحليل رائحة استجابات الكالسيوم في الفص antennal...

التصوير الكالسيوم من الردود، رائحة أثار في ذبابة الفاكهة لوب Antennal

لفهم كيفية تحقيق الأشكال الخلية المعقدة ، مثل التشعبات العصبية ، خلال التنمية ، فمن المهم أن تكون قادرة على فحص دقيق أنيبيب المنظمة. نحن هنا وصف طريقة قوية لفحص العلامات immunohistological منظمة أنيبيب من التشعبات شجيري الخلايا العصبية الحسية تشجر والقصبة الهوائية ، والعضلات ،...

Immunohistological بطاقات المواد ميكروتثبول في الخلايا العصبية الحسية الانشعابيات ، القصبات الهوائية ، وعضلات في ذبابة الفاكهة الجدار اليرقة الهيئة

نقدم تقنية الخلايا العصبية لوصفها واحد في الجهاز العصبي المركزي (CNS)...

وضع العلامات واحدة من الخلايا في الجهاز العصبي المركزي<em&gt; ذبابة الفاكهة الدروسوفيلا</em

تحتوي فئة  أهداب الخلايا العصبية الحسية الشمية على بروتينات من سلسلة نقل الإشارة ، ولكن من الصعب إجراء تحليل مكاني مفصل لتوزيعها في عمليات التشريح بالتبريد. نصف هنا نهجا محسنا لوضع العلامات على الحامل بالكامل والتصور الوجهي للبروتينات الهدبية.

كله جبل وصفها من سيليا في النظام الشمية الرئيسية من الفئران

الهدف العام من هذا البروتوكول هو للتدليل على كيفية تقديم الروائح من تقلبات منخفضة لتسجيل واحد سينسيلوم من ذبابة الفاكهة الخلايا العصبية مستقبلات الشمية التي تستجيب لفيرومونات القشرية طويلة السلسلة.

تسجيل الكهربية من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; تريتشويد سنسيلا في الاستجابة ل أودورانتس من التقلب المنخفض

عرض مورفولوجيس مختلف الخلايا وإنشاء مجموعة متنوعة من التفاعلات مع جيرانهم. هذا البروتوكول يصف كيف تكشف مورفولوجية الخلايا المفردة والتحقيق التفاعل خلية-خلية باستخدام نظام التعبير Gal4/UAS الراسخة.

تطبيق متعدد الألوان فلبوت تقنية لدراسة عالية الدقة مورفولوجيس وحيد الخلية والتفاعلات بين الخلايا لإطلاق في المورفولوجية

نقدم هنا، بروتوكولا للمرحلة وتشريح وضع الأنسجة حاسة الشم من الأنواع المورفولوجية . تشريح الأنسجة يمكن استخدامها في وقت لاحق للتحليلات الجزيئية، مثل كمية RT-PCR (عكس النسخ-البلمرة المتسلسل) أو الحمض النووي الريبي التسلسل (رناسيق)، فضلا عن التحليلات في فيفو مثل إيمونوهيستوتشيميستري أو في الموقع التهجين.

إعداد وضع الأنسجة حاسة الشم الطرفية الجزيئية والتحليل المناعي في المورفولوجية

يصف هذا البروتوكول إجراء التشريح وحالة الزرع والتصوير الحي لنظام إكسبلانت الهوائيات والدماغ لدراسة تجميع الدائرة الحامية الشمية.

نظام Explant لدراسات التصوير بالفاصل الزمني لتجميع الدوائر الشمية في ذبابة الفاكهة

نصف هنا طرقا لتحفيز وتحليل إعادة تشكيل الخبرة الشمية المعتمدة على الكبيبات المشبكية لفص الهوائي في دماغ ذبابة الفاكهة اليافعة.

إعادة تشكيل تعتمد على الخبرة للاتصال العصبي الحسي الشمي للدماغ اليافع في فترة حرجة مبكرة من الحياة

التمدد التكراري التهجين في الموقع (EASI-FISH) هو تقنية قوية تجمع بين الفحص المجهري التوسعي والتهجين الموضعي الفلوري (FISH) للكشف عن التعبير عن جينات متعددة في الأنسجة السميكة. يحدد هذا البروتوكول التطورات الحديثة في الطريقة وتكييفها لتسمية ذبابة الفاكهة الجهاز العصبي المركزي السليم.

الكشف عن تعدد الإرسال للتعبير الجيني في دماغ ذبابة الفاكهة السليم باستخدام التألق التكراري بمساعدة التمدد في التهجين الموضعي

تصف هذه المقالة بروتوكول تقطيع القرص التخيلي الفعال وتلوين الأجسام المضادة الاقتصادي، وهو اقتصادي مع المواد التفاعلية ويسهل التعامل مع الأقراص التخيلية بأعداد قليلة.

تشريح صغير النطاق وتلوين الأجسام المضادة للأقراص التخيلية للعين والجناح من ذبابة الفاكهة الميلانوغاستر

استكشف تقنية التصبيغ المناعي الكامل للهوائيات في ذبابة الفاكهة Drosophila لتصوير الخلايا العصبية الشمية المتنوعة. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم آليات تنوع المستقبلات الشمية في علم الأعصاب.

كله من جبل Immunolabeling الشم مستقبلات الخلايا العصبية في

استكشف المزيد من الفيديوهات