العلاج القائم على خلية لقصور القلب في الجرذ: انقر نقرا بضع الصدر لاحتشاء عضلة القلب والنخابية زرع الخلايا وبايوماتريكس

الهدف من هذا الإجراء هو إجراء بضع الصدر المزدوج على الفئران من أجل إجراء ربط الشريان التاجي وتطبيق النخابي. يتم تحقيق ذلك عن طريق إجراء بضع الصدر أولا في الفضاء الوربي الرابع. بعد ذلك ، يتم ربط الشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط أو LAD.

ثم يتم إجراء بضع الصدر الثاني بعد أسبوعين في الفضاء الوربي الخامس. أخيرا ، يتم تطبيق الخلايا والمصفوفة على سطح القلب النابض المحتضن. في النهاية ، يتم إجراء تخطيط صدى القلب لتقييم وظائف القلب ويتم إجراء الأنسجة عن طريق قياسات حجم الاحتشاء.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل بضع القص هي أنها نهج طفيف التوغل يوضح أن الإجراء سيكون وأرسل لوبيز متعاونين من مختبرنا. تم التعامل مع جميع وفقا لتوصيات F-E-L-A-S-A والقانون السويسري بشأن حماية. بعد إخراج فأر وعزل عظام عظم الفخذ وتنظيفها وفقا لبروتوكول النص ، استخدم المقص لقطع طرفي العظام.

ثم لشطف نخاع العظام ، قم بحقن PBS معقم في قلب العظم ، واجمع النخاع في أنبوب سعة 15 ملليلترا. جهاز الطرد المركزي لنخاع العظم الذي تم جمعه لمدة سبع دقائق عند 300 مرة G.قم بإزالة supinate بثلاثة ملليلتر من محلول تحلل خلايا الدم الحمراء. قم بتعليق الحبيبات ، واحتضان التعليق لمدة دقيقة واحدة في درجة حرارة الغرفة قبل الدوران مرة أخرى لمدة سبع دقائق عند 300 مرة جم بعد إعادة التصوير.

تعليق الحبيبات في وسط استزراع معقم. أضف وسيطا إضافيا لزراعة الخلايا في قارورة مزرعة سعة 150 مليلتر وقم بزرع الخلايا في اليوم الثاني من الحضانة. قم بتغيير الوسيط لإزالة الخلايا غير اللاصقة واستمر في استبدال الوسط كل يومين لمدة أسبوعين إلى ثلاثة أسابيع حتى يتم تحقيق كثافة الخلية المطلوبة.

لإجراء أول عملية لبضع الصدر T ، ابدأ بوزن الجرذ وقم بإعداد معلمات جهاز التنفس الصناعي وفقا لذلك. يتم تحديد تدفق التهوية تلقائيا. ثم احلق الجزء الأيسر من الصدر ، وقم بتشغيل وسادة التدفئة واضبطها على 37 درجة مئوية.

بعد تخدير الجرذ وفقا لبروتوكول النص ، قم بإجراء قرصة إصبع القدم أو الذيل قبل وضع الجرذ على وسادة التسخين في وضع ضعيف باستخدام قسطرة IV عيار 14 ، وقم بتنبيب ، ثم قم بتوصيل قسطرة التنبيب بجهاز التنفس الصناعي للقوارض. مبرمج ل 2.5 لتر في الدقيقة من الأكسجين ، و 2.5٪ من الفلور ، وحجم المد والجزر من ملليلتر ، وتردد التنفس 90 نفسا في الدقيقة. بعد تحضير حقنة مع البوبرينورفين 0.1 ملليغرام لكل كيلوغرام تحت الجلد ، قم بحقن ثلث المحلول ، ثم استخدم محلول البيتادين 1٪ لتطهير المنطقة.

بعد ذلك ، قم بشق الجلد بشكل عمودي على عظم القص في الفضاء الوربي الرابع وافصل الطبقات الثلاث من العضلة الصدرية ثم افتح المساحة الوربية الرابعة بين الأضلاع أربعة وخمسة. استخدم ضام صغير لنشر الضلوع وفضح القلب.

ثم افتح التامور بعناية وحدد موقع الشريان التاجي الأمامي الأيسر أو LAD ، واستخدم خياطة 7.0 لربطه بأربعة ملليمترات أسفل الأذين. ثم تحكم في تغير لون المنطقة الإقفارية بثلاث خيوط صفرية موضوعة تقريبا وبعيدا عن القص. اصنع غرزتين لاستخدامهما لإغلاق المساحة الوربية.

شد الخيط البعيد. قم بتثبيت أنبوب عادم جهاز التنفس الصناعي لمدة ثانيتين لتضخيم الصدر وتجنب استرواح الصدر. ثم شد الخيط الثاني.

ضع طبقات العضلات مرة أخرى في مكانها. ثم استخدم خمسة خياطة صفرية لإغلاق الجلد بمحلول 1٪ بيتادين. تطهير الخيط وحقن محلول البوبرينورفين المتبقي.

قم بإيقاف تشغيل نظام التخدير وإزالة قسطرة التنبيب. احتفظ بالجرذ في قفص تحت مصباح دافئ لمدة ساعة إلى ساعتين قبل إعادته إلى وحدة IVC. بعد أسبوعين من بضع الصدر الأول ، اكتمل الشفاء وبالكاد تكون الندبة مرئية.

باتباع الإجراء الموضح سابقا في هذا الفيديو لإعداد الجرذ للجراحة ، قم بشق الجلد بشكل عمودي على القص في الفراغ الوربي الخامس. افصل الطبقات الثلاث من العضلات وافتح الفراغ الوربي الخامس بين الأضلاع الخامسة والسادسة. استخدم ضام صغير لنشر الضلوع وفضح القلب.

إذا كان هناك بعض الالتصاق ، فاستخدم ملقطا دقيقا لتخفيفه بعناية. بعد ذلك ، حدد موقع منطقة الاحتشاء التي تظهر كمنطقة شاحبة أسفل الرباط. إذا لزم الأمر ، أدخل قطعة بطول 10 سنتيمترات من سبعة خياطة صفرية في القمة واسحبها برفق لتصور البطين الأيسر بشكل أفضل.

ثم لتطبيق الخلايا والمصفوفة على سطح المنطقة الإقفارية في القلب. بعد التكوير ، أربع مرات في 10 إلى الخلايا الست كما هو موضح في بروتوكول النص ، قم بإيداع اللوحة على القلب قبل استخدام مادة مانعة للتسرب من الفيبرين لتغطيتها. طبقة الغراء تثبت الخلايا على سطح القلب.

بعد إزالة قطعة الخيط من موضع القمة ، تقوم طبقات العضلات مرة أخرى في مكانها بخياطة وتطهيره. كما هو موضح سابقا في الفيديو كما هو موضح هنا. بعد التدخل الجراحي ، فقدت وزنها وتعافت بسرعة قبل أن تكتسب الوزن بشكل مستقل عن العلاج المطبق كما هو موضح في هذا الرسم البياني كابلان ، يكون معدل البقاء على قيد الحياة مرتفعا بعد بضع الصدر التائي الأول ، أظهرت المعالجة بالفيبرين و / أو الخلايا معدلات بقاء أقل من المجموعات الأخرى كما هو موضح في هذا الرسم البياني.

ومع ذلك ، ظلت معدلات البقاء على قيد الحياة الإجمالية مرتفعة بعد ثانية. تم تقييم بضع الصدر وعلاج وظائف القلب عن طريق تخطيط صدى القلب. توضح صور الوضع M التمثيلية للحيوانات السليمة والمحتشية أن انقباض جدار LV قد تم إلغاؤه لمدة أسبوعين بعد تسجيل التقصير الجزئي بعد LAD بعد أسبوعين من إمطار LAD على ما مجموعه 104.

يظهر توزيع التردد طرقا قابلة للتكرار بشكل معقول مع معامل تباين 17٪ يصور هذا الشكل التمثيل الرسومي لوظيفة القلب من خلال الكسر القذفي المقاس بعد أسبوعين وستة أسابيع من LAD تستمر وظيفة القلب في الانخفاض خلال هذه الفترة الزمنية. تحدث إعادة تشكيل القلب أيضا خلال هذه الفترة ويتم تمثيلها هنا من خلال زيادة في أحجام الجهد المنخفض المسجلة في كل من الشقيقة والانبساط. أخيرا ، كشف التلوين الذهبي على أقسام القلب أن الأنسجة الليفية وفي النهاية ندبة عبر الجدارية تم تطويرها بعد ستة أسابيع من ربط LAD بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء هذه التقنية في 30 إلى 40 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء بضع الصدر المزدوج طفيف التوغل.