تقييم وظيفة الأوعية الدموية في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن

الهدف العام من التجربة التالية هو تقييم وظيفة الأوعية الدموية في المرضى الذين يعانون من أمراض الكلى المزمنة ، يتم تحقيق ذلك عن طريق جمع الخلايا البطانية الوعائية أولا من المرضى. ثم يتم تقييم سرعة موجة النبض الأبهري لقياس تصلب الشريان المرن الكبير. بعد ذلك يتم قياس التمدد بوساطة تدفق الشريان العضدي من أجل تقييم وظيفة بطانة الأوعية الدموية.

في النهاية ، يمكن الحصول على النتائج التي تميز وظيفة بطانة الأوعية الدموية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الأوعية الدموية ، مثل ما يحدث على المستوى الخلوي للتعبير عن البروتينات المختلفة. بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لأن الممارسة والتدريب المكثف مطلوبان لإتقان التصوير بالموجات فوق الصوتية.

سيوضح الإجراء لوني بيرينو ، مساعد باحث من مختبري. للبدء ، قم بإعداد الموقع بمطهر موضعي. بعد ذلك ، ضع الستائر المعقمة فوق الموقع.

يجب على الممرضة أو الطبيب المدرب وضع الوريد وإرفاق محول قفل سبدائي. ضع سلكين J على الستائر لفك شكل J. اسحب قوس J على كلا السلكين.

بمجرد فك اللف ، قم بفك غطاء قفل hep وقم بتغذية JWI في الوريد حوالي ثمانية سنتيمترات. ادفع السلك ذهابا وإيابا عدة مرات قبل إزالته لتجنب تراكم الكثير من الدم على السلك. بعد ذلك ، استخدم قواطع الأسلاك لقص الأسلاك بحيث تتناسب مع أنبوب مخروطي سعة 50 مليلتر يحتوي على حوالي 30 مل من المخزن المؤقت للتفكك.

كرر هذه الخطوات للسلك الثاني عند اكتمال جمع العينات. العودة إلى المختبر الرطب. اربط الأسلاك بزوج من الملقط واحتفظ بها داخل الأنبوب ولكن فوق المحلول لمدة 10 دقائق.

استخدم ماصة آلية لشطف الأسلاك بمخزن مؤقت للتفكك من الأنبوب. حرر المخزن المؤقت بحيث يمتد على طول الأسلاك وتخلص من السوائل الزائدة في الأنبوب. قم بإزالة الأسلاك وطرد العينة إلى بيليه.

استرجع العينات وأعد تعليق الحبيبات في PBS قبل الطرد المركزي. لمدة خمس دقائق إضافية بعد ذلك ، استخدم طرف ماصة في نهاية خرطوم الشفط لترك حوالي ملليلترين في الأنبوب. نظف الباقي بالمكنسة الكهربائية دون إزعاج الحبيبات.

أعد تعليق الحبيبات والماصة للعينة بالتساوي في المناطق البيضاوية لثماني شرائح تم تسميتها مسبقا. ضع الشرائح في الحاضنة على حرارة 37 درجة مئوية لمدة خمس ساعات قبل تخزينها عند 80 درجة مئوية تحت الصفر حتى تصبح جاهزة لبدء التحليل. يجب أن يتغير الموضوع إلى شورت يمكن التخلص منه ويستلقي في غرفة هادئة وخافتة يتم التحكم فيها بالمناخ.

عندما تكون جاهزا للبدء ، ضع الأقطاب الكهربائية للموجات فوق الصوتية وجهاز تصلب الشرايين. بعد ذلك ، ضع صفعة ضغط الدم على الموضوع. ابدأ قراءات ضغط الدم بعد 20 دقيقة ، وكرر القراءات حتى تصبح القياسات في حدود خمسة ملليمترات من الزئبق.

الراحة لمدة دقيقتين بين كل قراءة وأداء ثلاث دقائق على الأقل. بعد ذلك ، قم بملامسة نبض الشريان العضدي وضع مقياس الموجات فوق الصوتية لتسجيل أشكال الموجات العضدية. كرر للشرايين الكعبرية والفخذية والسباتية.

قم بقياس المسافة إلى كل موقع من هذه المواقع من الشق القصي الفائق باستخدام شريط قياس للشرايين العضدية والشعاعية والسباتية والمسطرة المخصصة للفخذ. بعد ذلك ، احسب سرعة موجة النبض السباتي العضدي السباتي والفخذي السباتي باستخدام برنامج متخصص. ضع سوار ضغط الدم في الساعد بعيدا عن عملية الدعم.

اضبط برنامج الأوعية الدموية على وضع التشغيل وسجل ما لا يقل عن 10 دورات قلبية للشريان العضدي الأساسي وصور الموجات فوق الصوتية وقياسات سرعة تدفق الدم. يمكن استخدام ذراع ميكانيكي لتثبيت مسبار الموجات فوق الصوتية إذا رغبت في ذلك. بعد ذلك ، قم بتضخيم سوار ضغط الدم في الساعد إلى 250 ملم من الزئبق.

وابدأ مؤقتا. اطلب من المشارك البقاء ساكنا جدا. ابدأ في تسجيل السرعات عندما يقرأ المؤقت مشغل أربع دقائق و 45 ثانية.

حرر الكفة في خمس دقائق وقم بتغيير الموجات فوق الصوتية لتسجيل صور الوضع B. عندما تقرأ الساعة خمس دقائق و 10 ثوان. استمر في التسجيل حتى تقرأ الساعة سبع دقائق.

بعد ذلك ، قم بقياس ضغط دم الشخص. إذا كان ضغط الدم الانقباضي أكبر من أو يساوي 100 ملليمتر من الزئبق، ضع 0.4 ملليغرام من النتروجليسرين تحت اللسان تحت لسان الشخص وابدأ المؤقت. ابدأ تسجيل الوضع B عندما تقرأ الساعة ثلاث دقائق وتوقف عن التسجيل.

عندما تقرأ الساعة ثماني دقائق. لتحليل الخلايا البطانية الملطخة ، يجب على مجرب واحد أعمى مسح الشرائح بشكل منهجي ، ويتم تحديد الخلايا البطانية عن طريق التلوين الإيجابي للكاديرين VE ويتم تأكيد السلامة النووية من خلال التلوين الإيجابي ل dapi. بالإضافة إلى ذلك ، يجب تلطيخ الخلايا للبروتين المهم.

يجب تصوير ما مجموعه 30 خلية لكل شريحة لتحليلها لاحقا. كرر هذه العملية لكل شريحة في الدفعة الملطخة، بما في ذلك شريحة التحكم في التطرف العنيف. يتم استخدام البرامج النوعية لتحليل شدة التلوين للجسم المضاد الأساسي محل الاهتمام.

توضح هذه الصورة قطر الشريان العضدي الأساسي الذي تم الحصول عليه أثناء تقييم مريض مصاب بمرض الكلى المزمن بعد تحرير الكفة لمدة دقيقتين. يظهر هذا التسجيل تغيرا في قطر موجة R. تم الحصول على هذه الأشكال الموجية في كل من الشرايين السباتية والفخذية.

تم استخدام الفرق في الوقت والمسافة لحساب تقرير سرعة موجة نبض الأبهر. هنا ، تم تحليل خلايا التحكم والمريض للتأكد من سلامتها النووية باستخدام تعبير الخلايا البطانية DPI مع كاديرين VE وللإنزيم المؤكسد N-A-D-P-H أوكسيديز. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر الحصول على صور الموجات فوق الصوتية والأشكال الموجية وصور الخلايا البطانية عالية الجودة لتقييم دقيق وكمي.

لا تنس أن العمل مع العينات البشرية يمكن أن يكون خطيرا للغاية ، ويجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة أثناء تنفيذ هذا الإجراء.