زرع صمام الرئوي عن طريق نموذج الفأر من غيري مكاني القلب زرع

الهدف العام من هذا الإجراء هو التحقيق في الآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء تكوين الأنسجة الجديدة ، وسماكة الصمام ، وتطور التضيق داخل صمام القلب المصمم للأنسجة الهندسية. يتم تحقيق ذلك عن طريق حصاد صمام القلب الرئوي أولا من أنسجة قلب الفأر المتبرع. في الخطوة الثانية ، يتم حصاد القلب بالكامل من متبرع ثان.

ثم يتم زرع صمام القلب الرئوي للمتبرع في قلب المتبرع ويتم زرع القلب بصمام القلب الجديد موضعيا في الفأر المتلقي. في النهاية ، يمكن مراقبة وظيفة القلب المزروع وتدفق الدم عبر الصمام الرئوي باستخدام نظام الموجات فوق الصوتية عالي التردد في وضع دوبلر الموجة النبضية. الميزة الأساسية لاستخدام نموذج الفأر على نماذج الكبيرة الأخرى هي أن استخدام نموذج الفئران يمكننا من الاستفادة من مجموعة واسعة من الكواشف الجزيئية التي تمكننا من دراسة الآليات الجزيئية الخلوية الكامنة وراء تكوين الأنسجة الوعائية الجديدة في تطور تضيق وصمامات القلب الهندسية ، بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة بسبب تعقيد البقاء على قيد الحياة. الجراحة المجهرية.

العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم التناضح المناسب في مواقع الزرع ولأنه من الصعب إجراء التناضح على الأوعية ذات العيار الصغير دون نزيف لحصاد صمام القلب الرئوي للمتبرع ، قم أولا بقص منطقة الصدر لمتبرعة عمرها ستة إلى ثمانية أسابيع ، C 57 أسود ستة فأر ، ووضع الماوس في وضع الاستلقاء الظهري. بعد إجراء بضع الصدر ، قم بتعريض القلب ، وقم بعمل قطع صغير في الأذين الأيمن وقم بتفريف البطين الأيسر بمحلول ملحي مثلج. بعد ذلك ، قم بتشريح الشريان الرئوي من الشريان الأورطي الصاعد ثم قطع الصمام الرئوي جنبا إلى جنب مع سوار بطول ملليمترين من الشريان الرئوي وقم بتخزين الصمام الرئوي في محلول بارد وهيبارين ومحلول ملحي لمدة تصل إلى ساعتين قبل الزرع على قلب المتبرع لحصاد قلب المتبرع.

بعد إجراء بضع الصدر على متبرعة عمرها ستة إلى ثمانية أسابيع ، C 57 فأر أسود ستة كما هو موضح بصراحة ، افصل القلب ، والوريد المشب السفلي ، والوريد الدائري الشامل العلوي ، والشريان الأورطي الصاعد ، والشريان الرئوي ، والوريد الرئوي. يطلع على الوريد السفلي CVA بالثلج والبرد والمحلول الملحي المعقم ، ثم يربط الوريد المشي المائي السفلي ، والوريد المشي المركزي العلوي والوريد الرئوي بخياطة حريرية 6.0 ، ثم يقطع أعلى من الأربطة ، ويقطع الشريان الأورطي والشريان الرئوي بكفة ملليمترين ويقطع الصمام الرئوي لزرع صمام القلب الرئوي على قلب المتبرع. أولا، ضع الصمام في قلب المتبرع ووجه الأنسجة.

بعد ذلك ، استخدم خيوط خيوط أحادية 10 أوه على إبر مدببة لوضع غرزة على الجانب الأيمن من الصمام لتثبيتها. ثم ضع خمس إلى ست غرز متواصلة على طول الجانب الآخر من الصمام الرئوي. بعد الانتهاء من الجزء الأمامي من الصمام، قم بتدوير القلب أفقيا وخياطة الجزء الخلفي من الصمام الرئوي على قلب المتبرع.

ثم ربط الوريد الرئوي لقلب المتبرع واستخرج القلب. ثم ضع القلب في محلول ملحي بارد من الهيبارين لمدة تصل إلى ساعتين قبل زرعه في الفأر المتلقي. تأكد الآن من تخدير أنثى متلقية عمرها من ستة إلى ثمانية أسابيع ، C 57 أسود ستة فأر بقرصة إصبع القدم.

ثم بعد قص شعر البطن وتزييت العينين بمرهم عيون معقم ، ضع الفأر في وضع الاستلقاء الظهري ، وقم بتطهير البطن بضمادات البيتادين والكحول ، وقم بتغطية الفأر بستارة معقمة مع ترك منطقة الشق مكشوفة فقط. بعد ذلك ، قم بعمل شق البطن في خط الوسط من أسفل الخنجري إلى منطقة العانة فوق العانة. ثم أدخل ضام ذاتي الاحتفاظ ولف الأمعاء بشاش مبلل بالملح.

بصراحة ، حدد الشريان الأورطي تحت الكلوي والوريد المشيم. ثم ضع خيوط حريرية من ستة أوه وقم بربطها بشكل قريب وبعيد حول الشريان الأورطي والوريد cva السفلي. لكبح الدورة الدموية ، استخدم إبرة قياس 30 لإجراء البضع الذاتي للأورطي البطني واستئصال الأذن الوريدي في الوريد المشخ السفلي.

مد الفتحة بالمقص إلى حجم الشريان الأورطي المتبرع والشريان الرئوي. ضع قلب المتبرع على الجانب الأيمن من الشريان الأورطي البطني وقم بتغطيته بشاش معقم مرطب وترطيبه. قم بتأمين الشريان الأورطي المتبرع بغرزة واحدة على الطرف القريب من الفتحة في الشريان الأورطي البطني، ثم ضع أربع إلى خمس غرز متواصلة من الطرف البعيد للشريان الأورطي البطني.

اقلب القلب إلى الجانب الأيسر. قم بتغطيته بشاش مملوء بالمحلول الملحي وخياطة الطرف البعيد من الشريان الأورطي البطني بأربع إلى خمس خيوط أخرى مستمرة. قم بتأمين الشريان الرئوي المتبرع بغرزة واحدة على الطرف القريب من الفتحة في الوريد المشب السفلي ، ثم ضع أربع إلى خمس غرز مستمرة من الطرف البعيد للوريد الأجوف السفلي.

ثم اغسل تجويف CVA الوريدي السفلي بالهيبارين والمحلول الملحي. أغلق الجدار الأيمن للشريان الرئوي المتبرع والوريد السفلي المتلقي بخيوط مستمرة حتى النهاية البعيدة. الآن قم بإزالة الرباط البعيد وقم بتطبيق عامل إرقاء معقم موضعي قابل للامتصاص للسيطرة على النزيف.

عندما يتوقف النزيف تماما ، قم بإزالة الخيط القريب والتحكم في النزيف الثاني بنفس الطريقة التي سيبدأ بها القلب المزروع في النبض في غضون خمس دقائق بعد مفاغرة النجاح. ثم أعد الأمعاء واستخدم ست خيوط لإغلاق عضلات البطن والجلد في طبقتين. أخيرا ، تحت الجلد ، قم بحقن 0.5 مل من المحلول الملحي وضع الفأر في قفص استرداد على وسادة تسخين حتى يصبح متحركا بالكامل.

عند التعافي، ضع الفأر بمفرده حتى يتعافى تماما في قفص جديد مع فراش ورقي وقم بإعطاء مسكنات الألم. شرب الماء لمدة 48 ساعة. في هذه الصور ، يظهر القلب المزروع في مساحة البطن مباشرة بعد زراعة القلب وبعد خمس دقائق من الزرع.

عند إزالة الغرز على جانبي الشريان الأورطي والوريد المشيط السفلي ، يبدأ القلب في النبض في غضون دقيقة إلى دقيقتين ويصبح ورديا عندما يبدأ الدم في الدوران. لاحظ التمدد الأكبر في الأذين الأيمن. عندما تزداد ضربات القلب تدريجيا وتصبح مستقرة بعد 24 ساعة ، يمكن قياس تدفق الدم عبر الصمام الرئوي المزروع عن طريق الجلد بعد 10 أيام من الزرع.

باستخدام نظام الموجات فوق الصوتية عالي التردد مع وضع دوبلر الموجة النبضية ، يمكن ملاحظة مواقع البطين الأيمن المزروع في الشريان الأورطي والصمام الرئوي والشريان الرئوي في الوضع B. يقع تراكب حجم العينة الأصفر على PV المزروع كما هو موضح في التخطيطي. كما هو موضح في الرسم البياني ، يتم اكتشاف موجة QRS لقلب المتبرع بشكل إيقاعي ومستقل عن موجة القلب المتلقية بسرعة قصوى تبلغ حوالي 100 ملم في الثانية.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر إيقاف أي نزيف تماما في موقع زرع الصمام الرئوي أو عند التناضح على الشريان الأورطي المتبرع إلى الشريان الأورطي البطني المتلقي بعد هذا الإجراء. طريقة أخرى مثل زرع صمامات القلب المصممة للأنسجة في التحويل ، يمكن إجراء الفئران للإجابة على أسئلة إضافية حول مصدر الخلايا التي تملأ صمام القلب المصاب. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن تكون قد اكتسبت فهما جيدا لكيفية حصاد صمام القلب الرئوي ، وكيفية إجراء استبدال صمام القلب وزرع القلب غير المتجانس في نموذج الفأر.