Expression of Recombinant Cellulase Cel5A from <em>Trichoderma reesei</em> in Tobacco Plants

Megan Garvey; Johannes Klinger; Holger Klose; Rainer Fischer; Ulrich Commandeur

doi:10.3791/51711

التعبير عن المؤتلف سلولاز Cel5A من الترايكوديرما reesei في نباتات التبغ

JoVE Journal
Environment

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Environment

Expression of Recombinant Cellulase Cel5A from Trichoderma reesei in Tobacco Plants

التعبير عن المؤتلف سلولاز Cel5A من الترايكوديرما reesei في نباتات التبغ

Full Text

13,275 Views

13:05 min

June 13, 2014

DOI: 10.3791/51711-v

Megan Garvey¹, Johannes Klinger*¹, Holger Klose*¹, Rainer Fischer², Ulrich Commandeur¹

¹Institute for Molecular Biotechnology, Bio7,RWTH Aachen University, ²Fraunhofer Institute for Molecular Biology and Applied Ecology

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

واستخدمت نباتات التبغ لإنتاج سلولاز الفطرية، TrCel5A، عبر نظام التعبير عابر. ويمكن رصد التعبير باستخدام انصهار بروتين الفلورسنت، واتسم نشاط البروتين التعبير آخر.

الهدف العام من التجربة التالية هو التعبير عن البروتينات المستهدفة بشكل عابر في التبغ للحصول على فكرة عن جدوى التعبير عن الإنزيم النباتي في إطار زمني قصير. يتم تحقيق هذا التعبير العابر عن طريق تسلل أوراق التبغ بسلالة من الورم الزراعي ، والذي يحتوي على ناقل يشتمل على الجين محل الاهتمام كخطوة ثانية بعد الحضانة يتم حصاد أوراق النبات المتسللة وتنقية مستخلصات البروتين جزئيا للحصول على محلول إنزيم عامل. يتم إجراء تحليل البروتين التالي من أجل تقييم تأثيرات التعبير النباتي على الإنزيم والتحقق من نشاطه الأنزيمي.

تم الحصول على النتائج التي تظهر حجم البروتين وتأثيرات الجليكوزيل المحتملة والنشاط الأنزيمي بناء على فحوصات النشاف الغربي و zy وتدهور الركيزة. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول تحويل الكتلة الحيوية للنبات ويمكن أن توفر أيضا نظرة ثاقبة لنشاط الإنزيمات بعد التعبير عنها بشكل عابر في التبغ. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم خطوات التسلل بسبب تلف الأوراق بسهولة بسبب ملابس المحقنة وسأقوم بإجراء التجارب في ظل ظروف معقمة.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos