Name: الفئران زرع القرنية: نموذج لدراسة الشكل الأكثر شيوعا من الصلبة زراعة الأعضاء (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: تعلم نموذج زراعة القرنية في الفئران لدراسة رفض الطعم القرني الحاد. يتيح هذا النموذج تقييم سلامة الطعم واختبار استراتيجيات علاجية متنوعة لتحسين نتائج الزراعة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

يود المؤلفون أن يشكروا العديد من الأفراد الذين عملوا على هذه التقنية وأتقنوها وكانوا مسؤولين عن إنشاء العديد من المخطوطات في هذا المختبر وغيره. تم دعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة EY12707 المنح (PMS) ومنحة غير مقيدة من أبحاث الوقاية من العمى لقسم طب العيون.

ملاحظة: يتم التعامل مع جميع الحيوانات المستخدمة في هذا الإجراء وفقا للجمعية للبحوث في الرؤية وبيان العيون لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية فضلا عن المبادئ التوجيهية التي وضعتها لجنة الرقابة الحيوان في جامعة سانت لويس. يتم تعقيم جميع الأدوات والحلول الجراحية قبل الجراحة للحد من العدوى الميكروبية للعين: ملاحظة. تجدر الإشارة إلى أنه في حين أن الحيوانات لا تواجه بعض الألم من هذا الإجراء، ونحن لا توظف المسكنات. السبب في ذلك هو لأن جميع المسكنات هي مضادة للالتهابات ومنذ زرع القرنية الردود تنطوي الالتهاب، فإن استخدام العقاقير المضادة للالتهابات بخرق قدرتنا على تحديد ما هي العوامل التي تشارك في فشل الكسب غير المشروع القرنية. 1. التخدير <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الفئران المانحة والمتلقية تحت التخدير العام عن طريق الحقن IP من الكيتامين (86.98 ملغ / كلغ) وزيلازين (13.04 ملغم / كغم). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الماوس المتلقي تحت التخدير طوال الإجراء الذي يأخذ عادة 30 دقيقة إلى ساعة. بالتالي، ترصد باستمرار الماوس عن أي دلائل على استعادة وعيه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق مرهم للعين puralube أنه لن يخضع لعملية جراحية بعد تخدير الحيوان لمنع جفاف. </li></ol> 2. مسمار القرنية <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على زر المانحة القرنية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم تخدير الحيوان بالكامل، وتحقيق توسع حدقة العين وافية من قبل إدارة بضع قطرات العين 1٪ و 2.5٪ تروبيكاميد فينيليفرين هيدروكلوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع رأس الحيوان المانحة أفقيا على لوحة وضعت على دعم قوي المنقولة. إصلاح الرأس مع شريط من الشريط عبر العنق لضمان أن العين هي في وضع أفقي في جميع أنحاء العملية برمتها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام 2 مم منقب، الذي كان مصبوغ باللون الأزرق الميثيل طرف، خارجيبطن الموقع القرنية الكسب غير المشروع المركزي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع شفرة حادة، تخترق القرنية وحقن healon في الغرفة الأمامية لتعميق ذلك لتقليل فرصة حدوث ضرر لبطانة المانحة والعدسة الأساسية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استئصال الكسب غير المشروع مع الجهات المانحة vannas مقص ووضعها في طبق يحتوي هانكس &quot;محلول ملحي متوازن حتى الاستخدام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد أن كان الكسب غير المشروع المانحة على إزالتها، الموت ببطء الماوس المانحة عن طريق الاستنشاق CO 2. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد السرير الكسب غير المشروع. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكرار نفس الخطوات كما هو موضح في 2.1.1 خلال 2.1.2 للمتلقي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام 1.5 مم منقب، الخطوط العريضة للموقع الكسب غير المشروع المستفيدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع شفرة حادة، تخترق القرنية وحقن healon في الغرفة الأمامية لتعميق ذلك لتقليل فرصة من الأضرار التي لحقت العدسة الأساسية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة زر القرنية المركزية المذكورة من المستلم باستخدام مقص vannas وتجاهل. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خياطةتطعيم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع القرنية المانحة على الكسب غير المشروع سرير في القرنية المستلم. مما لا شك فيه أن healon كافية تحت القرنية المانحة لحماية الخلايا البطانية المانحة من التلف عن طريق الاتصال المباشر مع العدسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام microforceps يميل السوبر غرامة، ومكان اللدغة الأولى من النايلون 11-0 خياطة إلى جانب الجهات المانحة، من خلال الجهات المانحة مع عمق 90٪ من سمك الكامل إلى جانب المستلم، ثم تعادل خارج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يرتكز القرنية في مكانه، نفذ خيوط متقطعة midcardinal بحيث القرنية ديها 8 إلى 10 مجموع الغرز واصطف القرنية المانحة بشكل آمن حتى مع وتعلق على المتلقي السرير الكسب غير المشروع القرنية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعميق الغرفة الأمامية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعميق الغرفة الأمامية عن طريق حقن HBSS أو فقاعة الهواء في الغرفة الأمامية وتحقق بلطف على سلامة القرنية الكسب غير المشروع للتسرب مع الاسفنج السليلوز. ملاحظة: إذا كان لا يمكن إصلاحه الغرفة الأمامية ثم هناك احتمال كبير لجataract الأمر الذي سيجعل التقييمات المستقبلية للقرنية المزروعة صعبة للغاية وسوف أيضا أن تؤدي إلى ضعف بطانة القرنية المانحة وبالتالي فشل الكسب غير المشروع. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التقييم النهائي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة العين لتحديد أن التلميذ هو جولة وعمق الغرفة الأمامية أمر طبيعي. ملاحظة: إذا كان التلميذ ليست جولة هذا يدل على أنه خلال خياطة القزحية تضررت وبالتالي يعتبر الكسب غير المشروع عطل فني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق مرهم مضاد حيوي للعين. اختياري: قم بإغلاق غطاء العين مع خياطة الحرير 7-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الفئران حتى تكون مستيقظا تماما وبشكل فردي ثم إيوائهم مدة لا تقل عن يومين بعد الجراحة. </li></ol></li></ol> 3. إزالة خياطة <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في تلك الحالات التي يستخدم فيها الغطاء خياطة، تخدير الفئران كما هو موضح أعلاه وإزالة خياطة غطاء في 48 ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران في يوم 7 بعد العمل الجراحي. إزالة suturوفاق تأمين الكسب غير المشروع القرنية. مرة واحدة يتم إزالة الغرز وأيقظت الحيوان تماما، إعادته إلى قفصه. </li></ol> 4. التقييم السريري <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فحص العين للمؤشرات لمضاعفات الإجرائية التي تشمل الساد (تغيم العدسة)، تحدمية (الدم في الغرفة الأمامية)، والغرفة الأمامية ليست على عمق مناسب، أو غموض كبير من القرنية. نظر في تلك التي تثبت هذه المضاعفات مثل &quot;خطر&quot; والموت ببطء لهم عن طريق الاستنشاق CO 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء كافة الفحوص التي أجريت على الفئران unanesthetized. عقد الماوس بيد واحدة وبالتالي تقييد الماوس بحيث يمكن من ناحية أخرى proptose العين لتمكين رؤية أفضل للعين. وبمجرد الانتهاء من الملاحظات، يعود الحيوان إلى قفصه. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وقد مراقب غير مألوف مع مجموعات العلاج وتقييم زرع القرنيات من 2 إلى 3 مرات في الأسبوع لعلامات الكسب غير المشروع القرنيةحلقة الرفض أو الفشل الكسب غير المشروع القرنية. استخدام إما المجهر الجراحي أو الأفقي biomicroscope شق مصباح لهذه الملاحظات. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقييم كل القرنية لالتعتيم باستخدام مقياس من 0 إلى 5. يتم تعريف نطاق كما يلي: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين على درجة من 0 إلى تلك القرنيات التي ليس لها علامات التعتيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين على درجة من 1 إلى تلك القرنيات التي تظهر أدنى غموض سطحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين النتيجة من 2 إلى القرنيات التي تعرض غموض خفيف وأعمق ولكن التلميذ وقزحية الكامنة لا تزال ملحوظ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين النتيجة من 3 إلى القرنية التي تعرض انسجة التعتيم حيث لا يمكن رؤيتها القزحية بالتفصيل باستثناء هامش التلميذ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين النتيجة من 4 إلى القرنية التي تعرض انسجة كثيفة التعتيم وإذا لم الهياكل يمكن عرضها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين على درجة من 5 إلى القرنية التي تعرض التعتيم الكامل وانسجة ذمة مكثفة، مع التلميذ وقزحية العين تحجب تماما. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"><html> تقييم أيضا كل القرنية لدرجة تسلل الأوعية الدموية (اتساع الأوعية الدموية) باستخدام مقياس تقييم من 1 إلى 8. ولتحقيق ذلك، عرض القرنية أنها تتكون من 4 الأرباع متساوية وتحديد مقدار الأوعية الدموية في كل من هذه الأرباع مع النتيجة التي سوف تتراوح من 0 (أي السفن) إلى 2 لواسعة من الأوعية الدموية التي رباعي. إضافة عشرات الفردية من كل رباعي لحساب النتيجة النهائية اتساع الأوعية الدموية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصنيف القرنيات رفضت تماما كما لو كان لديهم على 3 نقاط عن ملاحظتين متتالية للمرة يشير تصل إلى 5 أسابيع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصنيف الفئران التي كانت واضحة في 5 أسابيع ولكن القرنيات تطوير عتامة في بعض الأحيان&gt; 45 آخر أيام engraftment، برصيد 3 نقاط زمنية لمدة متتالية، وبعد أن خضع أواخر الأجل رفض المزروع القرنية. استخدام كابلان-ماير منحنيات البقاء على قيد الحياة لتحليل بقاء الكسب غير المشروع. </li></ol></li></ol> 5. التلاعب نموذج في اليسار: 40px؛ &quot;&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الخلايا واحد من الطحال. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحضير الخلايا واحدة، الموت ببطء أولا الماوس المانحة. ثم، وإزالة الطحال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الطحال في مصفاة الخلية وتعطيل ذلك مع المكبس من حقنة حقنة 3 مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل الخلايا وresuspend في 10 مل من محلول الملح المتوازن هانكس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة 10 ميكرولتر من تعليق خلية وإضافة إلى 10 ميكرولتر من 0.4٪ التريبان الأزرق والمزيج. إضافة إلى أن عدادة الكريات وعدد الخلايا في الشبكة المركزية. عدد الخلايا في الأنبوب هو عدد خلايا × 10 4 × 2 (عامل التخفيف باللون الأزرق التريبان) × 10 (وحدة التخزين في الأنبوب). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحقن في الغرفة الأمامية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران كما هو موضح سابقا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء الحقن باستخدام مجهر تشريح. لكل حقن intracameral، استخدم 10 6 خلايا الطحال في حجم 0.005 مل وميكروليتر حقنة 0.25 مل مزودة إبرة 33 G. ملاحظة: التلاعب أخرىالنموذج يمكن أن يقوم بها معالجة الحيوانات مع الكواشف التي تعمل إما الخصوم أو منبهات لتحديد الدور الذي يمكن أن تلعبه عاملا خاصا التالية مثلي جراحة القرنية المزروع. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Farooq, A. V., Shukla, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herpes+simplex+epithelial+and+stromal+keratitis%3A+an+epidemiologic+update%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update.</a> Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).</li>
<li>Gipson, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+and+diseases+of+the+ocular+surface+and%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Opthlamol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related changes and diseases of the ocular surface and.</a> Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (2013).</li>
<li>Edwards, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indications+for+corneal+transplantation+in+New+Zealand%3A+1991-1999%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Indications for corneal transplantation in New Zealand: 1991-1999.</a> Cornea. 21, 152-155 (2002).</li>
<li>Thompson, R. W., Price, M. O., Bowers, P. J., Price, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+after+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Long-term survival after penetrating keratoplasty.</a> Ophthalmol. 110, 1396-1402 (2003).</li>
<li>Williams, K. A., Roder, D., Esterman, A., Muehlberg, S. M., Coster, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+predictive+of+corneal+graft+survival.+Report+form+the+Australian+Corneal+Graft+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Factors predictive of corneal graft survival. Report form the Australian Corneal Graft Registry.</a> Ophthalmology. 99, 403-414 (1992).</li>
<li>Larkin, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Corneal allograft rejection.</a> Br. J. Ophthalmol. 78, 649-652 (1994).</li>
<li>Boisjoly, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+of+corneal+graft+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Risk factors of corneal graft failure.</a> Ophthalmol. 100, 1728-1735 (1993).</li>
<li>Sugar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recipient+Risk+Factors+for+Graft+Failure+in+the+Cornea+Donor+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Recipient Risk Factors for Graft Failure in the Cornea Donor Study.</a> Ophthalmol. 116, 1023-1028 (2009).</li>
<li>Namba, K., Kitaichi, N., Nishida, T., Taylor, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+regulatory+T+cells+by+the+immunomodulating+cytokines+alpha-melanocyte-stimulating+hormone+and+transforming+growth+factor-beta2%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Induction of regulatory T cells by the immunomodulating cytokines alpha-melanocyte-stimulating hormone and transforming growth factor-beta2.</a> J. Leukoc. Biol. 72, 946-952 (2002).</li>
<li>Taylor, A. W., Yee, D. G., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+nitric+oxide+generated+by+inflammatory+macrophages+by+calcitonin+gene-related+peptide+in+aqueous+humor%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Suppression of nitric oxide generated by inflammatory macrophages by calcitonin gene-related peptide in aqueous humor.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1372-1378 (1998).</li>
<li>Wilbanks, G. A., Mammolenti, M., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+induction+of+anterior+chamber-associated+immune+deviation+%28ACAID%29.+III.+Induction+of+ACAID+depends+upon+intraocular+transforming+growth+factor-beta%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Studies on the induction of anterior chamber-associated immune deviation (ACAID). III. Induction of ACAID depends upon intraocular transforming growth factor-beta.</a> Eur. J. Immunol. 22, 165-173 (1992).</li>
<li>Volpert, O. V., et al. Inducer-stimulated Fas targets activated endothelium for destruction by anti-angiogenic thrombospondin-1 and pigment epithelium-derived factor. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVolpert%2C+OV+%22Nat.+Med%22">Nat. Med</a>. , 8-349 (2002).</li>
<li>Apte, R. S., Sinha, D., Mayhew, E., Wistow, G. J., Niederkorn, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+edge%3A+role+of+macrophage+migration+inhibitory+factor+in+inhibiting+NK+cell+activity+and+preserving+immune+privilege%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cutting edge: role of macrophage migration inhibitory factor in inhibiting NK cell activity and preserving immune privilege.</a> J. Immunol. 160, 5693-5696 (1998).</li>
<li>Kennedy, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+production+of+interleukin-1+receptor+antagonist+peptides+in+normal+human+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Novel production of interleukin-1 receptor antagonist peptides in normal human cornea.</a> J. Clin. Invest. 95, 82-88 (1995).</li>
<li>Shimmura-Tomita, M., Wang, M., Taniguchi, H., Akiba, H., Yagita, H., Hori, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Galectin-9-mediated+protection+from+allo-specific+T+cells+as+a+mechanism+of+immune+privilege+of+corneal+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Galectin-9-mediated protection from allo-specific T cells as a mechanism of immune privilege of corneal allografts.</a> PLoS One. 8, (2013).</li>
<li>Goldberg, M. F., Ferguson, T. A., Pepose, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+cellular+adhesion+molecules+in+inflamed+human+corneas%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Detection of cellular adhesion molecules in inflamed human corneas.</a> Ophthalmol. 101, 161-168 (1994).</li>
<li>Stuart, P. M., Griffith, T. S., Usui, N., Pepose, J. S., Yu, X., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD95+ligand+%28FasL%29-induced+apoptosis+is+necessary+for+corneal+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">CD95 ligand (FasL)-induced apoptosis is necessary for corneal allograft survival.</a> J Clin Invest. 99, 396-402 (1997).</li>
<li>Yamagami, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+Fas-Fas+ligand+interactions+in+the+immunorejection+of+allogeneic+mouse+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Role of Fas-Fas ligand interactions in the immunorejection of allogeneic mouse corneal transplants.</a> Transplantation. 64, 1107-1111 (1997).</li>
<li>Stuart, P. M., Pan, F., Plambeck, S., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fas%2FFas+ligand+interactions+regulate+neovascularization+in+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fas/Fas ligand interactions regulate neovascularization in the cornea.</a> Invest. Ophthalmmol. Vis. Sci. 44, 93-98 (2003).</li>
<li>Stuart, P. M., Yin, X. T., Pan, F., Haskova, Z., Plambeck, S., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibitors+of+matrix+metalloproteinases+activity+prolong+corneal+allograft+acceptance+by+increasing+FasL+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Inhibitors of matrix metalloproteinases activity prolong corneal allograft acceptance by increasing FasL expression.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 1169-1173 (2004).</li>
<li>Joo, C. -K., Pepose, J. S., Stuart, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-cell+mediated+responses+in+a+murine+model+of+orthotopic+corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">T-cell mediated responses in a murine model of orthotopic corneal transplantation.</a> Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 1530-1540 (1995).</li>
<li>Sonoda, Y., Sano, Y., Ksander, B., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cell-mediated+immune+responses+elicited+by+orthotopic+corneal+allografts+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of cell-mediated immune responses elicited by orthotopic corneal allografts in mice.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 427-434 (1995).</li>
<li>Sano, Y., Osawa, H., Sotozono, C., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+expression+during+orthotopiccorneal+allograft+rejection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cytokine expression during orthotopiccorneal allograft rejection in mice.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1953-1957 (1998).</li>
<li>Haskova, Z., Usui, N., Ferguson, T. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+cells+are+critical+in+corneal+but+not+skin+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">CD4+ T cells are critical in corneal but not skin allograft rejection.</a> Transplantation. 69, 483-488 (2000).</li>
<li>Tan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+disruption+of+antiangiogenic+signals+by+recruited+allospecific+T+cells+leads+to+corneal+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunological disruption of antiangiogenic signals by recruited allospecific T cells leads to corneal allograft rejection.</a> J. Immunol. 188, 5962-5969 (2012).</li>
<li>Dana, M. R., Yamada, J., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+interleukin-1+receptor+antagonist+promotes+corneal+transplant+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Topical interleukin-1 receptor antagonist promotes corneal transplant survival.</a> Transplantation. 63, 1501-1507 (1997).</li>
<li>Cunnusamy, K., Chen, P. W., Niederkorn, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-17A-dependent+CD4%2BCD25%2B+regulatory+T+cells+promote+immune+privilege+of+corneal+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">IL-17A-dependent CD4+CD25+ regulatory T cells promote immune privilege of corneal allografts.</a> J. Immunol. 186, 6737-6745 (2011).</li>
<li>Fu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arginine+depletion+as+a+mechanism+for+the+immune+privilege+of+corneal+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Arginine depletion as a mechanism for the immune privilege of corneal allografts.</a> Eur. J. Immunol. 41, 2997-3005 (2011).</li>
<li>Medina, C. A., Rowe, A. M., Yun, H., Knickelbein, J. E., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Azithromycin+treatment+increases+survival+of+high-risk+corneal+allotransplants.Cornea%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Azithromycin treatment increases survival of high-risk corneal allotransplants.Cornea.</a> , 32-658 (2013).</li>
<li>Cho, Y. K., Zhang, X., Uehara, H., Young, J. R., Archer, B., Ambati, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+Endothelial+Growth+Factor+Receptor+1+morpholino+increases+graft+survival+in+a+murine+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 morpholino increases graft survival in a murine penetrating keratoplasty.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 8458-8471 (2012).</li>
<li>Kim, H. K., Choi, J. A., Uehara, H., Zhang, X., Ambati, B. K., Cho, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presurgical+corticosteroid+treatment+improves+corneal+transplant+survival+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Presurgical corticosteroid treatment improves corneal transplant survival in mice.</a> Cornea. 32, 1591-1598 (2013).</li>
<li>Yamazoe, K., Yamazoe, K., Shimazaki-Den, S., Shimazaki, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+factors+for+corneal+graft+recovery+after+severe+corneal+graft+rejection+following+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Prognostic factors for corneal graft recovery after severe corneal graft rejection following penetrating keratoplasty.</a> BMC Ophthalmol. 13, 5(2013).</li>
<li>Panda, A., Vanathi, M., Kumar, A., Dash, Y., Priya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+graft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Corneal graft rejection.</a> Surv. Ophthalmol. 52, 375-396 (2007).</li>
<li>Patel, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+survival+and+endothelial+outcomes+in+the+new+era+of+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty.</a> Exp. Eye Res. 95, 40-47 (2012).</li>
<li>Anshu, A., Price, M. O., Tan, D. T., Price, F. W. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+keratoplasty%3A+a+revolution+in+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Endothelial keratoplasty: a revolution in evolution.</a> Surv. Ophthalmol. 57, 236-252 (2013).</li>
</ol>

ليس للمؤلفين مصالح مالية متنافسة.

نموذج الفئران من زرع القرنية هو موضح هنا تمكن الباحث لدراسة المزروع رفض القرنية البشرية في نموذج تنبؤي هو ما هي أفضل عوامل ترتبط مع كل من رفض 15،17،18،20، 26-30 و21-25 القبول من القرنية المغايرة. خلافا لزرع القرنية البشرية، حيث يتم إعطاء المرضى سواء الموضعية أو الجهازية العلاج الستيرويد إما لعلاج أو منع رفض 31، وعادة ما يستخدم هذا النموذج لتحديد تلك العوامل التي لها صلة المزروع الرفض في حالة عدم وجود مثل هذا العلاج. بالإضافة إلى نموذج للرفض الحاد المزروع القر...

زرع القرنية هو أحد الأنواع الأكثر نجاحا وشيوعا لزرع أجريت في البشر. الأسباب يتم تنفيذ هذه الجراحة هي نتيجة الإصابات والأمراض المعدية 1، أو أشكال أخرى من أمراض القرنية غير المعدية 2. شخصيات من جمعية بنك العيون الأمريكية تشير إلى أن أكثر من 46،000 أجريت في عام 2011 (انظر موقع على شبكة الإنترنت على العنوان التالي: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). مؤشرا على نجاحها هو أن معدلات الفشل سنة واحدة لترقيع القرنية خيفي تتراوح 10-15٪ وعلى 5 سنوات من النجاح هو ما يزيد على 70٪ 3-8. كما أظهرت العديد من الدراسات أن نجاح المغايرة القرنية يرتبط مباشرة إلى حقيقة أن العين هي موقع متميز مناعيا. العوامل المسؤولة عن وضع القرنيات كموقع امتياز المناعة تشمل عدم وجود كل من الأوعية الدموية والليمفاوية في القرنية، والغياب النسبي للمستضد تقديم الخلايا، والعوامل التي تنتجها القرنية التي قامعليالي funtions المستجيب المناعة 9-15 والتعبير انخفاض MHC المستضدات 16، والتعبير عن FASL 17-20. ومع ذلك، وعلى الرغم من هذه العوامل المهيئة هذه الطعوم للنجاح، وأنها لا تخضع لرفض 3-7. وبالتالي، فهم تلك الآليات التي تتوسط هذا الرفض وكذلك اختبار مختلف العلاجات لمنع الرفض هي ذات أهمية حاسمة. تحقيقا لهذه الغاية، وصفنا هنا نموذج الفئران من زرع القرنية التي تم استخدامها لأكثر من 20 عاما لدراسة زرع القرنية في بيئة تسيطر التجريبية. منذ ردود زرع تشمل العديد من العوامل المختلفة العاملة في الحفل الذي سيكون في نهاية المطاف تحديد ما إذا فشلت أو نجحت الأنسجة المزروعة، فمن غير الممكن أن نفهم أهمية هذه العوامل في أي نموذج في المختبر. وبالتالي، هناك حاجة لدراسات باستخدام حيوانات سليمة لتحديد ما هي عوامل مهمة إما نجاح أو failuإعادة الأنسجة المزروعة. بينما الأنواع الأخرى من الحيوانات التي استخدمت لدراسة زرع القرنية، ونموذج الفئران ديها العديد من المزايا بالمقارنة مع استخدام الأنواع الأخرى. الأول هو وجود العديد من سلالات الفئران التي تعبر عن بعض الجينات المحورة أو تم استهداف الجينات تفتقر إلى التعبير عن عوامل مناعية معينة وظيفتها في زرع يمكن دراستها بشكل أفضل. وبالإضافة إلى ذلك، هناك العديد من الكواشف (عوامل المؤتلف والأجسام المضادة التي تحييد العوامل) التي هي محددة للفئران والتي لا وجود لها بالنسبة لكثير من الأنواع الأخرى من الحيوانات. بسبب وجود هذه العوامل، وقد استخدم هذا النموذج على نطاق واسع لتحديد العوامل ذات الصلة المشاركة في الردود المزروع القرنية الحادة 15، 17،18،20 -29. وعلاوة على ذلك، ومن المعروف أن العديد من العوامل التي تدخل في زرع القرنية أيضا لتكون وظيفية في زرع الأنسجة الأخرى.

<table><tbody><tr><td>زايس مجهر جراحي</td><td>زايس</td><td>1</td><td></td></tr><tr><td>مل حقنة</td><td>BD</td><td>305122</td><td></td></tr><tr><td>3 مل حقنة</td><td>BD</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>10 مل حقنة</td><td>BD</td><td>309602</td><td></td></tr><tr><td>Vannus</td><td>Stortz</td><td>E-3387</td><td></td></tr><tr><td>11-0 خياطة</td><td>ألكون</td><td>717939M</td><td></td></tr><tr><td>تريفين 2.0 مم</td><td>كاتينا</td><td>ك 2-7520</td><td></td></tr><tr><td>تريفين 1.5 ملم</td><td>كاتينا</td><td>ك 2-7510</td><td></td></tr><tr><td>هيدروكلوريد التريكايين 0.5٪</td> <td>ألكون</td><td>NDC 0065-0741-12</td><td></td></tr><tr><td>ملقط هيلون</td><td>أبوت</td> هيلون <td>OVD</td><td></td></tr><tr><td></td><td>FST</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>7-0 خيوط</td><td>خيوط ألكون</td><td>8065</td><td></td></tr><tr><td>2.5٪ فينيليفرين هيدروكلوريد إل</td><td>ألكون</td><td>NDC 61314-342-02</td><td></td></tr><tr><td>1٪ تروبيكاميد</td><td>Bausch & أمبير Lomb</td><td>NDC-24208-585-59</td><td></td></tr><tr><td>حقنة هاميلتون</td><td>هاميلتون</td><td>7654-01</td><td></td></tr><tr><td>33 إبرة قياس</td><td>هاميلتون</td><td>90033</td><td></td></tr><tr><td>مصفاة خلية (100 & mu; م نايلون)</td> <td>BD Falcon</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>مقياس الدم</td><td>Cardinal Health</td><td>B3175</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue</td><td>Sigma</td><td>T8154</td><td></td></tr></tbody></table>

الفئران زرع القرنية: نموذج لدراسة الشكل الأكثر شيوعا من الصلبة زراعة الأعضاء

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

زرع القرنية هو الشكل الأكثر شيوعا لزراعة الأعضاء في الولايات المتحدة مع ما بين 45,000 و 55,000 إجراء يتم إجراؤه كل عام. في حين أن العديد من النماذج الحيوانية موجودة لهذا الإجراء ، فإن الفئران هي الأنواع الأكثر استخداما. أسباب استخدام الفئران هي التكلفة النسبية لاستخدام هذا النوع ، ووجود العديد من السلالات المحددة وراثيا التي تسمح بدراسة الاستجابات المناعية ، ووجود مجموعة واسعة من الكواشف التي يمكن استخدامها لتحديد الاستجابات في هذا النوع بشكل أكبر. تم استخدام هذا النموذج لتحديد العوامل في القرنية المسؤولة عن حالة الامتياز المناعي النسبي لهذا النسيج التي تمكن الطعوم الخفية للقرنية من البقاء على قيد الحياة في حالة عدم وجود علاج مثبط للمناعة. كما تم استخدامه لتحديد تلك العوامل الأكثر أهمية في رفض مثل هذه الطعوم الخيفية. وبالتالي ، فإن الكثير مما نعرفه فيما يتعلق بآليات قبول ورفض طعم القرنية يرجع إلى الدراسات التي تستخدم نموذج الفئران لزرع القرنية. بالإضافة إلى وصف نموذج لرفض طعم القرنية الحاد ، نقدم أيضا لأول مرة نموذجا لرفض طعم القرنية المتأخر.

تم استخدام نموذج الفئران من زرع القرنية لأكثر من 20 عاما لتوصيف آليات كل من رفض المزروع 19-23 القرنية والقرنية قبول المزروع 13، 15،16،18، 24-27 بنجاح. وقد استخدم هذا النموذج لتحديد أهمية FASL التعبير في قبول المزروع القرنية، في أن الحيوانات التي تفتقر FASL لم تكن قادرة على قبول المغايرة القرنية 15. كما تم استخدامه لإثبات أن عامل نمو بطانة 1 مستقبلات العلاج morpholino الوعائية يزيد بشكل كبير القرنية بقاء الكسب غير المشروع 28. في تقرير حدي...

تم استخدام الفئران كنموذج لدراسة العديد من أشكال الزرع ، بما في ذلك زرع القرنية. نصف في هذا التقرير نموذج الفئران لكل من زراعة القرنية الحادة والمتأخرة.

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

الهدف العام من الإجراء التالي هو تقديم نموذج لرفض الطعم الخيفي الحاد للقرنية. يتم تحقيق ذلك عن طريق إزالة قرنية المتبرع أولا. تتمثل الخطوات التالية من الإجراء في إعداد سرير الكسب غير المشروع المتلقي وخياطة القرنية المانحة في مكانها.ثم يتم اختبار سلامة الكسب غير المشروع ، وإذا لم يكن هناك تسرب ، يتم خياطة الجفن لإغلاقه. بعد أسبوع ، يتم تقييم عتامة طعم القرنية لقياس رفض الطعم الخيفي. في النهاية ، يمكن استخدام النموذج ، ويمكن اختبار مجموعة متنوعة من الاستراتيجيات العلاجية لتحديد أهم العوامل المرتبطة برفض الطعم الخيفي لعمليات زرع الأعضاء الصلبة.زراعة القرنية هي الأكثر شيوعا في الولايات المتحدة. هناك العديد من النماذج الحيوانية المتاحة لهذا الإجراء ، لكن الفئران هي الأكثر استخداما. تم استخدام هذا النموذج لتحديد العوامل ، بما في ذلك رفض وقبول عملية زرع القرنية.بعد تخدير الفئران المانحة والمتلقية وتأكيد حالات التخدير الخاصة بها عن طريق قرصة إصبع القدم ، ضع مرهم التشحيم النقي على العيون التي لا تخضع لعملية جراحية. ثم قم بتأمين الرأس بالعين المانحة أفقيا على دعامة قوية ومتحركة باستخدام شريط من الشريط عبر الرقبة. الآن باستخدام سن قطره ملليمترين تم مصبوغ طرفه باللون الأزرق الميثيل ، حدد موقع طعم القرنية المركزي.ثم باستخدام شفرة سكين العين 15 درجة ، اخترق القرنية للمساعدة في تجنب تلف العدسة الأساسية. حقن المحلول اللزج المرن في الغرفة الأمامية حتى تصبح الغرفة أعمق. الآن استئصال الكسب غير المشروع المتبرع بمقص البندقية وانقل الكسب غير المشروع إلى طبق من HBSS على الجليد حتى استخدامه لتحقيق madres ، وقم بإعطاء بضع قطرات من 1٪ tpic aide و 2.5٪ إيفرين هيدروكلوريد للعين المتلقية.ثم باستخدام سن 1.5 ملم ، حدد موقع الكسب غير المشروع كما هو موضح سابقا ، باستخدام شفرة سكين العين 15 درجة ، اخترق القرنية وحقن محلول لزج مرن في الغرفة الأمامية لتعميقها. من أجل الحفاظ على مسافة بين القرنية المانحة والعدسة ، يقلل هذا من فرصة تلف العدسة الأساسية وبطانة المتبرع. باستخدام مقص البندقية ، قم بإزالة زر القرنية المركزي المحدد من المستلم وتخلص منه.أضف وسط لزج مرن إلى المنطقة التي تم إخلاؤها عن طريق إزالة زر القرنية لحماية الخلايا البطانية للقرنية من التلف عن طريق الاتصال المباشر بالعدسة. الآن ضع قرنية المتبرع فوق فراش الكسب غير المشروع باستخدام ملقط دقيق فائق النعومة. ضع اللقمة الأولى من خياطة النايلون 11.0 في الجانب المتبرع من خلال قرنية المتبرع بحوالي 90٪ من السماكة الكاملة.ثم إلى الجانب المتلقي بنفس العمق ، ثم اربطها. استمر في تأمين القرنية المزروعة باستخدام خيوط منتصف الكاردينال. كل ما هو مطلوب هو ما مجموعه ثماني إلى 10 خيوط.الآن إصلاح وغسل الغرفة الأمامية بحقن من المحلول الملحي. بدلا من ذلك ، قم بحقن الهواء في الغرفة الأمامية لإصلاحها. بعد الحقن ، اختبر سلامة الكسب غير المشروع برفق باستخدام إسفنجة السليلوز.أخيرا ، قم بتقييم العين. تحديد ما إذا كان حدقة العين مستديرا وما إذا كانت الحجرة الأمامية تبدو طبيعية. إذا بدا الكسب غير المشروع جيدا ، ضع مرهما مضادا حيويا وأغلق الجفن اختياريا باستخدام خياطة حريرية 7.0 بعد الجراحة.راقب الماوس حتى يستيقظ تماما ثم استمر في مراقبته في قفص منزله لمدة يومين. قم بإزالة الغرز من الفأر المخدر بين أربعة وسبعة أيام بعد العملية. بعد إزالة الغرز ، راقب الماوس لعدة أيام.باستخدام مقياس التعتيم ، قم بتقييم كل قرنية بدرجة من صفر إلى خمسة. يشير الصفر إلى عدم وجود عتامة. تتوافق درجة واحد مع الحد الأدنى من التعتيم السطحي.تشير الدرجة الثانية إلى عتامة خفيفة إلى أعمق مع تلميذ أساسي ملحوظ. وقزحية العين علامة على درجة ثلاثة للقرنيات ذات التعتيم اللحمي حيث لا يمكن رؤية القزحية بالتفصيل باستثناء هوامش التلميذ. إذا كان هناك عتامة لحمية كثيفة ولا يمكن رؤية أي هياكل أساسية ، فامنح الكسب غير المشروع درجة أربعة.إذا كان هناك عتامة كاملة مع وذمة لحمية مكثفة وتم حجب كل من التلميذ والقزحية تماما ، فقم بتسجيل الكسب غير المشروع بخمس يقترح بروتوكول النص أيضا مقياسا من صفر إلى ثمانية على تسلل الأوعية الدموية. يمكن إجراء مجموعة متنوعة من التلاعب باستخدام نموذج الكسب غير المشروع.على سبيل المثال ، يمكن إضافة خلايا الطحال إلى الغرفة الأمامية من الفأر المتبرع. بعد القتل الرحيم للمتبرع ، قم بإزالة الطحال ونقله إلى مصفاة خلوية باستخدام مكبس حقنة سعة ثلاثة ملليلتر ، وقم بتعطيل الطحال ، ثم اغسل خلايا الطحال في 10 ملليلتر من HBSS ، وأعد تعليق الخلايا المغسولة في 10 ملليلتر من HBSS وعد الخلايا باستخدام مقياس الخلوي الدموي. احتفظ بالخلايا في درجة حرارة الغرفة حتى يتم استخدامها لاحقا.قبل إجراء عملية زرع القرنية ، قم بحقن الخلايا في الغرفة الأمامية في العين المقابلة باستخدام مجهر تشريح ، وحقن 1 مليون خلية طحال في خمسة ميكرولترات من HBSS من إبرة قياس 33. تم استخدام النموذج لاختبار ما إذا كان تحمل الخلايا التائية لمستضد ألو الجهازي للمستضدات التي يعبر عنها طعم القرنية المتبرع قد يحسن بقاء الكسب غير المشروع. تم تحمل الفئران BC إلى C 57 أسود 10 مستضدات ألو عن طريق حقن خلايا الطحال B 10 في الغرفة الأمامية.هذا لم يحسن قبول طعم القرنية. تظهر الدراسات أن إثبات تحمل المستضد المحدد للمستضد الألو كما تم قياسه بواسطة استجابات DTH لا يؤثر على نتيجة الطعوم الخيفية للجلد أو القرنية. أظهرت دراسة مماثلة أنه عندما تم إثبات تحمل DTH في فئران BAB c تجاه مستضدات B 10 allo ، فإن ترقيع الجلد الذي يحافظ على بعض أو كل مستضدات B 10 allo لم يزيد من البقاء على قيد الحياة.وبالتالي ، فإن الأمعاء C مع DTH الثابت الخاص بالمستضد لم تستفد بشكل ملموس من الطعوم الخيفية للقرنية أو الجلد. كما ترون من تجربة اليوم ، فإن زراعة القرنية هي إجراء صعب من الناحية الفنية. ومع ذلك ، هذا هو أفضل نموذج لدراسة الخلايا والعوامل التي تحدد نجاح الرسم البياني أو فشله.

murine-corneal-transplantation-model-to-study-most-common-form-solid

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

في الفئران عنق الرحم نموذج زرع القلب هو مناسبة تماما لالمناعية فضلا عن دراسات إصابة نقص التروية ضخه. نحن تعديل الإجراء باستخدام تقنية صفعة غير خياطة وتنفيذ أكثر من 1،000 عملية زرع ناجحة مع هذا النهج.  هنا، ونحن نقدم تفاصيل إضافية لهذه التقنية لاستكمال الفيديو.

الفئران عنق الرحم القلب زرع نموذج باستخدام أزرار وتقنيات التعديل

هنا ، نقدم بروتوكولا لدراسة مناعة الرفض. قدم النموذج الجراحي تقارير عن وقت تشغيل قصير وتقنية موجزة. اعتمادا على تركيبة سلالة المتبرع والمتلقي ، قد تصاب الكلية المزروعة برفض خلوي حاد أو تلف الطعم الخيفي المزمن ، والذي يتم تحديده من خلال التليف الخلالي وضمور أنبوبي.

الماوس زرع الكلى: نماذج من طعم خيفي رفض

لدراسة الجمع بين الأعضاء الصلبة وزرع الأوعية الدموية المركبة ، نصف نموذجا جديدا لجدار الصدر غير المتجانس في كتلة ، والغدة الصعترية ، وزرع القلب في الفئران باستخدام تقنية الكفة العنقية غير الخياطة.

A المجهرية نموذج رواية لمنتبذ، جناح كتلة جدار الصدر، الغدة الصعترية، وزرع القلب في الفئران

هذا النموذج رواية للهند مثلي زرع الأطراف الاصطناعية في الماوس، وتطبيق تقنية صفعة غير خياطة لمفاغرة فائقة الاوعية الدموية الدقيقة، ويوفر أداة قوية لفي الجسم الحي الأبحاث المناعية الآلية المتعلقة زرع الطعم الخيفي مركب أوعية دموية (VCA).

مثلي هند الاطراف زرع في ماوس

الفئران كامل سمك زرع الجلد هو نموذج راسخة لدراسة الرفض في مكان منيع للمستضد الخيفي. هنا، ونحن نقدم البرنامج التعليمي كل خطوة تشارك في أداء BALB / ج -&gt; C57BL / 6 زرع الجلد كامل سماكة.

الفئران كامل سماكة الجلد زراعة

هنا ، يتم تقديم بروتوكول خطوه بخطوه لاعداد وزراعه الخنازير الانقسام أزرار القرنية. كما يظهر هذا النموذج العضوي المزروع عاده معدلات وفيات الخلايا في غضون 15 يوما ، مقارنه بالقرنيات المتبرعة البشرية ، فانه يمثل النموذج الأول الذي يسمح للزراعة طويلة الأجل من القرنيات غير البشرية دون أضافه السامة ديكسان.

نموذج ثقافة الجهاز البطانية القرنية الخنازير باستخدام أزرار القرنية الانقسام

تصف هذه الورقة تقنية معدلة لزراعة القلب الوعائي غير المتجانس مع تقنية معقمة محدثة وتسكين الألم والتخدير.

بروتوكول معدل لزراعة القلب غير المتجانس للفأر يتوافق مع المعايير المعاصرة لتقنية التعقيم والتخدير وتسكين الألم

يقدم هذا البروتوكول نهجا عبر الصلبة موجها بالرؤية عبر الحدقة لتقديم الطعوم الخلوية تحت الشبكية بأمان ودقة ، مع معدل منخفض من المضاعفات الجراحية ، في متلقي الفئران مع أو بدون تنكس الشبكية.

زرع الطعوم تحت الشبكية الموجهة عبر الحدقة في نموذج فأر تنكس الشبكية

تؤسس هذه الدراسة نموذجين موحدين لزراعة الأعضاء الغريبة في الفأر لتكرار الرفض الخلوي الحاد والرفض الحاد بوساطة الأجسام المضادة بشكل محدد. تعمل هذه النماذج كمنصة موثوقة للتحقيق في آليات رفض المناعة بواسطة الزينوغرافت، وتقييم استراتيجيات مثبطة المناعة، وتعزيز أبحاث زراعة الأعضاء الغريبة قبل السريرية.

نموذج موحد للفئران مع سير عمل من ثلاثة أشخاص لدراسة الرفض الخلوي الحاد والوسيط بالأجسام المضادة في زراعة الأجسام الغريبة

يقدم هذا البروتوكول تقنية مبسطة للتجميل بالخياطة من طرف إلى جانب لزراعة قلب عنق الرحم في الفوار، مما يوفر نموذجا قويا وقابلا للتكرار لدراسة مناعة الزرع.

زراعة قلب الفأر غير المتجانس في عنق الرحم باستخدام تقنية التشريح من طرف إلى جانب لدراسة مناعة الزراعة

تعلم نموذج زراعة القرنية في الفئران لدراسة رفض الطعم القرني الحاد. يتيح هذا النموذج تقييم سلامة الطعم واختبار استراتيجيات علاجية متنوعة لتحسين نتائج الزراعة.

الفئران زرع القرنية: نموذج لدراسة الشكل الأكثر شيوعا من الصلبة زراعة الأعضاء

استكشف المزيد من الفيديوهات