الفئران التنظير ل في فيفو شفاء المتعدد الوسائط التصوير من التسرطن وتقييم المعوية والتهاب الجرح

في هذا الفيديو ، سيتم تقديم مجموعة متنوعة من التطبيقات من التنظير الداخلي للخلايا العصبية في التطبيق الأول. سيتم عرض كيفية استخدام المنظار الداخلي لتسجيل شدة المرض في نموذج فأر التهاب القولون في التطبيق الثاني. سيتم عرض استخدام التنظير الداخلي لمراقبة التئام الجروح المخاطية في الجسم الحي في التطبيق الأخير.

تقديم استخدام التنظير الداخلي الفلوري للكشف عن الأورام المعوية وتقنية الحقن داخل الغشاء المخاطي في نهاية المطاف التئام الجروح المعوية والالتهابات والسرطان. يمكن تقييم عدم التخلق بناء على نتائج التحليل بالمنظار. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل التحليل النسيجي لالتهاب القولون التجريبي ، هي أنه باستخدام هذه التقنية ، يمكنك إجراء فحوصات متابعة داخل الأفراد وتقييم التغيرات المخاطية بشكل متكرر.

لذلك ، يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال التهاب الأمعاء التجريبي ، مثل ما هو التأسيس الزمني لالتهاب القولون. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاج سرطان القولون والمستقيم بسبب إمكانية توصيف آفات الأورام وظيفيا. على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة لتطور سرطان القولون والمستقيم ، إلا أنه يمكن تطبيقها أيضا على أنظمة أخرى مثل مرض التهاب الأمعاء أو التهاب القولون المعدي.

بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة بسبب التحدي المتمثل في التعامل مع المنظار الداخلي الصغير المضاء. يوسع التنظير الداخلي إمكانات التنظير الضوئي الواسع للتصوير الجزيئي عن طريق استهداف محدد للهياكل الخلوية عن طريق آثار مصنفة بالفلورسنت أثناء فحوصات التنظير الداخلي. للحث على سرطان القولون والمستقيم في التجارب ، استخدم أولا حقنة سعة مليلتر واحد مزودة بإبرة قياس 30 لحقن 10 ملليغرام لكل كيلوغرام بين الصفاق طازجة مطفرات مثل أوكسي الميثان في كل فأر.

تحدى مجموعة الفئران التجريبية بدورات متكررة بنسبة 3٪ من الوزن لكل حجم ، أو ديكستران كبريتات الصوديوم أو DSS من اليوم صفر إلى 7 ، ومن 21 إلى 28 ، و 42 إلى 49 للحث على سرطان القولون والمستقيم المدفوع بالالتهابات. عدم التخلق تزويد الفئران بماء الأوتوكلاف بين التحديات في يوم تنظير القولون. بعد التأكد من التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم ، استخدم قنية بأزرار لغرس ملليلترين من حقنة شرجية سائلة في قولون تجريبي.

في حالة الاشتباه في تحميل البراز بشكل كبير ، فأثناء انتظار تغوط الفأر ، قم بتوصيل محطة عمل بيطرية بالمنظار للحيوانات الصغيرة بوحدة الكاميرا للتنظير الداخلي للضوء الأبيض. قم بتكوين إعدادات مصدر الضوء لإثارة الآثار المراد حقنها ، ثم قم بدمج مرشح تمرير النطاق المناسب بين التلسكوب والكاميرا. الآن ، ضع الماوس على طاولة الفحص وأدخل المنظار بعناية فائقة.

لتجنب الانثقاب ، افتح كلا الصمامين من الغمد. يجب توصيل صمام واحد بمضخة الهواء. يجب إغلاق الآخر بإصبع السبابة للتحكم في الهواء.

ثم قم بتضخيم القولون ببطء وحذر ، مع تقدم المنظار فقط حتى مثني القولون الأيمن لتجنب الانثقاب على بعد حوالي 4.5 سم من فتحة الشرج. الآن ، اسحب ببطء على المنظار الداخلي وافحص الغشاء المخاطي بحثا عن التغيرات الالتهابية أو الخبيثة ، ولتقييم محيط الأمعاء بالكامل. ثم لاسترداد عينة خزعة ، أدخل ملقط الخزعة بعناية من خلال قناة العمل حتى يظهر طرف الملقط على الشاشة.

افتح الملقط وأغلقه بعناية لتجنب الانثقاب ونقلها إلى موقع علم الأمراض. لتطبيق الغشاء المخاطي للعوامل الدوائية ، املأ مسبقا أنبوب حقن مرن بالكامل بالعامل المعني ، ثم ادفع الأنبوب عبر قناة العمل حتى تظهر القنية على الشاشة. ثم قم بتوصيل حقنة دقيقة وأدخل الإبرة في تحت الغشاء المخاطي بزاوية 15 إلى 30 درجة في مواجهة الشطبة في اتجاه الغشاء المخاطي ، قم بإدارة ما يصل إلى 50 ميكرولترا من العامل العلاجي برفق.

بعد الحقن الناجح ، سيظهر الغشاء المخاطي رفعا مميزا لإجراء التنظير الداخلي الفلوري ، وإدارة العامل المعني عن طريق الوريد قبل الفحص. تحقق من النقطة الزمنية المثلى بين حقن جهاز التتبع المسمى بالفلورسنت ، وإجراء التصوير ، والذي يعتمد على علم الأدوية للتتبع. ثم لعرض العامل المحقون بواسطة التنظير الداخلي الفلوري ، قم بتكوين إعدادات نظام مرشح تمرير النطاق وفقا للأطوال الموجية للإثارة والانبعاث للمتتبع المحقون.

أخيرا ، قم بتصوير الأنسجة بعد تطبيق المتتبع للحصول على قراءة نسبة الهدف إلى الخلفية بعد تحريض التهاب القولون. فئران. تظهر فقدان الوزن بدءا من اليوم الثالث مع فقدان أقصى لوزن الجسم بنسبة 19٪ يحدث في اليوم السابع وفقا لفقدان وزن الجسم. يزداد مؤشر التنظير الداخلي للخلايا العصبية لدرجة شدة التهاب القولون في اليوم السابع بعد بدء DSS في الإشارة إلى تلف التهابي هائل في الغشاء المخاطي للقولون ، والذي يتم تحسينه بحلول اليوم 13.

أيضا في اليوم السابع ، بعد بدء DSS ، يكون الضرر النسيجي أعلى بكثير في الفئران المعالجة ب DSS مقارنة بالضوابط كما ينعكس في التعرية الظهارية ، وتقرحات الغشاء المخاطي وزيادة تسلل العدلات ، وكلها تتحسن بشكل ملحوظ بحلول اليوم 13. في هذه الصور التمثيلية من التنظير الروتيني ، تم إحداث الجروح المخاطية ميكانيكيا عن طريق ملقط خزعة مصغر مع جرح قطره ملليمتر واحد. ثم تمت مراقبة الشفاء عن طريق الفحص اليومي بالمنظار وقياسه كميا عن طريق قياس منطقة الجرح المتبقية باستخدام برنامج تحرير الصور.

تم التعبير عن إغلاق منطقة الجرح الفردية بمرور الوقت بحاصل قسمة منطقة الجرح الفعلية لكل منطقة الجرح الأولية. على سبيل المثال ، بعد يوم ثالث من ظهور الجرح ، تم استرداد 41٪ من مساحة الجرح ، بينما في سبعة أيام ، تم التئام الجرح تماما. كالعادة ، في نهاية التجربة ، يمكن استئصال الجروح للتقييم النسيجي ، X vivo كما في هذه الصور التمثيلية للهيماتين وأسرة الجروح الملطخة ب ESN في اليوم صفر والخامس ، بعد حوالي 80 يوما من تحريض الورم بواسطة أوكسي الميثان وثلاث دورات من أورام القولون المتعددة DSS ، بالإضافة إلى العلامات العيانية للالتهاب المزمن مثل الغشاء المخاطي المحبب

التنظير الداخلي الفلوري لقناة الخلايا العصبية دون استخدام متتبع إلى عدم اكتشاف أي إشارة محددة ، ولا يلاحظ أي تفاعلات مع أنسجة القولون أو التألق الذاتي في البراز. في المقابل ، مباشرة بعد تطبيق فيتز ديكستران عن طريق الوريد ، يمكن ملاحظة الفلوروكروم في الغشاء المخاطي للقولون ويمكن استخدامه لتقييم الأوعية الدموية المتزايدة في مناطق الالتهاب المزمن أو الغشاء المخاطي الخبيث. وفقا لذلك ، يمكن استخدام القياس الكمي لكثافة التألق لقياس الزيادة الكبيرة في امتصاص الفلوروكروم داخل الأنسجة الخبيثة مقارنة بالغشاء المخاطي للقولون غير المصاب.

بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في غضون خمس إلى 10 دقائق إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر تطوير المنظار الصلب بعناية عبر القولون البحري. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تقييم التئام الجروح الظهارية والتهاب الأمعاء وعدم تكوين السرطان أثناء إجراء تنظير القولون البحري.