العزلة وثقافة فصل الخلايا العصبية الحسية من الفرخ الأجنة

الهدف العام من هذا الإجراء هو استزراع مجموعة غنية من الخلايا العصبية الحسية الأولية المنفصلة عن أجنة الدجاج. يتم تحقيق ذلك عن طريق جمع العقد الجذرية الظهرية السليمة من اليوم الجنيني ، من سبعة إلى 10 أجنة دجاج في أنبوب مخروطي الشكل ، ثم تقسيمها لاحقا إلى معلق الخلية المنفصل. كخطوة ثانية منفصلة ، يتم طلاء خلايا DRG على طبق مزرعة للحضانة.

بعد ذلك ، يتم شطف طبق الثقافة برفق لإزاحة الخلايا العصبية بشكل تفضيلي. تتضمن الخطوة الأخيرة طلاء الخلايا العصبية الحسية المنفصلة على الطبقات التحتية المحددة جيدا ، مثل زلات الغطاء المغسولة بالحمض والمخبوزة المشفرة مسبقا بتركيزات عالية أو منخفضة من اللامينين. يتم استخدام كيمياء سيتو مناعية واحدة لإظهار وجود NCA وتنشيط بيتا واحد في أجسام الخلايا والعصبيات ومخاريط النمو للخلايا العصبية الحسية للكتكوت الجنينية المنفصلة.