Name: التعامل مع الفأر القطن في الدراسات لتقييم ما قبل السريرية من حال الورم الفيروسات (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: تعلم طريقة آمنة للتعامل مع فئران القطن لتقليل الإجهاد أثناء الدراسات السريرية. تستخدم هذه التقنية أنبوب إثراء وسلة فولاذية لنقل الحيوان بأمان إلى غرفة التخدير.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Breanne Cuddington حاصلة على زمالة من المؤسسة الكندية لسرطان الثدي. تمت رعاية هذا العمل من خلال منح تشغيلية من جمعية أبحاث السرطان ومعهد أبحاث جمعية السرطان الكندية (التحالف الكندي لأبحاث سرطان الثدي سابقا). نشكر آن تولفسون (كلية الطب بجامعة سانت لويس) على خلايا LCRT والدكتورة كاثلين ديلاني وماريون كوريك على المساعدة الفنية في إسكان الفئران القطنية والتخدير.

<ol><li>Cervantes-Garcia, D., Ortiz-Lopez, R., Mayek-Perez, N., Rojas-Martinez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+virotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Oncolytic virotherapy.</a> Ann Hepatol. 7 (1), 34-45 (2008).</li>
<li>Vaha-Koskela, M. J., Heikkila, J. E., Hinkkanen, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+viruses+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Oncolytic viruses in cancer therapy.</a> Cancer Lett. 254 (2), 178-216 (2007).</li>
<li>Abril, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Both+viral+and+host+factors+contribute+to+neurovirulence+of+bovine+herpesviruses+1+and+5+in+interferon+receptor-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Both viral and host factors contribute to neurovirulence of bovine herpesviruses 1 and 5 in interferon receptor-deficient mice.</a> J Virol. 78 (7), 3644-3653 (2004).</li>
<li>Nakamichi, K., Matsumoto, Y., Otsuka, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defective+infection+of+bovine+herpesvirus+1+in+non-permissive+murine+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Defective infection of bovine herpesvirus 1 in non-permissive murine cells.</a> J Vet Med Sci. 63 (10), 1139-1142 (2001).</li>
<li>Boukhvalova, M. S., Blanco, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cotton+rat+sigmodon+hispidus+model+of+respiratory+syncytial+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Microbiol+Immunol%22%5BJournal%5D)">The cotton rat sigmodon hispidus model of respiratory syncytial virus infection.</a> Curr Top Microbiol Immunol. 372, 347-358 (2013).</li>
<li>Papp, Z., Babiuk, L. A., Baca-Estrada, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+immunity+in+the+respiratory+tract+and+protection+from+bovine+herpesvirus+type+1+infection+by+different+routes+of+immunization+with+recombinant+adenovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Viral+Immunol%22%5BJournal%5D)">Induction of immunity in the respiratory tract and protection from bovine herpesvirus type 1 infection by different routes of immunization with recombinant adenovirus.</a> Viral Immunol. 11 (2), 79-91 (1998).</li>
<li>Hughes, T. C. R., Lilley, C. E., Ponce, R., Kaufman, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+analysis+of+an+oncolytic+herpesvirus+encoding+granulocyte-macrophage+colony+stimulating+factor+for+the+treatment+of+malignant+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oncolytic+Virotherapy%22%5BJournal%5D)">Critical analysis of an oncolytic herpesvirus encoding granulocyte-macrophage colony stimulating factor for the treatment of malignant melanoma.</a> Journal of Oncolytic Virotherapy. 3, 11-20 (2014).</li>
<li>Jones, C., Chowdhury, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+biology+of+bovine+herpesvirus+type+1+%28BHV-1%29%2C+its+role+as+a+cofactor+in+the+bovine+respiratory+disease+complex+and+development+of+improved+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Health+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">A review of the biology of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), its role as a cofactor in the bovine respiratory disease complex and development of improved vaccines.</a> Anim Health Res Rev. 8 (2), 187-205 (2007).</li>
<li>Jones, C., Chowdhury, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bovine+herpesvirus+type+1+%28BHV-1%29+is+an+important+cofactor+in+the+bovine+respiratory+disease+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Clin+North+Am+Food+Anim+Pract%22%5BJournal%5D)">Bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) is an important cofactor in the bovine respiratory disease complex.</a> Vet Clin North Am Food Anim Pract. 26 (2), 303-321 (2010).</li>
<li>Hushur, O., Takashima, Y., Matsumoto, Y., Otsuka, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restriction+of+bovine+herpesvirus+1+%28BHV-1%29+growth+in+non-permissive+cells+beyond+the+expression+of+immediate+early+genes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Restriction of bovine herpesvirus 1 (BHV-1) growth in non-permissive cells beyond the expression of immediate early genes.</a> J Vet Med Sci. 66 (4), 453-455 (2004).</li>
<li>Cuddington, B. P., Dyer, A. L., Workenhe, S. T., Mossman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+bovine+herpesvirus+type+1+infects+and+kills+breast+tumor+cells+and+breast+cancer-initiating+cells+irrespective+of+tumor+subtype%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Oncolytic bovine herpesvirus type 1 infects and kills breast tumor cells and breast cancer-initiating cells irrespective of tumor subtype.</a> Cancer Gene Ther. 20 (5), 282-289 (2013).</li>
<li>Cuddington, B. P., Mossman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permissiveness+of+Human+Cancer+Cells+to+Oncolytic+Bovine+Herpesvirus+1+Is+Mediated+in+Part+by+KRAS+Activity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Permissiveness of Human Cancer Cells to Oncolytic Bovine Herpesvirus 1 Is Mediated in Part by KRAS Activity.</a> J Virol. 88 (12), 6885-6895 (2014).</li>
<li>Small, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phase+I+trial+of+intravenous+CG7870%2C+a+replication-selective%2C+prostate-specific+antigen-targeted+oncolytic+adenovirus%2C+for+the+treatment+of+hormone-refractory%2C+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">A phase I trial of intravenous CG7870, a replication-selective, prostate-specific antigen-targeted oncolytic adenovirus, for the treatment of hormone-refractory, metastatic prostate cancer.</a> Mol Ther. 14 (1), 107-117 (2006).</li>
<li>Freytag, S. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+I+study+of+replication-competent+adenovirus-mediated+double+suicide+gene+therapy+for+the+treatment+of+locally+recurrent+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Phase I study of replication-competent adenovirus-mediated double suicide gene therapy for the treatment of locally recurrent prostate cancer.</a> Cancer Res. 62 (17), 4968-4976 (2002).</li>
<li>Benjamin, R., Helman, L., Meyers, P., Reaman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phase+I%2FII+dose+escalation+and+activity+study+of+intravenous+injections+of+OCaP1+for+subjects+with+refractory+osteosarcoma+metastatic+to+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">A phase I/II dose escalation and activity study of intravenous injections of OCaP1 for subjects with refractory osteosarcoma metastatic to lung.</a> Hum Gene Ther. 12 (12), 1591-1593 (2001).</li>
<li>Prince, G. A. The Cotton Rat in Biomedical Research. Animal Welfare Information Center Newsletter. 5 (2), Available from:
 
 <a target="_blank" href="http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm">http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm</a> 3-5 (1994).</li>
<li>Tsai, J. C., Garlinghouse, G., McDonnell, P. J., Trousdale, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+animal+model+of+adenovirus-induced+ocular+disease.+The+cotton+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">An experimental animal model of adenovirus-induced ocular disease. The cotton rat.</a> Arch Ophthalmol. 110 (8), 1167-1170 (1992).</li>
<li>Ginsberg, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+investigating+the+molecular+pathogenesis+of+adenovirus+pneumonia%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A mouse model for investigating the molecular pathogenesis of adenovirus pneumonia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (5), 1651-1655 (1991).</li>
<li>Russell, S. J., Peng, K. W., Bell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+virotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Oncolytic virotherapy.</a> Nat Biotechnol. 30 (7), 658-670 (2012).</li>
<li>Mossman, K. L., Saffran, H. A., Smiley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herpes+simplex+virus+ICP0+mutants+are+hypersensitive+to+interferon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Herpes simplex virus ICP0 mutants are hypersensitive to interferon.</a> J Virol. 74 (4), 2052-2056 (2000).</li>
<li>Mossman, K. L., Smiley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herpes+simplex+virus+ICP0+and+ICP34.5+counteract+distinct+interferon-induced+barriers+to+virus+replication%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Herpes simplex virus ICP0 and ICP34.5 counteract distinct interferon-induced barriers to virus replication.</a> J Virol. 76 (4), 1995-1998 (2002).</li>
<li>Hummel, J. L., Safroneeva, E., Mossman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ICP0-Null+HSV-1+and+interferon+signaling+defects+in+the+effective+treatment+of+breast+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">The role of ICP0-Null HSV-1 and interferon signaling defects in the effective treatment of breast adenocarcinoma.</a> Mol Ther. 12 (6), 1101-1110 (2005).</li>
<li>Papp, Z., Middleton, D. M., Mittal, S. K., Babiuk, L. A., Baca-Estrada, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+immunization+with+recombinant+adenoviruses%3A+induction+of+immunity+and+protection+of+cotton+rats+against+respiratory+bovine+herpesvirus+type+1+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gen+Virol%22%5BJournal%5D)">Mucosal immunization with recombinant adenoviruses: induction of immunity and protection of cotton rats against respiratory bovine herpesvirus type 1 infection.</a> J Gen Virol. 78 (11), 2933-2943 (1997).</li>
<li>Papp, Z., Babiuk, L. A., Baca-Estrada, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pre-existing+adenovirus-specific+immunity+on+immune+responses+induced+by+recombinant+adenovirus+expressing+glycoprotein+D+of+bovine+herpesvirus+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">The effect of pre-existing adenovirus-specific immunity on immune responses induced by recombinant adenovirus expressing glycoprotein D of bovine herpesvirus type 1.</a> Vaccine. 17 (7-8), 933-943 (1999).</li>
<li>Mittal, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+systemic+and+mucosal+immune+responses+in+cotton+rats+immunized+with+human+adenovirus+type+5+recombinants+expressing+the+full+and+truncated+forms+of+bovine+herpesvirus+type+1+glycoprotein+gD%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Induction of systemic and mucosal immune responses in cotton rats immunized with human adenovirus type 5 recombinants expressing the full and truncated forms of bovine herpesvirus type 1 glycoprotein gD.</a> Virology. 222 (2), 299-309 (1996).</li>
<li>Steel, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syngeneic+Cotton+Rat+Cancer+Model+for+Replicating+Adenoviral+Vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Syngeneic Cotton Rat Cancer Model for Replicating Adenoviral Vectors.</a> Molecular Therapy. 13 (1), 123(2006).</li>
<li>Toth, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cotton+rat+tumor+model+for+the+evaluation+of+oncolytic+adenoviruses%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Cotton rat tumor model for the evaluation of oncolytic adenoviruses.</a> Hum Gene Ther. 16 (1), 139-146 (2005).</li>
<li>Toth, K., Spencer, J. F., Wold, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunocompetent%2C+semi-permissive+cotton+rat+tumor+model+for+the+evaluation+of+oncolytic+adenoviruses%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Immunocompetent, semi-permissive cotton rat tumor model for the evaluation of oncolytic adenoviruses.</a> Methods Mol Med. 130, 157-168 (2007).</li>
<li>Steel, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunocompetent+syngeneic+cotton+rat+tumor+models+for+the+assessment+of+replication-competent+oncolytic+adenovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Immunocompetent syngeneic cotton rat tumor models for the assessment of replication-competent oncolytic adenovirus.</a> Virology. 369 (1), 131-142 (2007).</li>
<li>Workenhe, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunogenic+HSV-mediated+oncolysis+shapes+the+antitumor+immune+response+and+contributes+to+therapeutic+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Immunogenic HSV-mediated oncolysis shapes the antitumor immune response and contributes to therapeutic efficacy.</a> Mol Ther. 22 (1), 123-131 (2014).</li>
<li>Sobol, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+antiviral+immunity+is+a+determinant+of+the+therapeutic+success+of+oncolytic+virotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Adaptive antiviral immunity is a determinant of the therapeutic success of oncolytic virotherapy.</a> Mol Ther. 19 (2), 335-344 (2011).</li>
<li>Prince, G. A. The Cotton Rat in Biomedical Research. Animal Welfare Information Center Newsletter. 5 (2), 
 
 <a target="_blank" href="http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm">http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm</a> (1994).</li>
</ol>

يقر المؤلفون بعدم وجود تضارب مالي في المصالح يتعلق بهذا البحث.

الفئران القطنية مثيرة للغاية ولها استجابة طيران قوية. لذلك ، يجب توخي الحذر بشكل خاص لتقليل أي ضغط لا داعي له على. سيسمح إعداد القفص الموصوف بالقبض الآمن والسهل على ، مع وضع أنبوب التخصيب له أهمية قصوى. عند إعداد الأقفاص ، تأكد من أن أنابيب التخصيب تلبي متطلبات الحجم والشكل ، ويتم وضعها في الاتجاه الصحيح في القفص. من المهم أيضا التأكد من إبلاغ أي فنيين قد يساعدون في صيانة بالمتطلبات المحددة للسكن. سيؤدي اتخاذ هذه الاحتياطات إلى تقليل هياج قبل تنفيذ الإجراءات. ينصح أيضا بتنفيذ الإجراءات في الصباح ، قبل أي تعامل من قبل الف...

الفيروسات حال الورم (OV) تكرار انتقائي في الخلايا السرطانية من خلال استغلال الاختلافات البيوكيميائية بين الخلايا الطبيعية والسرطانية 1،2. هناك نوعان من OVS: تلك التي لا تحتاج إلى طفرة لتحقيق انحلال الورم انتقائية، ويشار إلى الفيروسات التي تحدث بشكل طبيعي من النوع البري وتلك التي يجب أن هندستها لتحقيق انحلال الورم انتقائي. جمع الطفرات ضمن نوع الورم نظرا يحدد طبيعة ميزة النمو انتقائية على الخلايا الطبيعية لOV 2. وقد تجلى سلامة والاستفادة من استخدام OVS في التجارب السريرية 3-7. وعلى الرغم من التقدم في مجال علاج بالفيروسات حال الورم توجد الفجوات بين النتائج ما قبل السريرية والسريرية، مما يوحي بأن هناك حاجة إلى نماذج أفضل لتقييم فعالية مضادة للورم من OVS. البقري نوع هربس 1 (BHV-1) هو عضو في عائلة فيروسات هربسية، وAlphaherpesviridae فصيلة. BHV-1 initiآتش البقري مجمع أمراض الجهاز التنفسي في الماشية، ويظهر في مجموعة متنوعة واسعة من أعراض تشبه نزلة برد 8،9. BHV-1 يربط مرفق ودخول مستقبلات يستخدمها HSV-1، مثل كبريتات heparan وnectin-1 10. ومع ذلك، فإنه يربط CD155 في مكان nectin-2 10. BHV-1 لديها مجموعة والمضيف ضيق جدا بحيث أنه غير قادر على الدخول بكفاءة وبدء النسخ المتماثل في الخلايا الطبيعية وتحويلها الفئران 3،4،10. وهذا يجعل من استخدام نماذج الفئران التقليدية إشكالية. وقد تجلى القدرة حال الورم من BHV-1 في المختبر 11،12. وقد تبين BHV-1 لبدء النسخ المتماثل في وقتل الخلايا السرطانية البشرية من مجموعة متنوعة من أصول النسيجية، بما في ذلك خلايا سرطان الثدي وسرطان الثدي الشروع في الخلايا 11،12. ومع ذلك، يجب تقييم القدرة انتيتومور من BHV-1 في الجسم الحي في سياق مضيف مناعيا. اتش الإنسان (الإعلان)، والتيهناك 57 الأنماط المصلية التي تم تحديدها، تتسبب الأكثر شيوعا أمراض الجهاز التنفسي لدى البشر. تم تقييم ناقلات الإعلان حال الورم لفعالية مضادة للورم مع العديد التقدم في التجارب السريرية 13-15. وعلى الرغم من بيانات ما قبل السريرية واعدة، وتراجعت النتائج السريرية قصيرة من التوقعات. وعادة ما يتم استخدام نماذج طعم أجنبي الورم البشري لدراسة فعالية مضادة للورم من ناقلات الإعلان، على الرغم من أنها تظهر الموهن الاستجابات المناعية للفيروس 16،17. وعلاوة على ذلك، ونماذج الفئران مسانج غير قابلة للمتساهلة للإصابة الإعلان، مما يجعل تقييم المضيف الاستجابات المناعية باستخدام هذه النماذج غير عملي 17،18. تم التعرف على الجهاز المناعي المضيف كآلية الأكثر تأثيرا التي OVS يثير ورم الخلايا الموت 19. ردود انتيتومور بين tolerized وغير tolerized مستضد المرتبطة الورم (TAA) نماذج تختلف ويمكن أن تؤثر بشكل كبير على نجاح العلاج OV. وHSV-1 OV KM100 (ICP0 n212VP16 في عام 1814 20) 20،21 أثار الورم الانحدار في 80٪ من الفئران الحاملة للورم في الفئران التورام الأوسط T مستضد نموذج سرطان الثدي 22. ومع ذلك، في HER-2 نماذج / NEU، وفعالية مضادة للورم من KM100 تنوعت بين الانحدار الكامل 20٪ في الفئران مسانج وورم في ركود المعدلة وراثيا والفئران HER2 tolerized. معا هذه البيانات تبرز أهمية تقييم كامل OVS باستخدام نماذج حيوانية أن ألخص أفضل المشهد المناعة البشري أن نفهم تماما ما هي الميزات تحديد النجاح العلاجي. يتم استخدام الفئران القطن (Sigmodon hispidus)، السكان الأصليين لأمريكا الشمالية والجنوبية، والأكثر شيوعا كنموذج للعدوى فيروس الجهاز التنفسي المخلوي (كما استعرض في 5). وتستخدم الفئران القطن أيضا في مجال البحوث لمكافحة BHV-1 التطعيم لأنها تلخيص علم الأمراض المرتبطة بأمراض الجهاز التنفسي البقري معقدة 6،23. وعلاوة على ذلك، BHV-1 إصابة الفئران القطنيولد مناعة، الأمر الذي أدى المخاطية المستدام والاستجابات المناعية الجهازية 6،23-25. وقد استمدت خطوط الخلايا من يفية عفوية وosteosarcomas من الغدة الثديية (LCRT) والعظام (CCRT وVCRT)، على التوالي 26. وقد استخدمت الفئران القطن لتقييم فعالية في الجسم الحي من ناقلات الإعلان حال الورم كما هي عرضة للإصابة الإعلان ويحمل علم أمراض مماثلة على البشر 27-29. استخدام نماذج المناعة لتقييم ما قبل السريرية من OVS ليسوا سوى أقل يدل على الردود السريرية للعلاج لكنها لا تأخذ في الاعتبار دور الجهاز المناعي في علاج بالفيروسات حال الورم 30،31. ولذلك، فإن مسانج ونماذج الفئران القطن tolerized ورم سرطان الثدي وعظمية والنماذج ذات الصلة التي لتقييم فعالية ما قبل السريرية من OVS، مثل BHV-1 والإعلان التي لا يمكن دراستها باستخدام نماذج الفئران التقليدية.

<table><tbody><tr><td>دولبيكو s النسر المعدل s متوسط&nbsp;</td><td>قد تستخدم Gibco</td><td>11965-092</td><td>أي علامة تجارية&nbsp;</td></tr><tr><td>1X محلول ملحي مخزن بالفوسفات &nbsp ؛</td><td></td><td></td><td>يمكن تحضيره في المختبر ، وتصفية لتعقيم</td></tr><tr><td>200 ملي ل-جلوتامين</td><td>جيبكو</td><td>25030164</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>100x مضاد حيوي مضاد للفطريات &nbsp ؛</td><td>قد تستخدم Gibco</td><td>15240-062</td><td>أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>مصل الأبقار الجنيني</td><td>Quality Biological Inc.</td><td>110-001-101HI</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>T-150cm2 قارورة زراعة الأنسجة</td><td>فيشر Scientific</td><td>14-826-80</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>1X TypLE Express</td><td>Life Technologies</td><td>12604-013</td><td></td></tr><tr><td>لوحة زراعة الخلايا ذات 12 بئر ، قاع مسطح</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-772-29</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية ، يجب أن تكون معالجة زراعة الأنسجة</td></tr><tr><td>alamarBlue</td><td>Life تقنيات</td><td>DAL1025</td><td>قد تستخدم كاشفا بديلا لتحديد صلاحية الخلية</td></tr><tr><td>8640 Teklad 22/5 نظام غذائي القوارض</td><td>Harlan & nbsp ؛</td><td>8640</td><td></td></tr><tr><td>1/8 "ذرة كوز الفراش قوارض</td><td>هارلان</td><td>7092</td><td></td></tr><tr><td>نستليتس</td><td>أنكار</td><td>-</td> <td>مصنوعة من ألياف القطن البكر ، خالية من الغبار وقابلة للتعقيم</td></tr><tr><td>50 مل أنابيب مخروطية</td><td>فيشر Scientific</td><td>14-432-22</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية ، يجب أن تكون معقمة</td></tr><tr><td>Isoflurane USP ، 99.9٪ ، التخدير بالاستنشاق</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td>M60302</td><td></td></tr><tr><td>70٪ إيثانول</td><td></td><td></td><td>يمكن تحضيره في المختبر</td></tr><tr><td>10٪ فورمالين محايد</td><td>مخزن سيجما ألدريتش</td><td>HT501128</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>NAPCO NapFlow 1200 Class II A / B3 خزانة السلامة الميكروبيولوجية للسلامة الحيوية (غطاء لزراعة الخلايا)</td> نموذج <td>NAPCO</td><td>المستخدم غير متوفر حاليا</td><td>قد يستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>Thermo Fisher Scientific Precision Heated Water Bath</td><td>Fisher </td><td>النموذج العلمي المستخدم غير متوفر حاليا&nbsp;</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td colspan = "4" > [header]</td></tr> <tr><td>Reichert Bright-line Hemacytometer</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z359629</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>Typhoon Trio BioAnalyzer &nbsp ؛</td>نموذج <td>علوم الحياة للرعاية الصحية من جنرال إلكتريك</td><td>غير متوفر حاليا&nbsp;</td><td>قد تستخدم أي قارئ لوحة مضان</td></tr><tr><td>Tecan Safire2 Multi-Detection Microplate Reader</td><td>Tecan</td><td>Model المستخدمة غير متوفرة حاليا&nbsp;</td><td>قد تستخدم أي قارئ لوحة مضان</td></tr><tr><td>قد تستخدم أجهزة الطرد المركزي Allegra 6R</td><td>Beckman Coulter</td><td>366816</td><td>أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>لآلة التخدير</td><td>VetEquip</td><td>المستخدمة غير متوفرة حاليا.</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية ، يجب أن تكون محمولة</td></tr><tr><td>يمكن استخدام محاقن الأنسولين الصغيرة من</td><td>Wahl</td><td></td> أي <td>نوع من المقصات الصغيرة</td></tr><tr><td>محاقن الأنسولين 29 جم × 1/2 بوصة ، 0.3 مل</td><td>دينار بحريني</td><td>329464</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية. يوصى باستخدام محاقن الأنسولين لأنها تجعل الحقن أسهل من خلال الفئران' s بشرة قاسية.&nbsp;</td></tr><tr><td>مسحات قطنية</td><td>MedPro</td><td>018-425</td><td>قد تستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>مقص تشريح حاد مدبب</td><td>فيشر Scientific</td><td>8940</td><td>قد يستخدم أي علامة تجارية</td></tr><tr><td>ملقط الأنسجة التشريح</td><td>فيشر Scientific</td><td>13-812-41</td><td>قد يستخدم أي علامة تجارية</td></tr></tbody></table>

التعامل مع الفأر القطن في الدراسات لتقييم ما قبل السريرية من حال الورم الفيروسات

Handling of the Cotton Rat in Studies for the Pre-clinical Evaluation of Oncolytic Viruses

فيروسات حال للأورام هي علاج جديد مضاد للسرطان مع القدرة على استهداف الخلايا السرطانية ، مع ترك الخلايا السليمة سليمة. لكي تنجح هذه الاستراتيجية ، أظهرت الدراسات الحديثة أن مشاركة الجهاز المناعي المضيف أمر ضروري. لذلك ، يجب تقييم العلاج الفيروسي المحلل للأورام في سياق نموذج ذو كفاءة مناعية. علاوة على ذلك ، فإن دراسة العلاجات المضادة للأورام في النماذج الحيوانية المتسامحة قد تلخص بشكل أفضل النتائج التي شوهدت في التجارب السريرية. تعتبر الفئران القطنية ، التي يشيع استخدامها لدراسة فيروسات الجهاز التنفسي ، نموذجا جذابا لدراسة العلاج الفيروسي المحلل للأورام حيث أن النماذج التركيبية لسرطان الثدي والساركوما العظمية راسخة. ومع ذلك ، هناك نقص في المعلومات المنشورة حول إجراءات المناولة المناسبة لهذه القوارض شديدة الإثارة. يقلل نهج المناولة والالتقاط الموضح من إجهاد لتسهيل التجارب. تتوقف هذه التقنية على قدرة الباحث على الحفاظ على الهدوء أثناء التعامل وتنفيذ الإجراءات في الوقت المناسب. أخيرا ، نصف كيفية تحضير الخلايا السرطانية الثديية للفئران القطنية لتكوين ورم تحت الجلد بشكل متسق ، وكيفية إجراء الحقن داخل الورم وداخل الصفاق. يمكن تطبيق هذه الطرق على مجموعة واسعة من الدراسات التي تعزز تطوير فأر القطن كنموذج ما قبل السريري ذي الصلة لدراسة العلاج المضاد للأورام.

ونظرا لطبيعة منفعل للغاية من الفئران القطن، ويجري على دراية والاستفادة من إجراءات الأمثل للحد من وطأة هذه الحيوانات سوف سهولة في استخدامها كنموذج حيوان ما قبل السريرية. واستخدام التقنيات السليمة للتعامل معها تقليل خطر أيضا للباحث. عند استخدام الفئران القطن لا بد من الهدوء. الفئران هي منفعل للغاية وسوف تحاول الهرب قفص بهم. استخدام أنبوب التخصيب وnestlets سيقلل محاولات الهروب الشكل 2 يوضح الأمثل ال...

الفئران القطنية متحمسة للغاية ولديها استجابة قوية للطيران أو القتال. تم وصف طريقة المناولة المحسنة لتقليل إجهاد مما يجعل الوصول إلى فئران القطن أكثر سهولة كنموذج قبل السريري.

Oncolytic viruses are a novel anticancer therapy with the ability to target tumor cells, while leaving healthy cells intact.  For this strategy to be ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو إثبات التعامل الآمن مع فئران القطن والتقاطها باستخدام طريقة محددة تهدف إلى تقليل الإجهاد الذي يعاني منه. يتم تحقيق ذلك عن طريق وضع أنبوب تخصيب أولا في نهاية قفص الفئران وسلة فولاذية قابلة للتأمين في الأعلى. في الخطوة الثانية ، يتم فجر المعدات الشخصية الواقية المناسبة ويسمح للشقي القطني بالزحف إلى أنبوب التخصيب.ثم يتم تثبيت الأنبوب على جانب القفص ويتم نقل المحاصر بسرعة إلى وعاء بلاستيكي به فتحات هواء لنقله إلى غرفة تحريض التخدير. في الخطوة الأخيرة ، يتم وضع مخروط أنف خاص مجهز خصيصا لخطم القطن على لتسهيل التخدير الكامل. في النهاية ، يمكن استخدام إجراء الالتقاط هذا للتعامل بأمان مع النقانق القطنية بطريقة تقلل من إجهادها وتزيد من سلامتها.عند استخدام هذه القوارض شديدة الإثارة في الدراسات قبل السريرية ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة بشكل عام بسبب التناقضات في الأدبيات المتعلقة بالتعامل مع فأر القطن وإسكانه وسلوكه. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية لتكمل الحسابات المكتوبة لإعداد الباحثين للتحديات السلوكية في العمل مع فئران القطن. سيتم توضيح الإجراء بريان كاتنغتون ، طالبة دراسات عليا ، وميغان إيه ، زميلة ما بعد الدكتوراه من مختبري لتقليل القتال ، إيواء الفئران القطنية بشكل فردي في أقفاص رف من البولي كربونات تحتوي على فراش كوز الذرة بحجم ثامن بوصة ، وقسم من الأنابيب البلاستيكية لا يزيد عن ثماني بوصات ، وnestlets للتخصيب للسماح بالقبض الآمن والسهل على.ضع أنبوب التخصيب في نهاية القفص ثم ضع سلة قديمة قابلة للتأمين فوق الجزء العلوي من القفص تحتوي على طعام القوارض وزجاجة ماء. الآن اجمع حاوية بلاستيكية كبيرة وشفافة بها فتحات للهواء وغطاء وغرفة تحريض مخدرة ، كبيرة بما يكفي لتناسب الحاوية ومخروط أنف مثبت على خرطوم إخراج الغاز. لاحظ أن شقي القطن له أنف ممدود يتطلب شكلا مختلفا لتوصيل غاز التخدير كما هو موضح في هذه الصورة لمخروط الأنف ، المصمم ليناسب فأر قطني يعمل بشكل صحيح في أزواج.يجب على الباحثين ارتداء قفازات جلدية سميكة للحماية أثناء جميع أجزاء الإجراء. عندما يكون كلا الباحثين جاهزين ، ضع قفص على سطح مستو وقم بإزالة الغطاء الخارجي. ثم عندما يكون داخل أنبوب التخصيب ، ارفع صينية التغذية الفولاذية برفق وقم بمناورة الأنبوب ببطء حتى يصبح موازيا لجوانب القفص وعلى الظهر.بعد ذلك ، ارفع حافة الغطاء الفولاذي ببطء وبشكل متعمد عن أبعد ما يكون عن أنبوب التخصيب ، مع الحفاظ على الطرف الآخر على اتصال بالقفص. اطلب من الباحث الثاني إنشاء مساحة كبيرة بما يكفي للحاوية البلاستيكية. ثم في حركة واحدة سلسة وسريعة ، ادفع البلاستيك والحاوية أعلى أنبوب التخصيب.حافظ على ملامسة الحاوية مع جانب القفص الذي يحبس في الأنبوب. عند التعامل مع فئران القطن ، من المهم التحلي بالصبر واستخدام يد ثابتة لأن لديها استجابة قوية للطيران أو القتال ، وستحاول تجنب القبض عليها عن طريق الجري والقفز من القفص. إذا هرب ، فتجنب التعامل معه من الذيل.نظرا لأنه يمكن أن يحدث التفكك ، قم بإزالة صينية التغذية الفولاذية وإعطاء غطاء الحاوية البلاستيكية للباحث الآخر. ثم حرك الغطاء البلاستيكي بين جانب القفص والحاوية. مراعاة زوائد المحاصر في العملية وإغلاقها ، ولكن عدم إغلاقها ، تأكد من بقاء الحاوية مغلقة.انقل إلى غرفة الحث. ثم اطلب من باحث واحد وضع بسرعة في الغرفة وإزالة غطاء الحاوية بحركة سائلة واحدة بينما يفتح الآخر ويحل محل غطاء غرفة الحث على الفور. أخيرا ، بعد إعطاء التخدير ، أعد الجرذ إلى قفصه مع المراقبة حتى يستعيد القدرة الكاملة على الحركة والقص.يعد حقن الخلايا السرطانية القابلة للحياة أمرا مهما لتكوين الورم بشكل صحيح. في هذه الصورة ، تظهر طبقة أحادية صحية من خلايا LCRT التي يمكن تحضيرها للحقن في النقانق القطنية. في المقابل ، تتمتع خلايا LCRT هذه بقابلية منخفضة للحياة ولا ينبغي استخدامها للحقن.تنمو الأورام المتكونة من خلايا LCRT بسرعة ، ونتيجة لذلك ، غالبا ما تتشكل المراكز النخرية على هذا النحو ، ويجب مراقبة تكوين الورم بعناية لتجنب التقرح. في حالة حدوث تقرح ، يجب التضحية بالحيوان لتجنب العدوى والموت المحتمل من الإنتان. سيؤدي الحفاظ على سلامة أنسجة الورم بعد الاستئصال إلى الحصول على عينة تمثل تمثيلا أكثر دقة للورم في الجسم الحي.على سبيل المثال ، هنا ، تظهر تقنية الاستئصال التي يتم من خلالها فصل الورم بعناية عن الأنسجة المحيطة باستخدام مشرط وملاقط كما هو موضح في هذه الصورة النهائية. يتم الحفاظ على بنية الورم الكثيفة والأوعية الدموية للغاية من خلال تقنية الاستئصال هذه ، وهي مهمة لتحليل العلاجات التي تؤثر على الأوعية الدموية للورم. كما هو الحال مع العديد من فيروسات حال للأورام أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التزام الهدوء وتنفيذ كل خطوة ببطء وبشكل متعمد لتجنب إثارة فئران القطن.بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية التقاط فئران القطن والتعامل معها بأمان.

handling-cotton-rat-studies-for-pre-clinical-evaluation-oncolytic

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

تدخل الجيش الملكي النيبالي (رني) تمتلك مزايا عديدة أكثر من خروج المغلوب الجينات، واستخدمت على نطاق واسع باعتبارها أداة في دراسات الجينات الوظيفية. جعلت من اختراع تكنولوجيا الحمض النووي رني ناقلات القائم على المدى الطويل، ومحرض ضربة قاضية الجين ممكن، وزادت أيضا في جدوى إسكات...

الحمض النووي الريبي التدخل ناقلات القائم على دراسة وظيفة الجينات في سرطان

&lt; p class = "jove_content"&gt;يوضح الفيديو التوصيل الموضعي للفيروسات الحالة للأورام من خلال الحقن الشرياني الكبدي كنهج علاجي لسرطان الخلايا الكبدية. تتكاثر هذه الفيروسات بشكل انتقائي في الخلايا السرطانية ، مما يؤدي إلى تحلل الخلايا وإطلاق المستضدات المرتبطة بالخلايا السرطانية. تؤدي هذه العملية إلى موت الخلايا المناعية ، مما يؤدي إلى استجابة مضادة للورم.

استهداف أورام الكبد بفيروسات حال للأورام عبر الشريان الكبدي

يوضح هذا الفيديو إجراء حقن فيروسات فيروس نقص المناعة البشرية الخيالي في قشرة دماغ الفئران ، حيث يندمج الحمض النووي الريبي للفيروس في جينوم المضيف ، ويتكاثر وينتشر لإنشاء عدوى نشطة بفيروس نقص المناعة البشرية في النموذج التجريبي.

تحديد عدوى فيروس نقص المناعة البشرية النشطة في نموذج الفئران

يوضح هذا الفيديو عملية حقن ناقل فيروسي في مادة الفئران السوداء لنمذجة مرض باركنسون. يحدد خطوات تحضير الفئران ، والحقن الدقيق للناقل الفيروسي في المادة السوداء ، وإجراءات التعافي.

حقن ناقل فيروسي في مادة الفئران السوداء لنمذجة الأمراض التنكسية العصبية

يصف هذا البروتوكول كيفية إسكات النشاط العصبي مؤقتا وعن بعد في مناطق الدماغ المنفصلة أثناء مشاركة الفئران في مهام التعلم والذاكرة. يجمع النهج بين علم الوراثة الدوائية (Designer-Receptors-Exclusively-Activated-by-Designer-Drugs) مع النموذج السلوكي (التكييف الحسي) المصمم للتمييز بين المكونات المختلفة للتعلم.

A طريقة لإسكات العصبية عن بعد آخر في القوارض وخلال مراحل متقطعة التعلم

العلاجات الفيروسية الحالة للأورام قيد التطوير كعلاجات جديدة لعلاج سرطان الخلايا الكبدية (HCC).  نصف هنا طريقة للعلاج الموضعي لسرطان الكبد عن طريق إعطاء الشرايين الكبدية للفيروس حال للأورام.

إدارة Transarterial من حال الورم فيروسات للعلاج العلاج الموضعي من مثلي HCC في الجرذان

وتغطي الطرق لتسليم الجهاز العصبي المركزي على نطاق واسع جينات في الفئران. في هذا المثال، الغرض هو تقليد مرض الذي يؤثر على كامل الحبل الشوكي. يمكن استخدام تنبيغ على نطاق واسع لتقديم بروتين علاجي للجهاز العصبي المركزي من إدارة مرة واحدة، والأجهزة الطرفية.

طرق ونصائح للإدارة عن طريق الحقن الوريدي من الفيروسات المرتبطة بالغدد للفئران والتقييم لتوصيل الجهاز العصبي المركزي

هنا يمكننا وصف بروتوكول لاستخدام الفرز [رني] الفائق لكشف أهداف المضيف التي يمكن التلاعب بها لتعزيز العلاج الفيروسات أونكوليتيك، ويمكن على وجه التحديد رهابودفيروس واللقاحيه العلاج بالفيروسات، ولكن سهولة تكييفها للأخرى أونكوليتيك برامج الفيروسات أو لاكتشاف الجينات المضيفة التي تعدل النسخ المتماثل الفيروس عموما.

الفرز على نطاق الجينوم [رني] تحديد العوامل المضيفة التي تعدل علاج فيروس أونكوليتيك

ويصف هذا البروتوكول سير عمل مفصلة لتوليد والسابقين فيفو توصيف الفيروسات أونكوليتيك للتعبير عن إيمونومودولاتورس، باستخدام فيروسات الحصبة ترميز engagers خلية T بيسبيسيفيك كمثال. التطبيق والتكيف مع سائر المنابر ناقلات والمتسلسلات سيتم التعجيل بتنمية إيمونوفيروثيرابيوتيكس الرواية للترجمة السريرية.

باراميكسوفيروسيس لاستهداف الورم المرباة: التصميم والتقييم السابقين فيفو

لقد وضعنا بروتوكولا لتوليد وتقييم نموذج الماوس NOG المصاب بفيروس نقص المناعة البشرية الإنسان على أساس زرع الخلايا الجذعية، والتعرض لفيروس نقص المناعة البشرية داخل المهبل، وقطرات PCR RNA الرقمية التحديد الكمي.

أنسوية NOG الفئران للتعرض لفيروس نقص المناعة البشرية داخل المهبل وعلاج عدوى فيروس نقص المناعة البشرية

هنا، نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج فئران جديد للعدوى بفيروس نقص المناعة البشرية النشط باستخدام فيروس نقص المناعة البشرية (EcoHIV)، وهو أمر بالغ الأهمية لتعزيز فهمنا للخزانات الفيروسية لفيروس نقص المناعة البشرية-1 في الدماغ وتقديم نظام لدراسة الاضطرابات العصبية المعرفية المرتبطة بفيروس نقص المناعة البشرية والأمراض المصاحبة لها (أي تعاطي المخدرات).

نموذج الفئران من عدوى الدماغ EcoHIV

تعلم طريقة آمنة للتعامل مع فئران القطن لتقليل الإجهاد أثناء الدراسات السريرية. تستخدم هذه التقنية أنبوب إثراء وسلة فولاذية لنقل الحيوان بأمان إلى غرفة التخدير.

التعامل مع الفأر القطن في الدراسات لتقييم ما قبل السريرية من حال الورم الفيروسات

استكشف المزيد من الفيديوهات