تقنيات لمعالجة عيون مزروع مع الشبكية الأطراف الاصطناعية للالمترجمة تحليل المرضية: الجزء 2 فوق الشبكي يزرع مع الشبكية المسامير

الأطراف الاصطناعية للشبكية ذات المكونات المعدنية الصلبة غير متوافقة مع العمليات النسيجية التقليدية. نصف هنا تقنيات تقييم صحة العين المجاورة مباشرة لغرسة الشبكية المؤمنة فوق الشبكية باستخدام T.يتم تحقيق ذلك عن طريق نواة العين أولا وتثبيتها وفقا للبروتوكول الموضح في مقطع فيديو مصاحب ، ثم تشريح عينة من الأنسجة ، والتي تشمل الغرسة والشبكية T.الخطوة الثانية هي تجفيف عينة الأنسجة تدريجيا ثم تضمينها في راتنجات الايبوكسي في الاتجاه المطلوب باستخدام عملية تضمين بخطوتين. بعد ذلك ، يتم تثبيت كتلة الراتنج النهائية في حامل خاص وطحنها بشكل تدريجي حتى يتم الكشف عن مقطع عرضي عبر الغرسة وأنسجة العين المحيطة بها عند المستوى المطلوب.

الخطوة الأخيرة هي تلطيخ الأنسجة المكشوفة على السطح ، ثم التصوير والتصوير باستخدام مجهر تشريح عالي الطاقة لتصور البنية الخلوية المجاورة للطرف الاصطناعي المزروع. ثم تتكرر هذه الخطوات عدة مرات حسب الحاجة. في النهاية ، يتم جمع سلسلة من الصور المقطعية من خلال عينة الأنسجة ، بما في ذلك الغرسة في الموقع ، ويمكن استخدامها لتحسين تصميم الجهاز أو الجراحة ، وكذلك المساعدة في تقييم سلامة الطرف الاصطناعي المعين.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل أنسجة القطع التقليدية القائمة على الشفرة ، هي أن الأشياء المزروعة في القلب ، بما في ذلك المكونات المعدنية ، يمكن أن تظل في مكانها أثناء العملية ، مما يسمح بتصور واجهة أنسجة الزرع. يمكن لهذه الطريقة الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الأطراف الاصطناعية للشبكية ، مثل تقييم السلامة الهيكلية لأنسجة العين الرقيقة المجاورة لبدلة الشبكية المزروعة. بعد استئصال العين والتثبيت كما هو موضح في فيديو JoVE المصاحب ، تخيل الغرسة والنقطة التي يتم تثبيتها فيها خارج العين.

باستخدام شفرة 15 درجة. قم بعمل شق محيطي عبر القرنية وقم بإزالة غطاء القرنية للكشف عن مقلة العين من الداخل. لاحظ أنه تمت إزالة العدسة سابقا أثناء استئصال الزجاجية العدسية ، وهو جزء من الإجراء الجراحي لهذه الغرسة فوق الشبكية.

ثم قم بإدخال القزحية وأي ألياف Z متبقية من العدسة للكشف عن الغرفة الخلفية مع غرسة الشبكية وأنبوب المعدن T في الموقع. اعتمادا على الغرسة والدراسة التي يتم إجراؤها ، قم بإزالة المكونات الدخيلة قبل مزيد من التشريح. في المثال الحالي ، تتكون المصفوفة فوق الشبكية التي يتم تقييمها من نموذج أولي محكم وقطب كهربائي ماسي وحزمة إلكترونيات موجودة داخل حامل سيليكون مطابق.

قم بتشريح عينة بعناية تتضمن المسمار والأنسجة المحيطة به في الاتجاه المطلوب. استخدم مقص تشريح ناعم لقص شرائط كاملة السماكة من مؤخرة العين ، بما في ذلك الصلبة والمشيمية والشبكية. هنا استخرج بعناية حزمة القطب الكهربائي الماسي عن طريق التشريح الدقيق باستخدام المشرط.

اترك جسم السيليكون للغرسة مع مسمار الشبكية وبقايا الأسلاك البلاتينية. خذ عينة تعطي مقطعا عرضيا طوليا للمسمار يوضح جميع طبقات الشبكية المجاورة للمسمار. ثم أعد العينة إلى 70٪ الإيثانول.

تجفيف العينة على مدى ثلاثة أيام في مراحل الإيثانول التدريجية. أولا ، قم بتجفيف العينة في 70٪ من الإيثانول لمدة ساعتين ، مرتين. بعد ذلك ، قم بتجفيف العينة في 80٪ من الإيثانول لمدة ساعتين مرتين ، ثم بين عشية وضحاها في اليوم التالي تجفيف العينة بنسبة 90٪ من الإيثانول لمدة ساعتين مرتين ، واستمر في تجفيف العينة في 100٪ من الإيثانول لمدة ساعتين مرتين ، ثم بين عشية وضحاها.

أخيرا ، قم بتجفيف العينة في 100٪ الأسيتون لمدة ساعتين مرتين. قم بإزالة العينة من الأسيتون وراقبها تحت المجهر الضوئي لأنها تجف في الهواء في درجة حرارة الغرفة. تؤدي إزالة السائل من الأنسجة الرخوة إلى انهيار الخلايا وانكماشها.

سيتم نقل العينة إلى الايبوكسي قبل أن تبدأ في التجعد والانهيار. يتم تطوير تقدير وقت تجعيد الأنسجة وانهيار الأنسجة من خلال الخبرة. لتضمين العينة في راتنجات الايبوكسي الشفافة ، اغمر أنسجة العين في الايبوكسي المسال في وعاء مناسب قابل للغلق.

قم بإزالة الإيبوكسي برفق في غرفة مفرغة واتركه طوال الليل في درجة حرارة الغرفة للعلاج. احرص على تضمين العينة في الاتجاه المطلوب عن طريق تغيير حجم الإيبوكسي المعالج والعينة بمنشار حزامي وقصب الكتلة التي تم تغيير حجمها والتي تحتوي على أنسجة العين في إيبوكسي مسال طازج بحيث يتم توجيه المحور الطويل للمسمار بالتوازي مع قاع القالب. استخدم بقعة من الغراء الفائق لتأمين العينة التي تم تغيير حجمها في الجزء السفلي من حامل العينة.

املأ حامل العينة بالإيبوكسي المسال والديغا كما كان من قبل واتركه للعلاج طوال الليل. ثم قم بتركيب الراتنج في حامل عينة الطحن وطحن العينة يدويا عند 230 إلى 250 دورة في الدقيقة مع الماء باستخدام ورق كربيد السيليكون. للتلوين ، اغمس سطح الأرض في بقعة زرقاء لمدة ثلاث إلى خمس دقائق أو حتى تتطور البقعة.

بعد شطف العينة بماء الصنبور ، قم بتصوير سطح الأرض للعينة بتشريح طاقة أعلى. نطاق. لتصور الطبقات الخلوية لشبكية العين ، ضع قطرة من الماء المقطر على السطح العلوي للإيبوكسي فوق العينة مباشرة. لتنعيم الحيود في واجهة الايبوكسي الهوائية.

استخدم مصدر ضوء معقوف من الألياف الضوئية لإضاءة العينة. كرر خطوات الطحن والتصوير في كل مرة تطحن فيها سمكا محددا مسبقا للعينة. الحد الأدنى لزيادة الطحن الدقيقة والقابلة للتكرار لحامل العينة هو 20 ميكرون.

تتكرر هذه العملية بشكل تدريجي حتى يتم الكشف عن مقطع عرضي عبر الغرسة وأنسجة العين المحيطة بها عند المستوى المطلوب. تفعيلك. فيما يلي أمثلة على صور أنسجة الشبكية التي تم تصورها بجوار التيتانيوم T لشبكية التيتانيوم في نقاط مختلفة أثناء عملية الطحن. تظهر الصور أقساما طولية من المسمار تخترق العين وتخرج من الصلبة المجاورة للسيليكون والتولودين الملون باللون الأزرق وغير الملوث

يمكن رؤية انفصال الشبكية غير المصطنع والطي على جانبي السيليكون بقوة منخفضة وعالية. يمكن رؤية عمود التثبيت مضمنا في السيليكون ، وقد اخترق رأس المسمار شبكية العين والصلبة. من الواضح هنا أن هناك انفصالا غير مصطنع في شبكية العين غير الملوثة على جانبي السيليكون الذي يتم تصوره بقوة منخفضة وعالية.

أظهر المثال أن هناك فوضى في الشبكية بجوار التثبيت وضغط الشبكية في جانب واحد بسبب زاوية الإدخال المائلة. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر تضمين العينة وتوجيهها وقصبها بعناية ، بحيث تتماشى الأسطح الأرضية الناتجة مع الخطة المطلوبة. علاوة على ذلك ، يجب جمع صور متعددة في كل مرحلة من مراحل الطحن حيث لا يمكن استرداد العينات الأرضية اليوم.

يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة لأنسجة الشبكية الاصطناعية. يمكن أيضا تطبيقه لتصور واجهة أنسجة الجهاز في الأنظمة الأخرى التي تستخدم مكونات مزروعة بقوة مثل غرسات الدماغ العميقة أو دعامات الأوعية الدموية أو بدلة العظام.