يناير 21, 2015
الهدف العام من هذا الإجراء هو استئصال جزء من العظام بنجاح من ضلع الفأر. تم تطوير الإجراء كنموذج لدراسة إصلاح العظام الطويلة على نطاق واسع.
الهدف من هذا الإجراء هو إنشاء استئصال واسع النطاق في الجزء العظمي من الضلع كنموذج لإصلاح الهيكل العظمي. يتم تحقيق ذلك عن طريق إنشاء شق وفتح شق أولا عبر الجلد على الجانب الجانبي من. الخطوة الثانية هي كشف عظم الضلع المراد إزالته.
بعد ذلك ، تتم إزالة جزء من عظم الضلع إما مع غمد النسيج الضام المحيط أو السمحاق ، أو ترك السمحاق وراءه. الخطوة الأخيرة هي إغلاق الشقوق والسماح للحيوان بالتعافي. في النهاية ، يمكن استخدام هذا النموذج لإصلاح العظام لإظهار الأحداث الخلوية والجزيئية التي تحدث أثناء إصلاح الهيكل العظمي على نطاق واسع.
في الثدييات، يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية لأن التلاعب بالأدوات الجراحية يتطلب الدقة ، وتتضمن الجراحة الناجحة معرفة مكان وجود الأنسجة المختلفة. سيتم توضيح الإجراء ماريسا رور ونيكيتا تريبر وأي من طلاب الدراسات العليا في مختبري. بعد تحضير المنطقة الجراحية والأدوات والمستلزمات المعقمة اللازمة ، قم بتحفيز التخدير عن طريق وضع فأر توري في غرفة الحث مع 4٪ ثلج من الفلور.
بمجرد تخدير الفأر ، ضع مرهما على عيون الفأر وتأكد من عمق التخدير. من خلال إجراء قرصة إصبع القدم ، يجب ألا يكون هناك رد فعل على قرصة إصبع القدم. ضع الماوس على وسادة حرارية أو بجوارها على مسرح مجهر تشريح مع وضع مخروط الأنف لخرطوم صيانة التخدير فوق أنف الفأر.
تأكد من أن الماوس في وضع جانبي. اضبط الفلور على اثنين إلى 3٪ للصيانة وراقب معدل التنفس. ثم حقن البوبرينورفين تحت الجلد عن طريق إبرة قياس 25.
بالنسبة للألم الوقائي بعد الجراحة ، قد ترتعش الساق ، وهي استجابة طبيعية. أولا ، حدد الضلع المطلوب عن طريق ملامسة الضلع المنقاري ، والذي يتم احتسابه على أنه رقم واحد. في هذا الفيديو ، ستتم إزالة جزء من الضلع رقم 10.
احلق المنطقة الموجودة فوق الضلع ثم نظفها باليود بوفيدون ، متبوعا بالأيزوبروبانول ثلاث مرات بعد عمل شق بطول سنتيمترين عبر الجلد والعضلات وطبقات الدهون فوق الضلع المراد استئصاله ، ضع الطبقات الثلاث في ضام لكشف المنطقة الجراحية مع تقليل حجم الشق. ثم استخدم مشرطا بطول خمسة ملليمترات لقطع العضلات الوربية فوق الضلع في مكان ، خمسة ملليمترات قريبة من مفصل الشوكولاتة حيث لا يكون الضلع منحنيا للغاية. ثم افصل العضلات بعناية عن العظام باستخدام ملقط طرف رفيع.
بجانب إنشاء استئصال مع الاحتفاظ بالسمحاق في ، قم بقطع السمحاق على طول الضلع. ثم استخدم ملقطا رفيعا لفصل السمحاق الرقيق بشكل جانبي عن العظم الأساسي بعناية فائقة. إذا لزم الأمر ، قم بقياس الاستئصال بسخرية في المجهر أو مقياس من نوع المسطرة.
ثم استخدم مقصا دقيقا دقيقا لعمل مقطع عرضي عبر العظم. في أحد طرفيه ، ارفع العظم بعناية من السمحاق واقطع الطرف الآخر على الفور. ضع الضلع الذي تمت إزالته في 4٪ بارالديهايد لتحليله في المستقبل.
إذا حدث نزيف نتيجة لقطع العظام ، فاضغط على الطرف المقطوع بقطعة قطن لمدة أربع إلى خمس ثوان لوقف النزيف. لإغلاق الشق ، قم بخياطة العضلات الوربية فوق الجزء العلوي من الأكمام السمحاق المتبقية بثلاث أو 4 9 0 خيوط متقطعة. ضع الغرز مباشرة فوق الأطراف المقطوعة للضلع لتكون بمثابة مؤشرات لموقع الجراحة.
قم بإزالة الضام ثم خياطة العضلات والدهون العلوية بتسع خيوط متقطعة صفر. خياطة كل طبقة على حدة في الفئران ذات طبقات سميكة من العضلات أو الدهون. أغلق الجلد بأربع إلى 5 خيوط 7 0 ، ثم قم بتأمين الشق بلاصق الأنسجة.
معسر الحواف مع ملقط كبير. فطم الماوس ببطء عن الفلور عن طريق ضبط التركيز إلى 1٪ لبضع دقائق ، ثم قم بإيقاف تشغيل الفلور. ضع الماوس تحت مصباح حراري واتركه حتى يستعيد الوعي.
بعد استعادة الوعي وطوال فترة الشفاء ، يجب أن يتحرك الفأر ويتجول بشكل طبيعي ولا تظهر عليه أي علامات على الضيق. بمجرد أن يجف الشق ، ضع الفأر في قفص نظيف مع حرية الوصول إلى الطعام والماء. يمكن إيواء الإناث بشكل مشترك ، ولكن يجب إيواء الذكور بمفردهم لمنع القتال ، وتوفير إدارة الألم بعد الجراحة ، بما في ذلك إعطاء البوبرينورفين في شكل جينين عن طريق الفم بمعدل 0.5 ملليغرام لكل كيلوغرام كل 12 ساعة لمدة 48 ساعة.
لا يتطلب الإعطاء عن طريق الفم تقييد ، مما قد يسبب ألما لمنطقة الصدر. تظهر هذه الصورة استئصال ضلع بطول 4.5 ملم تم جمعه مباشرة بعد الجراحة. لا تترك أي شظايا عظمية وراءها.
تم تلطيخ العينة باللون الأحمر الزارين وتم تطهيرها في 80٪ من الجلسرين. يشير رأس السهم إلى موقع نهايات القطع. هذا هو الجزء الضلع الذي تمت إزالته من القفص الصدري في الصورة السابقة دون إرفاق السمحاق.
يوضح القسم النسيجي الملطخ بالهيماتين و eoin الموضح هنا أن هناك الحد الأدنى من السمحاق المرتبط بالعظم كما هو موضح في رأس السهم الأصفر على اليسار ولا يوجد السمحاق على اليمين. تشير العلامة النجمية الصفراء إلى تجويف نخاع العظم. تظهر هذه الصورة جزءا ضلعيا تمت إزالته مع استمرار السمحاق متصلا ، ويظهر هذا القسم النسيجي السمحاق السليم الذي يغطي العظم كما هو موضح بالقوس الأصفر.
تشيرالعلامة النجمية الصفراء مرة أخرى إلى تجويف نخاع العظم. تظهر هذه الصورة مستحضرا للهيكل العظمي بعد شهرين من الشفاء بعد الاستئصال مع السمحاق السليم داخل الفأر ، ويمكن ملاحظة الإصلاح الكامل للمنطقة. يوضح هذا القسم النسيجي من مستحضر الهيكل العظمي الموضح للتو استعادة جدران عظم الصفيحة وتجويف نخاع العظم.
تظهر هذه الصورة مستحضرا للهيكل العظمي بعد ثلاثة أشهر من الشفاء. بعد إزالة كل من جزء الضلع والسمحاق المحيط ، لم يكن هناك سوى الحد الأدنى من الإصلاح في الطرف المقطوع الموضح على يسار اللوحة. يشير رأس السهم الأصفر إلى مفصل الشوكولاتة.
يظهر هذا القسم النسيجي من مستحضر الهيكل العظمي الموضح سابقا تحبيبا وأنسجة دهنية وخلايا عضلية تملأ في موقع الاستئصال. بمجرد إتقانها ، يمكن تنفيذ هذه التقنية في أقل من ساعة واحدة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح باتباع هذا الإجراء. يمكن إجراء طرق أخرى مثل إنشاء استئصال في جزء الغضروف من الضلع من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل ، كيف يحدث إصلاح الغضروف على نطاق واسع؟
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إنشاء استئصال في الجزء العظمي من الضلع من أجل دراسة إصلاح الهيكل العظمي.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تهدف هذه العملية إلى إجراء استئصال واسع النطاق في ضلع فأر، ليكون بمثابة نموذج لدراسة ترميم الهيكل العظمي. تتضمن الطريقة إجراء شق جراحي، وكشف الضلع، وإزالة العظم، ثم إغلاق الشق.
لا يزال إصلاح العظام على نطاق واسع يمثل تحديًا حاسمًا في أبحاث الجهاز العضلي الهيكلي الانتقالية، في ظل وجود نماذج قبل سريرية محدودة تحاكي ديناميكيات الشفاء القوية. ويقدم نموذج استئصال ضلع الفأر نظامًا قابلاً للتكرار وسهل الوصول لاستقصاء الآليات الخلوية والجزيئية التي تكمن وراء تجديد العظام الطويلة. ويمكّن هذا النموذج فرق الأدوية الحيوية من تقييم عمليات الإصلاح ومساهمات السمحاق، مما يساعد في التحقق من صحة الأهداف وتقليل المخاطر في برامج إصلاح العظام في مراحلها المبكرة.
يتكامل هذا النموذج ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف وصولاً إلى المرحلة قبل السريرية لإصلاح الجهاز العضلي الهيكلي، مما يمثل جسراً يربط بين الدراسات الميكانيكية المبكرة وتقييم المرشحات الانتقالية.