التجريبية الزرق المستحث بواسطة حقن العيني من المجهرية المغناطيسي

الهدف من هذا الإجراء هو إحداث ضغط مرتفع داخل العين في الفئران باستخدام حقن الكريات المجهرية المغناطيسية في الغرفة الأمامية للعين. ضع أولا حلقة مغناطيسية حول عين مخدر ، واغسل الكريات المجهرية المغناطيسية ، وأعد تعليقها في المحلول ، ثم قم بتحميلها في حقنة. بعد ذلك ، قم بحقن الكريات المجهرية المغناطيسية في الغرفة الأمامية للعين.

قم بإزالة الحلقة المغناطيسية أثناء الاسترداد. يمكن لبيانات العملية التي تم الحصول عليها من التحليلات النسيجية مثل تلطيخ النفق أو تلطيخ العصب البصري قياس موت الخلايا العقدية الشبكية الناتجة عن زيادة ضغط العين. اغسل حبات الكرة المجهرية المغناطيسية المعقمة بحجم ثمانية ميكرون ثلاث مرات في مليلتر واحد من محلول المحلول الملحي المخزن في هانك بواسطة ريوس ، والتعليق والطرد المركزي عند 10 ، 000 مرة G لمدة خمس دقائق.

ثم تعليق reus في 0.5 مل من HBSS لمحلول 30 ملليغرام لكل مليلتر. الآن باستخدام مقياس موجات الصوت الارتدادية الذي تمت معايرته للاستخدام في عين الجرذ ، خذ خمسة قياسات أساسية لIOP في المستيقظة. بعد التخدير ، تضع الفئران مرهما العيني على العين المقابلة غير المصنفة للحفاظ على رطوبتها.

أثناء التخدير تطبيق 0.5٪ بروبان هيدروكلوريد, مخدر موضعي للعين المنطوقة. بعد ذلك ، اغسل هذه العين ب 5٪ بوفيدون اليود في الماء. بعد خمس دقائق ، قم بالتخلص من اليود بوفيدون واغسل العين بمحلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪.

حافظ على رطوبة العين أثناء التخدير مع التطبيق المنتظم للمحلول الملحي المعقم. الآن ضع مغناطيسا ستيرويديا حول العين لتقليل مخاطر صدمة القزحية وتقليل فقدان الخرز. قم بتوجيه الإبرة عرضيا إلى سطح القرنية بالتوازي مع القزحية قدر الإمكان.

استمر في حقن 25 ميكرولتر من 30 ملليغرام لكل مليلتر ، جاما المجهرية المغناطيسية المشعة في الغرفة الأمامية. اترك الإبرة في مكانها لمدة دقيقة واحدة بعد الحقن للتأكد من أن الخرزات تستقر في زاوية قرنية اللجنة الأولمبية الدولية لإعاقة التصريف المائي من الشبكة التربيقية. اعمل بزاوية الإبرة قليلا بعد ثوان قليلة من استقرار الخرزات في البداية للسماح ببعض تسرب الماء وتقليل الزيادات العابرة في ضغط العين.

لضمان استمرار استخدام الإبرة في إجراءات منفصلة ، اغسل الإبرة باستخدام PBS. ثم 70٪ إيثانول ، يليه الماء المقطر في هذه المرحلة. إذا لزم الأمر ، قم بإزالة المغناطيس واستخدامه لسحب الخرز في مناطق التغطية غير المكتملة.

اترك المغناطيس في مكانه حول العين لمدة 10 دقائق أخرى بعد الحقن. لضمان استقرار الخرزات جيدا في زاوية القرنية القزحية. التخدير العكسي باستخدام 0.25 ملليغرام لكل كيلوغرام من هيدروكلوريد ESOL.

يجب تطبيق 0.5 بروبان هيدروكلوريد لعلاج التسكين ومرهم الكلورامفينيكول موضعيا للوقاية من العدوى. اترك تتعافى على حصيرة حرارية حتى تستعيد الحركة. ثم انقله إلى صندوق دافئ.

استخدم العين المقابلة كعنصر تحكم غير مصنف. تكرار قياسات IOP كل يومين إلى ثلاثة أيام بعد إعطاء الخرزة وكل يومين إلى ثلاثة أيام بعد ذلك، وتحديد معايير إدراج العين في الدراسات، بما في ذلك ارتفاع IOP فوق ضغط التحكم المقابل بمقدار خمسة ملليمترات من الزئبق، ولا يتجاوز IOP 60 ملم من عيون الزئبق حيث يعود الضغط إلى خط الأساس بأسبوع واحد بعد الحقن لا ينبغي إدراجها في الدراسات. ومع ذلك ، من الممكن إعادة حقن الخرز في العيون التي تفشل في تطوير IOP مرتفع إذا رغبت في ذلك.

إصلاح العين التشريح والعصب البصري في 4٪ بارالديهايد ، وتقييم تلف الخلايا العصبية في الشبكية عن طريق تلطيخ النفق وتلف العصب البصري بواسطة العطف الأزرق. تلطيخ. في هذه التجربة ، أدى حقن الخرز المغناطيسي في زاوية القرنية القزحية إلى ارتفاع طويل وقوي في الضغط. علاوة على ذلك ، تم الحفاظ على الزيادة في الضغط طوال مدة التجربة.

متوسط IOP على طول التجربة الكامل للعيون المحقونة غير الخرزية 19.7 زائد ناقص 0.3 ملم من الزئبق و 40.5 زائد ناقص 2.8 ملم من الزئبق للعيون المحقونة بالخرز. بالإضافة إلى ذلك ، زادت ذروة IOP من 22.8 زائد ناقص 0.3 ملليمتر من الزئبق إلى 49.9 زائد ناقص 2.3 ملم من الزئبق لتحديد ما إذا كان الارتفاع في IOP يؤدي إلى موت الخلايا العقدية الشبكية. تم إجراء تلطيخ النفق على شبكية العين والأنسجة على أقسام العصب البصري المستعرضة في شبكية العين.

لاحظنا زيادة في تلطيخ النفق في العيون المحقونة بالخرز مع ارتفاع IOP. ارتفع عدد نوى موت الخلايا المبرمج بحوالي 15 ضعفا من شبكية العين ذات الضغط المرتفع للتحكم المقابل كما هو متوقع في العيون التي تم فيها حقن الخرز المغناطيسي دون ضغط ، ولم يكن عدد الخلايا الإيجابية للنفق مختلفا بشكل كبير عن تلك الموجودة في الضوابط المحقونة في unin. أظهر مزيد من التحقيق في أمراض العصب البصري في نموذج الجلوكوما تراكم اللون الأزرق في العديد من المحاور التي تشير إلى تنكس هذه العمليات الخلوية.