RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/52450-v
A. C. H. Pape*1, Maarten H. Bakker*1, Cheyenne C. S. Tseng2, Maartje M. C. Bastings1, Stefan Koudstaal2, Pierfrancesco Agostoni2, Steven A. J. Chamuleau2, Patricia Y. W. Dankers1
1Institute for Complex Molecular Systems, Department of Biomedical Engineering, Laboratory of Chemical Biology,Eindhoven University of Technology, 2Department of Cardiology, Division Heart and Lungs, Interuniversity Cardiology Institute of the Netherlands (ICIN),University Medical Center Utrecht
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
hydrogelators Supramolecular على أساس ureido-pyrimidinones سماح للسيطرة الكاملة على خصائص هلام العيانية وسلوك التحويل سول الجل باستخدام الرقم الهيدروجيني. هنا، نقدم بروتوكول لصياغة وحقن مثل هذا hydrogelator supramolecular عن طريق نظام تسليم القسطرة للتسليم المحلي مباشرة في المجالات ذات الصلة في قلب خنزير.
الهدف العام من هذا الإجراء هو الحد الأدنى من التدخل الجراحي ، حقن هيدروجيل فوق الجزيئي المحمل بالمخدرات في قلب خنزير مصاب بالاحتشاء باستخدام قسطرة طويلة ومرنة. يتم تحقيق ذلك عن طريق تحضير تركيبة هيدروجيل أولا لاحقا والدواء المطلوب. الخطوة الثانية هي التحقيق في خصائص الهيدروجيل ومعدل إطلاق الدواء في المختبر.
ثم بعد أربعة أسابيع من احتشاء عضلة القلب ، يتم عمل خريطة كهروميكانيكية للبطين الأيسر للخنزير باستخدام نقاط البيانات المأخوذة من سطح الشغاف. ثم يتم استهداف ما يسمى بعضلة القلب السباتية للحقن الموضعي باستخدام هيدروجيل محمل بالمخدرات. يمكن أن يؤدي إجراء الصياغة والتطبيق المريح هذا إلى الكشف عن علاجات جديدة لاحتشاء عضلة القلب وما إلى ذلك.
الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الأساليب الحالية عن طريق الجلد مثل الانصباب داخل الشريان التاجي هي واحدة ، تطبيق القسطرة للهيدروجيل ، والثانية ، إمكانية تخطيط العلاج ، مما يسمح لنا بتوجيه القسطرة إلى مجال الاهتمام. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في دراسة وعلاج احتشاء عضلة القلب ، مثل المزايا المحتملة لحقن مادة داعمة ميكانيكيا وفعالية توصيل الأدوية المحلية المستدامة. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاجنا واحتشاء عضلة القلب لأن رسم الخرائط الكهروميكانيكية يسمح بتحديد المنطقة المصابة بالاحتشاء ويسمح الحقن اللاحق الموجه الخاص بالموقع من الهيدروجيل بتوصيل الأدوية المحلية.
بشكل عام ، عرف الأفراد أن هذه الطريقة ستكافح لأن هذه التقنية تتطلب مهارات عملية مع حركات خفية للقسطرة أثناء مراقبة معلمات الاستقرار. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية كصياغة لحمل المخدرات الهلامية IDE. الحقن المضاد عن طريق القسطرة هي إجراءات صعبة يصعب تنفيذها بدون خبرة في التحضير صياغة مليلتر من 10٪ الوزن من حيث حجم الهيدروجيل.
ابدأ بإذابة 100 ملليغرام من الهيدروجيل لاحقا في 900 ميكرولتر من PBS عند درجة الحموضة 11.7. في حالة صياغة الهلاميات المائية للحقن في ، يجب تنفيذ جميع الخطوات بارتداء القفازات. ثم حرك الهيدروجيل في PBS عند 70 درجة مئوية لمدة ساعة.
بمجرد أن يبرد المحلول ، تحقق من الرقم الهيدروجيني. يجب أن تكون حوالي التاسعة. الحل جيد لعدة أيام.
الآن ماصة الدواء أو الجزيء محل الاهتمام في المحلول واتركه يقلب لمدة 10 دقائق في حالة حقن الهيدروجيل في. أكمل التحضير عن طريق تعقيم المحلول بالأشعة فوق البنفسجية لمدة ساعة. يستعرض بروتوكول النص كيف يمكن تحليل الهيدروجيل.
أولا ، قم بإعداد ملحق ثقافة خلية بلاستيكية معلقة للوحة 24 بئر عن طريق تغطية قاعها بالعطر لمنع التسرب. ثم انقل 100 ميكرولتر من المحلول اللزج المحضر إلى الملحق ، وأضف على الفور 1.4 ميكرولتر من حمض الهيدروكلوريك المولاري. سينخفض الرقم الهيدروجيني إلى قيمة محايدة وفي غضون 30 دقيقة سوف يشفى الهيدروجيل.
الآن قم بإزالة الفيلم الجزئي وضع الإدخالات في لوحة بئر ، وعند 800 ميكرولتر من PBS عند درجة الحموضة 7.4 ، قم بتحميل الآبار الفارغة ب PBS وأغلق اللوحة بالشكل لتقليل التبخر. ثم دع الصفائح تحتضن بتحريض لطيف عند 37 درجة مئوية. تحديث PBS بشكل دوري وتحليل PBS الذي تمت إزالته للمركبات المنبعثة عن طريق تآكل الهيدروجيل وإطلاق الدواء.
سيظهر الإجراء الدكتور تون من الأوريش حيث يعمل طبيب قلب تداخلي. بعد أربعة أسابيع من إحداث احتشاء عضلة القلب ، خطط لإجراء رسم الخرائط الكهروميكانيكية وقم بإعداد النظام في مختبر القسطرة. ضع أولا الرقعة المرجعية الخارجية على الجزء الخلفي من الخنزير المخدر ، ثم قم بتأمين وصول الأوعية الدموية عبر الشريان الفخذي بواسطة البروتوكول القياسي.
لإنشاء الخريطة الكهروميكانيكية لسطح الشغاف LV ، استخدم مصدر طاقة مجال مغناطيسي منخفض للغاية وقسطرة مائلة بجهاز استشعار. بعد ذلك ، استخدم حاقن الطاقة للحصول على تصوير الأوعية الدموية للبطين الأيسر ثنائي السطح في المنظر المائل الأمامي الأيمن بزاوية 25 درجة و 40 درجة المائل الأمامي الأيسر. استخدم طرق العرض هذه لتقدير حجم مستوى منخفض.
الآن أعط 75 وحدة لكل كيلوغرام من الهيبارين. ثم تقدم قسطرة رسم الخرائط الفرنسية رقم ثمانية تحت توجيه تنظيري الفلوري إلى البطين الأيسر عبر الشريان الأورطي الهابط والقوس الأبهري والصمام الأبهري. يمكن أن يكون للقسطرة منحنى D أو F.
ثم قم بتوجيه طرف القسطرة إلى قمة البطين الأيسر. للحصول على البيانات الأولى ، استمر في جمع البيانات عن مسار التدفق الخارجي والنقاط الجانبية والخلفية لتشكيل صورة ظلية ثلاثية الأبعاد ، تحدد حدود البطين. بعد ذلك، اسحب قسطرة الرسم فوق الشغاف وبالتتابع.
احصل على موقع الطرف أثناء ملامسته للشغاف. في النهاية ، جمع البيانات من جميع قطاعات الشغاف. ثم قم بإزالة قسطرة التعيين باستخدام البيانات.
حدد المنطقة المستهدفة. إنه المكان الذي يكون فيه النشاط الكهربائي قريبا من الوضع الطبيعي وتضعف الحركة الميكانيكية. ما يسمى عضلة القلب السباتية للحقن داخل عضلة القلب.
خطط لاستخدام قسطرة حقن مكونة من إبرة قياس 27 وتجويف أساسي في قسطرة فرنسية رقم ثمانية لتقديم كميات محددة. حقنة اللوتس مع ما يقرب من ملليلتر واحد من محلول الهيدروجيل ، ووضعها في مضخة حقنة للتأكد من عدم ثقب جدار عضلة القلب بالإبرة. تتم التعديلات وفقا للحد الأدنى من سمك جدار البطين المقاس في مخطط صدى القلب الأخير.
اضبط امتداد الإبرة على صفر درجة و 90 درجة. ثم املأ المساحة الميتة في النظام بمحلول الهيدروجيل. بعد ذلك ، ضع طرف قسطرة الحقن عبر الصمام الأبهري وفي المنطقة المستهدفة للوفاء بمعايير الحقن الأولى.
هذا هو عمودي القسطرة على جدار الجهد المنخفض. ثانيا ، يجب أن تتمتع بثبات حلقة ممتاز كما تم حسابها بواسطة نظام EMM. ثالثا ، يجب أن يكون للمنطقة المستهدفة جهد أساسي لا يقل عن 6.9 مللي فولت.
إذا تم استيفاء هذه المعايير ، فقم بدفع الإبرة إلى عضلة القلب. الآن ، تحقق من معيار رابع. يجب أن يكون هناك تقلص بطيني سابق لأوانه في البطين الأيسر.
مع استيفاء جميع المعايير حقن 0.1 إلى 0.3 ملليلتر من الهيدروجيل بمعدل ثابت. كرر الحقن في ستة إلى 10 أوضاع مختلفة في وضع منتشر قدر الإمكان حتى يعمل الهيدروجيل كنظام توصيل للأدوية. يجب أن يحدث التآكل تدريجيا من إطلاق عقار صغير بيرفينيدون وبروتين فلوري ، وتمت دراسة الياقوت الثاني.
في المختبر ، تم إطلاق الدواء الصغير في غضون يوم واحد بينما تم إطلاق جزيئات أكبر مثل M ruby two على مدار أسبوع. لم يكن هناك إطلاق انفجار واضح لجزيئات كبيرة لتحديد المنطقة المستهدفة لحقن الدواء. تم استخدام رسم خرائط عضلة القلب ثلاثية الأبعاد في الوقت الحقيقي لإنشاء إعادة بناء للبطين الأيسر.
يتم عرضه باستمرار كإمكانات جهد على مقياس ألوان متدرج وبعد ذلك يتم ضبطه على العتبة المحددة. تحدد وظيفة التقصير الخطي المحلي أو وظيفة LLS حركة الجدار الإقليمية من خلال الحصول على متوسط التغيير في المسافة بين موقع العينة والنقاط المجاورة عند الانقباض والانبساط النهائي. ثم يتم حساب هذه القيم لكل مقطع وعرضها في الخريطة القطبية.
تتميز المناطق المحتضنة بضعف الحساسية الميكانيكية أو وجود قيمة LLS أقل من 4٪ وتتميز بإمكانيات أحادية القطب غير طبيعية أو منخفضة أقل من ستة مللي فولت بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء هذه التقنية في ساعة ونصف إلى ساعتين أثناء القيام بهذا الإجراء. من المهم التخطيط لها بشكل صحيح وأن يكون لديك فريق من الأشخاص ذوي الخبرة باتباع هذا الإجراء. يمكن تنفيذ الاختلافات في العلاج للإجابة على أسئلة إضافية مثل التركيبة الهيدروجيل المثلى ، والمعدل المطلوب لإطلاق الدواء ، وفعالية أنواع مختلفة من الأدوية.
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية صياغة هيدروجيل جزيئي فائق محمل بالأدوية وكيفية تخطيط وتنفيذ رسم الخرائط الكهروميكانيكية بعناية وإجراءات الحقن بين عضلة القلب. لا تنس أن العمل مع المختبر مثل الخنازير يتطلب موافقة اللجنة التجريبية ويجب إجراؤه وفقا للوائح الرعاية الاجتماعية المحلية.
Related Videos
11:32
Related Videos
15.5K Views
02:57
Related Videos
6.9K Views
08:22
Related Videos
15.8K Views
06:15
Related Videos
9.3K Views
06:53
Related Videos
9.3K Views
14:24
Related Videos
12.2K Views
06:39
Related Videos
7.2K Views
09:19
Related Videos
4.9K Views
09:39
Related Videos
8.9K Views
07:20
Related Videos
1.7K Views