Name: زجاجي كله فكاهة تشريح لتحليل Vitreodynamic (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 41 s
Description: تعلم تقنية فعالة لعزل النوى والقشرة الزجاجية الكاملة من عيون الخنازير بعد الاستئصال. تُستخدم هذه الطريقة لدراسة الخصائص الفيزيائية والكيميائية للجسم الزجاجي في أبحاث طب العيون.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

يقر المؤلفون بمصادر التمويل التالية ، مؤسسة ويتير ، مؤسسة هارينجتون ، المعاهد الوطنية للصحة والبحوث للوقاية من العمى.

وقد تم الحصول على كل العيون منزوعة النواة من مسلخ وتم إجراء جميع التجارب وفقا للقوانين المؤسسية للسلامة الأحيائية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأمين العين منزوعة النواة لأسفل على السطح. القيام بذلك عن طريق وضع دبابيس الأنسجة من خلال الأنسجة الزائدة حول العين وتأمين عليه في مجلس الستايروفوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح وفصل الملتحمة محيط بالحوف من العين. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملقط غرامة (0.3 ملقط) وmicroscissors (مقص يستكوت) إلى شق الملتحمة في حوف وبصراحة تشريح تشغيله الصلبة. قطع الملتحمة على طول حوف كعائدات للتشريح حادة للسماح للمزيد من تشريح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الملتحمة على طول الطريق حول العين (360 درجة) لفضح قدر الصلبة ممكن. ملاحظة: ومن المفيد لترك كمية صغيرة من الملتحمة لتسهيل تثبيت مكان العين مع دبابيس جراحية أو ملقط خلال الفترة المتبقية من هذا الإجراء. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء رفرف الصلبة سمك كامل طول واحدجانب من العين (مشرط شفرة 69). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل ~ 5 مم شق الصلبة بالتوازي مع حوف و 3 ملم الخلفي إلى حوف عن طريق خفض بلطف الصلبة مع مشرط (مبضع شفرة 11) حتى المشيمية المصطبغة بحزن غير مرئية. يجب الحرص على عدم شق المشيمية نفسها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح بعناية على طول الطائرة بين الصلبة والمشيمية، إما مع مقص (باستخدام تشريح حادة) أو مع مشرط، حتى أنه من الممكن تكبير مساحة المحتمل بين هذه الأنسجة عن طريق دفع المشيمية بلطف إلى الداخل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق الصلبة آخر عمودي على أول شق الصلبة مع microscissors حاد، وخلق شق على شكل T. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم الاستمرار في تشريح بصراحة بطريقة كفافي لإزالة الأنسجة صلبوية من المشيمية الكامنة وبلطف دفع المشيمية بعيدا عن الصلبة على النحو المذكور أعلاه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكبير رفرف الصلبة حسب الحاجة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلطف بلانت تشريح المشيمية بعيدا عن الصلبةطوال العملية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكبير رفرف حتى شق عمودي على حوف تصل إلى العصب البصري وإجراء شق مواز لحوف هو الثلث على الأقل من محيط العين (45 درجة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام رفرف الصلبة كمصدر للنفوذ لمعالجة العين أثناء تشريح حادة. وجر مضاد على رفرف يجعل من الاسهل لتشريح حادة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة السابقة على رفرف الصلبة الأخرى. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع اللوحات صلبوية لفضح مساحة واسعة من المشيمية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مواصلة شق في الخطوة 3 حول محيط العين (360 درجة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأنسجة المشيمية، الشبكية المتبقية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> داخل المنطقة المكشوفة، واستخدام القطن طرف لتنظيف بلطف بعيدا عن الأنسجة المشيمية الشبكية المتبقية. بدلا من ذلك، والاستيلاء على بلطف الأنسجة مع ملقط وقشر تشغيله الجسم الزجاجي الأساسي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا لزم الأمر إجراء شق في المشيمية الواحدarting من العصب البصري. ثم قشر بعيدا المشيمية بلطف لفضح الشبكية والجسم الزجاجي القشرة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تواصل كليلة تشريح المشيمية بعيدا عن الصلبة ومن ثم قشر بعيدا المشيمية للحصول على كامل، زجاجي سليمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام حافة صلبوية تعلق على القرنية لوضع زجاجي كله في الموقع المطلوب. عند هذه النقطة، يتم إرفاق زجاجي لالصلبة الأمامية والعدسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلانت تشريح الجسم الزجاجي من داخل الصلبة، حول العدسة، وإزالة جميع الصلبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام أداة حادة لحلج القطن العدسة بعيدا عن الجسم الزجاجي إذا لزم الأمر. استخدام نموذج لمختلف التجارب vitreodynamic. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع العينة في دورق زجاجي مع المساحة السطحية المعروفة تعرضها للهواء. وضع الأكسجين التحقيق حساسة على حافة العينة. استخدام مناور الصغيرة لنقل التحقيق إلى مسافة معروفة (ص) في العينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام قوانين فيك من نشر للحصول على معادلة الانتشار النظرية. مع داتا التي تم جمعها في الخطوة 10.1، يجب الحصول على المدى معامل الانتشار التجريبي / رد فعل الخ </li></ol></li></ol>

<ol><li>Siggers, J. H., Ethier, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid+Mechanics+of+the+Eye%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Fluid+Mechanics%22%5BJournal%5D)">Fluid Mechanics of the Eye.</a> Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).</li>
<li>Sebag, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+human+vitreous+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in human vitreous structure.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).</li>
<li>Grignolo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrous+components+of+the+vitreous+body%5BTitle%5D)+AND+%22AMA+Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Fibrous components of the vitreous body.</a> AMA Arch Ophthalmol. 47 (6), 760-774 (1952).</li>
<li>Gisladottir, S., Loftsson, T., Stefansson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusion+characteristics+of+vitreous+humour+and+saline+solution+follow+the+Stokes+Einstein+equation%5BTitle%5D)+AND+%22G+Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Diffusion characteristics of vitreous humour and saline solution follow the Stokes Einstein equation.</a> G Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 247 (12), 1677-1684 (2009).</li>
<li>Xu, J., Heys, J. J., Barocas, V. H., Randolph, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permeability+and+diffusion+in+vitreous+humor%3A+implications+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Permeability and diffusion in vitreous humor: implications for drug delivery.</a> Pharm Res. 17 (6), 664-669 (2000).</li>
<li>Watts, F., Tan, L. E., Wilson, C. G., Girkin, J. M., Tassieri, M., Wright, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+micro-rheology+of+the+vitreous+humor+using+an+optically+trapped+local+probe%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Optics%22%5BJournal%5D)">Investigating the micro-rheology of the vitreous humor using an optically trapped local probe.</a> Journal of Optics. 16 (1), 015301(2014).</li>
<li>Skeie, J. M., Mahajan, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissection+of+human+vitreous+body+elements+for+proteomic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Dissection of human vitreous body elements for proteomic analysis.</a> J Vis Exp. (47), e2455(2011).</li>
<li>Abdallah, W., Ameri, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitreal+oxygenation+in+retinal+ischemia+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Vitreal oxygenation in retinal ischemia reperfusion.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 52 (2), 1035-1042 (2011).</li>
<li>Goldenberg, D., Trese, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologic+vitreodynamics%3A+what+is+it%3F+Why+is+it+important%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Pharmacologic vitreodynamics: what is it? Why is it important.</a> Expert Review of Ophthalmology. 3 (3), 273-277 (2008).</li>
<li>Choonara, Y. E., Pillay, V., Danckwerts, M. P., Carmichael, T. R., du Toit, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+implantable+intravitreal+drug+delivery+technologies+for+the+treatment+of+posterior+segment+eye+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">A review of implantable intravitreal drug delivery technologies for the treatment of posterior segment eye diseases.</a> J Pharm Sci. 99 (5), 2219-2239 (2010).</li>
<li>Balachandran, R. K., Barocas, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computer+modeling+of+drug+delivery+to+the+posterior+eye%3A+effect+of+active+transport+and+loss+to+choroidal+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Computer modeling of drug delivery to the posterior eye: effect of active transport and loss to choroidal blood flow.</a> Pharm Res. 25 (11), 2685-2696 (2008).</li>
<li>Smith, C. a, Newson, T. a, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+framework+for+modeling+ocular+drug+transport+and+flow+through+the+eye+using+micro-CT%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">A framework for modeling ocular drug transport and flow through the eye using micro-CT.</a> Phys Med Biol. 57 (19), 6295-6307 (2012).</li>
<li>Quiram, P. A., Leverenz, V. R., Baker, R. M., Dang, L., Giblin, F. J., Trese, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplasmin-induced+posterior+vitreous+detachment+affects+vitreous+oxygen+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Microplasmin-induced posterior vitreous detachment affects vitreous oxygen levels.</a> Retina. 27 (8), 1090-1096 (2007).</li>
<li>Shui, Y., Holekamp, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gel+state+of+the+vitreous+and+ascorbate-dependent+oxygen+consumption%3A+relationship+to+the+etiology+of+nuclear+cataracts%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The gel state of the vitreous and ascorbate-dependent oxygen consumption: relationship to the etiology of nuclear cataracts.</a> Arch Ophthalmol. 127 (4), 475-482 (2009).</li>
<li>Burk, S. E., Da Mata, A. P., Snyder, M. E., Schneider, S., Osher, R. H., Cionni, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+vitreous+using+kenalog+suspension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Visualizing vitreous using kenalog suspension.</a> J Cataract Refract Surg. 29 (4), 645-651 (2003).</li>
<li>Spaide, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+the+Posterior+Vitreous+with+Dynamic+Focusing+and+Windowed+Averaging+Swept+Source+Optical+Coherence+Tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visualization of the Posterior Vitreous with Dynamic Focusing and Windowed Averaging Swept Source Optical Coherence Tomography.</a> Am J Ophthalmol. S0002-9394 (14), 00537-00536 (2014).</li>
<li>Domalpally, A., Gangaputra, S., Danis, R. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDomalpally%2C+A+%22Diseases+of+the+Vitreo-Macular+Interface%22">Diseases of the Vitreo-Macular Interface</a>. 21, Springer. Berlin Heidelberg: Berlin, Heidelberg. 21-27 (2014).</li>
<li>Stocchino, R., Repetto, A., Cafferata, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+investigation+of+vitreous+humour+motion+within+a+human+eye+model%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Experimental investigation of vitreous humour motion within a human eye model.</a> Phys Med Biol. 50 (19), 4729-4743 (2005).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

هناك نوعان من الخطوات الحاسمة التي يجب تنفيذها بعناية أثناء تشريح الجسم الزجاجي. الخطوة 3، وخلق رفرف الصلبة سمك الكامل، هو أمر حاسم في تشريح كامل. ينبغي الحرص على عدم قطع في المشيمية عند إنشاء سمك كامل رفرف الصلبة. في خطوة حاسمة أخرى يتم تشريح بعيدا الصلبة من المشيمية. يجب أن تتم هذه الخطوة بعناية لمنع خلق ثقوب متعددة في المشيمية التي الزجاجي يمكن أن تمتد خارج. هل هناك طريقة لتعديل البروتوكول والتي لا تزال تشريح سليمة الفكاهة زجاجي كلها. خطوة 6 يمكن أن يتأخر حتى يمكن إزالتها الخطو...

والهدف من هذه الطريقة هو بالتفاصيل تقنية لعزل كله، الجسم الزجاجي سليمة، مع جوهر الزجاجي والقشرة سليمة، من العين جيفة، لأغراض التحليل vitreodynamic. كما مجال علم وظائف الأعضاء الزجاجي نمت والباحثين متعدد التخصصات، مثل ميكانيكا السوائل الباحثين، والتحقيق في الخصائص الفيزيائية والنشاط الحيوي للالزجاجي 1. تحقيقا لهذه الغاية، لا بد من التفصيل تقنية لعزل العموم، الجسم الزجاجي سليمة لمساعدة الباحثين متعدد التخصصات. سيباغ وآخرون. (2) وغيرها 3 إجراء تشريح زجاجي كلها أنيقة على عيون جيفة الإنسان وأظهرت الرسوم التوضيحية للنتائج. ومع ذلك، لم يكن وصف التقنية المستخدمة في التفاصيل وغير الخبراء لن تكون قادرة على تكرار الأسلوب بشكل مستقل. وقد تحصد دراسات أخرى الزجاجي من العين جيفة باستخدام أساليب أبسط مثل الطموح أو تشريح الجزئي،وكلاهما لا يؤدي إلى كله، والجسم الزجاجي سليمة. Gisladottis وآخرون. (4) وشو وآخرون. 5 تحقيق النفاذية في النكتة الزجاجي تحصد من عيون الجثث. ومع ذلك، منذ أن تم وصفها لا توجد طريقة لاستخراج زجاجي، كان من المفترض أنها يستنشق النكتة زجاجي مع حقنة. واتس وآخرون. 6 ذهب خطوة أبعد من خلال وصف وسيلة لعزل الأرانب الفكاهة زجاجي مع تقنية جراحية. ومع ذلك، يؤدي هذا الأسلوب في عزلة من مجرد الأساسية الزجاجي وليس القشرة زجاجي. Skeie وآخرون. 7 نظمت في وقت لاحق زجاجي في 4 مناطق فريدة وذكية وصفت طريقة لتشريح خارج كل جزء لتحليلها. هذه التقنية ومع ذلك، لا يؤدي إلى الجسم الزجاجي سليمة ككل. وقد تم تطوير هذه التقنية الحالية لتسهيل التجارب الفيزيائية الحيوية التي يتم حاليا القيام بها إلا في عيون جيفة. الأساليب السابقة، كما وصفها أحدبوف، تقتصر لأن 1) لا يوجد عزل كامل الجسم الزجاجي كله، 2) تحصد الأساسية الزجاجي والقشرة والمتجانس، 3) لا يتم الاحتفاظ التركيب التشريحي الزجاجي، أو 4) لا يتم تفصيل تقنيات تشريح كاف لتكرارها من قبل الباحثين في مجالات أخرى . بالإضافة إلى ذلك، نظرا لغموض الصلبة والمشيمية، والتصور من الجسم الزجاجي محدودة في مقلة العين سليمة. وهذا يحد من الدقة والجدوى من القياسات التي يمكن إجراؤها داخل العين بأكملها. بالإضافة إلى ذلك، يمكن للهياكل تشريحية المحيطة زجاجي تربك دراسة الخصائص الحيوية والفيزيائية للزجاجي. في السنوات الأخيرة، ازداد الجسم العلوم زجاجي كبير وليس هناك سبب للاعتقاد بأن الجسم الزجاجي كله لديه خصائص مختلفة من أجزائه الفردية. هناك اهتمام متزايد في التحقيق في الخصائص الفيزيائية، النشاط الحيوي، والكيميائية من الجسم الزجاجي للvitreodynamics researcح، والتي لها تطبيقات في الطب السريري مثل تسليم المخدرات، الأوكسجين intravitreal 8 و استئصال الزجاجية. vitreodynamics الدوائية، والذي يستخدم عاملات دوائية لمعالجة الجسم الزجاجي، ويمكن استخدامها لتحسين نتائج استئصال الزجاجية 9. يتم استخدام خصائص النشاط الحيوي لنمذجة تدفق السائل الزجاجي، والتي يمكن استخدامها لتحسين تقنيات تسليم المخدرات intravitreal 10-12. الخصائص الفيزيائية للشرائح مختلفة من الجسم الزجاجي ضرورية لفهم الجسم الزجاجي الشبكية نقل الأكسجين 13. تقنية تشريح زجاجي المقترحة يمكن استخدامها لدراسة خصائص مختلفة من الفكاهة زجاجي سليمة. فإنه يتيح مقعد بين كبار التجارب الذي يتعين القيام به في الهيئات زجاجي كامل، سليمة مع أفضل التصور. باختصار، الأساليب الحالية لدراسة الجسم الزجاجي إما غير وصفت على نحو كاف، أو تؤدي إلى عزلة غير مكتملة جوهر الزجاجي والقشرة. ولذلك، هناك حاجة لإجراء هxperiments في نموذج العين شفاف مع الإبقاء على تشريح الجسم الزجاجي الموجود في العين جيفة.

<table><tbody><tr><td>0.3 ملقط</td><td>Storz Opthalmics</td><td>E1793</td><td></td></tr><tr><td>Westcott Tenotomy مقص منحني الأيمن</td><td>Storz Opthalmics</td><td>E3320 R</td><td></td></tr><tr><td>مقبض مشرط رقم 3</td><td>VWR</td><td>25607-947</td><td></td></tr><tr><td>شفرة مشرط ، # 11 ، ل # 3 مقبض</td><td>VWR</td><td>470174-844</td><td></td></tr></tbody></table>

زجاجي كله فكاهة تشريح لتحليل vitreodynamic

Whole Vitreous Humor Dissection for Vitreodynamic Analysis

يقترح المؤلفون تقنية فعالة لعزل اللب الزجاجي الكامل والسليم والقشرة من عيون الخنازير بعد الوفاة. في حين أظهرت الدراسات السابقة نتائج مثل هذه التشريح ، لم يتم وصف الخطوات التفصيلية ، مما يمنع الباحثين خارج المجال من تكرار أساليبهم. تحصد دراسات أخرى الجسم الزجاجي إما من خلال الشفط ، الذي لا يحافظ على تشريح البنية الزجاجية ، أو من خلال التشريح الجزئي ، الذي يعزل فقط اللب الزجاجي. تعمل الطريقة المقترحة على عزل الجسم الزجاجي بالكامل ، مع سلامة اللب الزجاجي والقشرة ، مع الحفاظ على التشريح الزجاجي والسلامة الهيكلية. في هذه الطريقة ، يتم أولا إنشاء سديلة صلبية كاملة السماكة في عين الخنازير منزوعة النواة ومن خلال هذا ، يمكن فصل الأنسجة المشيمية عن الصلبة. ثم يتم توسيع السديلة الصلبية ويتم فصل المشيمية تماما عن الصلبة. أخيرا ، يتم تقشير أنسجة المشيمية والشبكية من الجسم الزجاجي لترك جسم زجاجي سليم معزول. يمكن استخدام تقنية التشريح الزجاجي المقترحة لدراسة الخصائص الفيزيائية للخلط الزجاجي. على وجه الخصوص ، هذه الطريقة لها أهمية للدراسات التجريبية التي تنطوي على توصيل الدواء ، ونقل الأكسجين في الجسم الزجاجي والشبكي ، والحمل الحراري داخل العين.

وبعد بروتوكول يؤدي إلى تشريح الجسم الزجاجي ناجح مع جوهر والقشرة (الشكل 3) سليمة. وهذا واضح من القطع المتبقية من الشبكية انضمت إلى القشرة زجاجي. سليمة الفكاهة زجاجي كلها يمكن استخدامها في عدة طرق لإجراء التجارب vitreodynamic محددة. في حالتنا، فإن معدل انتشار الأكسجين في النكتة زجاجي سليمة وانها تمت دراسة المقابل ثابت الزمن (الشكل 2). وضعت الزجاجي الذي تم تشريح (الأساسية والقشرة) باستخدام طريقة لدينا في كوب زجاجي مع مساحة السطح المعرض معروفة. كان هذ...

الهدف من هذا البروتوكول هو إظهار تقنية فعالة لعزل اللب الزجاجي الكامل والسليم والقشرة من عيون الخنازير بعد الوفاة.

زجاجي كله فكاهة تشريح لتحليل Vitreodynamic

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو استعراض تقنية فعالة لعزل نوى الجسم الزجاجي والقشرة كاملة وسليمة من عيون الخنازير المنزوعة والمنواة. يتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق تشريح الملتحمة حول الحافة وكشف الصلبة. وفي الخطوة الثانية، يتم إنشاء شريحة من الصلبة بكامل سمكها وتوسيعها.بعد ذلك، يتم فصل المشيمية عن الصلبة، وتُقشر أنسجة المشيمية والشبكية بعيداً عن الجسم الزجاجي. وفي النهاية، يمكن استخدام تشريح لب وقشرة الجسم الزجاجي السليمين بالكامل لدراسة الخصائص الفيزيائية والميكانيكية الحيوية والكيميائية للسائل الزجاجي. وتكمن الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الأخرى الموجودة، مثل عمليات التشريح الجزئي للجسم الزجاجي، في أن هذه التقنية تؤدي إلى عزل لب وقشرة الجسم الزجاجي السليمين بالكامل مع الحفاظ على البنية التشريحية للجسم الزجاجي. ابدأ بتثبيت العين المستأصلة من خلال الأنسجة الزائدة المحيطة بها على لوح تشريح من البوليسترين.بمجرد تثبيت العين، استخدم ملقطاً دقيقاً ومقصاً مجهرياً لشق الملتحمة عند الليمبوس (الحافة القرنية الصلبية)، ثم قم بفصلها عن الصلبة عن طريق التشريح الكليل. قم بقص الملتحمة على طول الليمبوس أثناء استمرار التشريح الكليل للسماح بمزيد من التشريح. بعد ذلك، قم بإزالة جميع أجزاء الملتحمة باستثناء كمية صغيرة منها على طول محيط العين لكشف أكبر قدر ممكن من الصلبة.بعد ذلك، استخدم المشرط لإجراء شق صلبي بلطف على بُعد حوالي خمسة مليمترات بشكل موازٍ وثلاثة مليمترات خلف الليمبوس حتى تصبح المشيمية ذات الصبغة الداكنة مرئية لإنشاء سديلة صلبوية. ثم قم بتشريح الأنسجة بعناية وبشكل غير حاد على طول المستوى الفاصل بين الصلبة والمشيمية حتى يصبح من الممكن دفع المشيمية بلطف نحو الداخل لتوسيع المساحة بين النسيجين. وباستخدام مقصات دقيقة حادة، قم بإجراء قطع صلبي آخر يكون عمودياً على القطع الأول لإنشاء شق على شكل حرف T.بعد ذلك، استمر في التشريح غير الحاد بشكل محيطي لإزالة أنسجة الصلبة عن المشيمية الكامنة تحتها، وادفع المشيمية برفق بعيداً عن الصلبة لتوسيع السديلة. قم بتشريح المشيمية برفق وبطريقة غير حادة بعيداً عن الصلبة حتى يصل الشق الذي تم إجراؤه بشكل عمودي على الليمبوس إلى العصب البصري، ويكون الشق الذي تم إجراؤه بشكل موازٍ لليمبوس بمقدار 45 درجة على الأقل من محيط العين. استخدم هذه السديلة لتكرار التشريح غير الحاد على الجانب الآخر من العين.بعد ذلك، قم بقص كلتا السفوحتين الصلبيتيتين لكشف منطقة واسعة من المشيمية. الآن، استمر في إجراء الشق بشكل غير حاد حول محيط العين. قم بتشريح المشيمية بعيداً عن الصلبة، وأزل أنسجة المشيمية والشبكية المتبقية داخل المنطقة المكشوفة.قم بإجراء شق في المشيمية بدءاً من العصب البصري. ثم استخدم الملاقط لإزالة الأنسجة برفق عن الجسم الزجاجي الموجود تحتها. استمر في التشريح غير الحاد وتقشير المشيمية حتى يتم الحصول على الجسم الزجاجي كاملاً وسليماً.استخدم بعد ذلك الحافة الصلبية الملتصقة بالقرنية لوضع الجسم الزجاجي بأكمله في الموقع المطلوب. في هذه المرحلة، يجب أن يظل الجسم الزجاجي مرتبطاً بالصلبة الأمامية والعدسة. أخيراً، قم بتشريح الجسم الزجاجي تشريحاً غير حاد من داخل الصلبة وحول العدسة.لإزالة الصلبة بالكامل، استخدم أداة غير حادة لكشط العدسة بعيداً عن الجسم الزجاجي حسب الضرورة. إن اتباع البروتوكول كما تم توضيحه للتو سيؤدي إلى تشريح ناجح للجسم الزجاجي مع بقاء اللب والقشرة سليمين، كما يتضح من قطع الشبكية المتبقية الملتصقة بقشرة الجسم الزجاجي. في هذه الصورة، يمكن بعد ذلك استخدام كامل الخلط الزجاجي السليم بعدة طرق لإجراء تجارب محددة تتعلق بوجود الفيروس في الدم.على سبيل المثال، تم هنا دراسة معدل انتشار الأكسجين في خلط vitreous humor سليم وثابت الوقت المقابل له في وجود vitreous cortex. وقد حدث انتشار الأكسجين على مدى فترة زمنية أطول. لا تنسَ أن التعامل مع الأدوات الحادة قد يكون خطيراً، ويجب دائماً اتخاذ الاحتياطات اللازمة مثل المناولة والتخلص السليم من الأدوات الحادة أثناء تنفيذ هذا الإجراء.

whole-vitreous-humor-dissection-for-vitreodynamic-analysis

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

هذا الفيديو يظهر تقنية فعالة للتمييز وتشريح مختلف هياكل شبه شفافة من الجسم الزجاجي في العين البشرية بعد الوفاة.

تشريح الإنسان عناصر الجسم الزجاجي لتحليل البروتين

تقنية يوضح تشريح استئصاله من الجسم الزجاجي والشبكية ، وعدسة العين من الماوس ، والفصل عن طريق الطرد المركزي ، وتوصيف المقايسات مع البروتين.

نزع الأحشاء من الشبكية والسائل الزجاجي ماوس للتحليلات البروتين

الرئيسيات غير البشرية (NHP) هي نموذج مثالي لدراسة العلاجات الخلوية للشبكية البشرية بسبب أوجه التشابه التشريحية والجينية. تصف هذه المخطوطة طريقة للزرع تحت الزرع تحت الجبهي للخلايا الظهارية الصباغية الشبكية في عين NHP واستراتيجيات لمنع المضاعفات أثناء الجراحة المرتبطة بالتلاعب البقعي.

زرع ظهارة صبغة الشبكية في نموذج الرئيسيات غير البشرية لأمراض الشبكية التنكسية

تقدم هذه الورقة بروتوكولا للتشريح الدقيق للعين في القوارض. تتضمن العملية استئصال مقلة العين جنبا إلى جنب مع الغشاء النيكتيتي (أي الجفن الثالث). ثم يتبع ذلك فصل كؤوس العين الخلفية والأمامية.

التشريح المجهري لعين القوارض

تم إنشاء إجراء لاستخراج الحمض النووي الخالي من الخلايا من الفكاهة الزجاجية والمائية لإجراء دراسات جزيئية لتشخيص سرطان الغدد الليمفاوية في الشبكية والجسم الزجاجي. توفر الطريقة القدرة على استخراج الحمض النووي بشكل متزامن من المكون الخلوي للعينة أو حجزه للاختبار الإضافي.

استخراج الحمض النووي الخالي من الخلايا لعينات الفكاهة الزجاجية والمائية لتشخيص ومراقبة سرطان الغدد الليمفاوية في الشبكية والجسم الزجاجي

يقدم هذا البروتوكول منصة مستودع حيوي متكاملة للجمع الموحد والتعليق والبنوك الحيوية للفكاهة المائية البشرية عالية الجودة والخزعات السائلة الزجاجية للتحليلات الجزيئية النهائية ، بما في ذلك البروتينات والأيض والسكريات.

البنوك الحيوية للخزعات السائلة المائية والزجاجية البشرية للتحليلات الجزيئية

تم تطوير مقايسة حماية لمراقبة مرونة الأوعية الدموية في شبكية العين حتى الموت من الإهانات المرتبطة بمرض السكري / اعتلال الشبكية السكري مثل الإجهاد التأكسدي والسيتوكينات.

فحص للكشف عن حماية الأوعية الدموية في شبكية العين من الموت المرتبط بمرض السكري في الفئران

يعد التقسيم الإجمالي الشامل والموحد للكرات الأرضية غير الورمية أمرا مهما للحصول على أقسام نسيجية مرضية عالية الجودة قابلة للتكرار. وترد هنا مبادئ توجيهية لتقدير الكرات الأرضية غير الورمية للبالغين والجنين. يتم عرض ومناقشة خيارات مختلفة لتقسيم الكرة الأرضية ، بما في ذلك معايير اتخاذ القرارات على أساس الحالة.

إجمالي الكرات الأرضية غير الورمية ، بما في ذلك عيون الجنين

هنا ، نقدم منهجية مفصلة لعزل شبكية العين عن عين الفأر لإجراء تجارب ممتدة خارج الجسم الحي . يؤكد هذا البروتوكول على جعل هذا النهج المتطلب تقنيا متاحا للباحثين الذين يرغبون في الاستفادة من سبل البحث التي يوفرها الحفاظ على الخلايا الدبقية في الشبكية في الموقع في الأنسجة الحية.

نموذج Ex Vivo Explant لدراسة التفاعلات الدبقية في شبكية العين الفأر

تصور هذه الطريقة البنية الأصلية لألياف الكولاجين في الجسم الزجاجي باستخدام الفحص المجهري للانعكاس متحد البؤر.

تحضير عيون الخنازير للفحص المجهري للانعكاس متحد البؤر لتصور شبكة ألياف الكولاجين الزجاجي

تعلم تقنية فعالة لعزل النوى والقشرة الزجاجية الكاملة من عيون الخنازير بعد الاستئصال. تُستخدم هذه الطريقة لدراسة الخصائص الفيزيائية والكيميائية للجسم الزجاجي في أبحاث طب العيون.

زجاجي كله فكاهة تشريح لتحليل Vitreodynamic

استكشف المزيد من الفيديوهات