المهندسة أوعية دموية العضلات رفرف

حتى الآن ، عادة ما يتم إعادة بناء عيوب الأنسجة السميكة عن طريق تطبيق سدائل الأنسجة الذاتية أو الأنسجة الهندسية. في هذا البروتوكول ، نقدم طريقة جديدة لهندسة سديلة الأنسجة الوعائية التي تحمل عنيقة ذاتية المنشأ ، لتكون بديلا عن اللوحات الذاتية.

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنشاء سديلة أنسجة وعائية جيدة ليتم استغلالها لإعادة بناء عيوب جدار البطن كاملة السماكة. يتم تحقيق ذلك عن طريق تحضير سقالة حمض بولي اللاكتيك القابلة للتحلل الحيوي من حمض اللاكتيك والكوجليكوليك. بعد ذلك ، يتم زرع الخلايا البطانية وخلايا العضلات والخلايا الليفية ، ويتم زراعة الكسب غير المشروع في المختبر للسماح للخلايا بالتجمع الذاتي.

ثم يتم زرع الأنسجة المهندسة حول الشريان الفخذي والأوردة للفأر حيث يخضع للتنحم مع الأوعية المضيفة ويصبح شديد الأوعية الدموية. أخيرا ، يتم نقل الأنسجة على شكل سديلة عنيقة إلى عيب في جدار البطن كامل السماكة. في النهاية ، يتم إثبات صحة الأوعية الدموية بالطعم عن طريق الموجات فوق الصوتية ، وحقن T dextran، والتلوين المناعي ل CD31 ، ويتم فحص تصلب السديلة باستخدام أداة اختبار ديناميكية حيوية.

تتمثل المزايا الرئيسية لهذا على الطرق الحالية في انخفاض حركة موقع المتبرع والجدوى العالية للرفرف المصمم هندسيا الذي يمكن استخدامه لبناء الأنسجة الرخوة كاملة السماكة. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في المرضى الذين يعانون من عيوب جدار البطن كاملة السماكة. سيتم توضيح الإجراء من قبل الدكتورة دانا إيجوزي ، جراح التجميل ، التي تعمل بالتعاون مع مختبري ، وستساعدها أنينا فريمان.

بعد تحضير السقالات وتضمين الخلايا وفقا لبروتوكول النص ، قم بالتعقيم بالأدوات الجراحية التالية:مقص مستقيم صغير ناعم ، مقص زنبركي ، ملقط مستقيم ذو رؤوس دقيقة ، ملقط مسنن ، ملقط هدسون ، حامل إبرة ، ومشرط شفرة رقم 15. تحضير خليط من 425 ميكرولتر من الكيتامين و 75 ميكرولتر من السيلودسين في أنبوب طرد مركزي دقيق ونقله إلى حقنة. ثم قم بتخفيف 0.3 ملليغرام لكل ملليلتر من البوبرينورفين واحد إلى 20 في محلول ملحي معقم.

بعد تخدير الماوس وفقا لبروتوكول النص ، ضعه على خشبة المسرح ، وقم بتسخينه إلى 37 درجة مئوية ، للحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية ، واستخدم ضمادة لاصقة لتثبيته على المسرح. باستخدام أطراف القطن ، استخدم اليود متبوعا بنسبة 70٪ من الإيثانول لتنظيف موقع الشق لإنشاء مجال عمل معقم. بعد التحقق من مستوى التخدير ، استخدم مشرطا لعمل شقوق عبر الجلد من الركبة إلى الرباط الإربي بالتوازي مع الأوعية الفخذية حتى يتم الكشف عن الشريان الفخذي والأوعية الوريدية.

استخدم المشابك أو الإبر لتثبيت الجلد. بعد ذلك ، باستخدام مقص الزنبرك والملقط ، بدءا من AV الفخذ أسفل profunda وفوق التشعب إلى الظنبوب والشرقى البطيني ، قم بعزل الشريان الفخذي والأوعية الوريدية بعناية عن الأنسجة المحيطة. اترك البروفوندا كما هو من أجل الحفاظ على تدفق الدم إلى الساق ومنع التروية اللاحقة.

بعد ذلك ، قم بطي الكسب غير المشروع المحضر السابق حول البطيناء البطيني الفخذي المكشوف أسفل البروفوندا وفوق التشعب إلى الظنبوب والشرينين البطينيين العظميين واستخدم 8-0 خيوط الحرير للانضمام إلى نهايتها. لضمان زرع الأوعية الدموية بواسطة الشعيرات الدموية التي تنبت من الأوعية الأذينية البطينية الفخذية فقط ، ضع قطعة من اللاتكس المعقم تحت الكسب غير المشروع ثم لفها حول الكسب غير المشروع والخياطة باستخدام 6-0 حرير. ثم استخدم 4-0 خيوط حريرية لإغلاق الجلد المغطى.

حقن البوبريورفين تحت الجلد مرتين يوميا لمدة يومين إلى ثلاثة أيام. راقب الفأر عن كثب حتى التعافي من التخدير وكل يوم بعد ذلك حتى يتم نقل الكسب غير المشروع على شكل سديلة. بعد أسبوع إلى أسبوعين من الزرع ، بعد تخدير الفأر ، ضع على المسرح الساخن وقم بتثبيته.

بعد تنظيف موقع الشقوق كما هو موضح سابقا في هذا الفيديو ، استخدم المقص والملقط لفتح الغرز في الجلد بعناية ، وباستخدام مشرط ، قم بعمل شق في الجلد بشكل عمودي على الرباط الإربي ، ويستمر عبر الجلد البطني. باستخدام مشرط ، قم بعمل شق في جدار البطن البطني. قم بإزالة قطعة اللاتكس بعناية وكشف السديلة الوعائية.

ثم باستخدام المقص والملقط ، قم بتشريح سديلة الأنسجة من الأنسجة المحيطة. مع 8-0 خياطة حريرية ، تربط الطرف البعيد من البطينات البطينية الفخذية لمنع النزيف من البطيناء البطيني. ثم قم بالكي الأذيني البطيني عند الركبة ، بعيدا عن الأنسجة المزروعة المطوية و 8-0 دروز. انقل البطينية البطينية الفخذية المغلفة بالطعم برفق باتجاه جدار البطن البطني ، وتجنب تلف الشريان ، لتحديد المسافة التي يجب أن يحدث فيها عيب السماكة الكاملة.

باستخدام مقص زنبركي ، قم بعمل شق في عضلة البطن المستقيمة وقم بإزالة جزء حوالي سنتيمتر واحد × 0.8 سم من العضلة مع الجلد المغطى. انقل البطينية البطينية الفخذية المغلفة بالطعم الوعائي كسديلة محورية إلى عيب كامل السماكة في جدار البطن البطني باستخدام 8-0 خيوط الحرير لمنع الفتق. خياطة السديلة على الأنسجة العضلية المحيطة.

ثم مع 4-0 حرير ، خياطة جلد الساق. اترك الجلد البطني مكشوفا لتقليد تأثير عيب كامل في جدار البطن. باستخدام شاش معالج باليود وضمادة معقمة ، قم بتغطية الجرح في الجلد لمنع تلوث المنطقة المكشوفة.

قم بتطبيق البوبرينورفين كما هو موضح سابقا في هذا الفيديو. راقب عن كثب حتى الشفاء من التخدير وكل يوم بعد ذلك حتى تعافي السديلة للدراسات الموضحة في بروتوكول النص. بعد أسبوع وأسبوعين من الزرع ، كشفت الملاحظة الإجمالية لمنطقة الكسب غير المشروع عن ترقيع أنسجة قابلة للحياة والأوعية الدموية بشكل كبير على النحو الذي يحدده التلوين المناعي الإيجابي CD31.

كانت ترقيع الأنسجة أيضا عالية الانتشار كما يتضح من حقن وريد الذيل FITC-dextaren وقياسات الموجات فوق الصوتية. يوضح هذا الرسم البياني أن العديد من الأوعية قد لوحظت بالفعل بعد أسبوع واحد من الزرع ، وهو رقم ارتفع بشكل ملحوظ بعد أسبوع إضافي بالقرب من الأوعية البطينية البطينية. كما هو موضح هنا ، تم تأكيد سالكية ما بعد الفخذ وسلامته بعد زرع الكسب غير المشروع عن طريق التصوير بالموجات فوق الصوتية في وضع دوبلر الملون.

يمثل اللونان الأزرق والأحمر تدفق الدم في الكسب غير المشروع. علاوة على ذلك ، كشف الفحص الجرافيكي بالموجات فوق الصوتية عن التروية داخل منطقة الكسب غير المشروع ، والتي كانت أعلى قليلا بعد الزرع مقارنة بأسبوع واحد. كشف الفحص الإجمالي لللوحات بعد أسبوع واحد من النقل أنها خضعت لارتباط قوي بمحيطها.

عند مقارنة اللوحات المدمجة في الخلايا الوعائية مسبقا ، أظهرت الطعوم غير الوعائية اللاخلوية الأولى خصائص ميكانيكية فائقة ، بما في ذلك الصلابة والقوة ، مما أدى أيضا إلى تقليل التفكك والفتق بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في حوالي 30 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. بعد تطويرها ، تمهد هذه التقنية الطريق لجراحي التجميل لعلاج المرضى الذين يعانون من عيب كامل السماكة في جدار البطن بالإضافة إلى عيوب أخرى معقدة وكبيرة في الأنسجة الرخوة.