تردد خلط الماسح الكشف المغناطيسي لتصوير الجزيئات المغناطيسية في عينات مستو

الهدف العام من هذا الإجراء هو استخدام عمليات مسح الكشف المغناطيسي المختلطة ثنائية الأبعاد لتحليل العينات البيولوجية الرقيقة التي تحتوي على جزيئات مغناطيسية نانوية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الكيمياء الحيوية والتشخيص الطبي مثل تحليل أقسام الأنسجة التي تستخدم الجسيمات المغناطيسية النانوية كمركب تسوية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بلقاء توزيع الجسيمات النانوية.

سيعرض الإجراء Eul-Gyoon Lim و Jae-chan Jeong و Jiho Chang ، ثلاثة باحثين من مختبري. وينبغي تصميم رأس القياس p-FMMD وفقا لبروتوكولات النص. يتم إعطاء التفاصيل حول جميع مواصفات الأسلاك واللف.

تم تفصيل التجميع والإعداد في بروتوكول النص. يتضمن ذلك تعديل توازن التردد العالي والجهد المستحث. بعد ذلك ، يتم إعداد إلكترونيات القياس ، والتي تشمل قسم الإثارة وأقسام برنامج التشغيل منخفض وعالي التردد وقسم الكشف في FMMD.

بعد ذلك ، يتم إعداد كل من المضخم الأولي ، ومزيل التشكيل الأول ، ومكبر الصوت الوسيط مع الترشيح ، ومزيل التشكيل الثاني ، ومكبر الصوت النهائي مع التصفية. أخيرا ، يتم تركيب الماسح الضوئي ثنائي الأبعاد ومعالجه بجهاز تحكم الكمبيوتر. لهذا الإجراء ، لديك جزيئات المغنتيت بأقطار 50 نانومتر و 100 نانومتر وجزيئات المغنيت بقطر 1 ميكرون.

اغسل محاليل مخزون الجسيمات في الماء واجمع الجزيئات باستخدام مغناطيس. تخلص من الماء واغسلهما مرتين أخريين. ثم قم بتخفيف الجزيئات إلى 25 ملليغرام لكل مليلتر باستخدام الماء المقطر.

من محلول الجسيمات 100 نانومتر ، قم بعمل سلسلة تخفيف من خمسة أضعاف لتركيزات خمسة وواحد و0.2 و 0.04 ملليغرام لكل ملليلتر. بعد ذلك ، قم بإخراج قطع من ورق النشاف الامتصاصي باستخدام لكمة الخزعة. بعد ذلك ، انقع اللكمات الورقية في محاليل الجسيمات المختلفة 100 نانومتر لمدة 30 ثانية.

بعد النقع ، اترك الورق يجف في الهواء. بعد ذلك ، قم بإعداد قطع مقطوعة من النيتروسليلوز بحجم اثنين في 18 ملم. انقع قطعة واحدة من النيتروسليلوز في محلول جزيئات غير مخفف بقطر ميكرون واحد لمدة 10 إلى 15 ثانية ، وجففها بالمجفف باستخدام هواء غير ساخن.

انقع القطعة الأخرى من النيتروسليلوز في محلولين بتركيزات مختلفة لعمل تدرج تركيز ، وجففها مثل الآخر. أخيرا ، باستخدام العمل الشعري ، قم بتحميل أنبوب شعري ب 30 ميكرولتر من محلول الجسيمات غير المخفف بقطر 50 نانومتر. بعد ذلك ، قم بتحميل الشعيرات الدموية الثانية ب 10 ميكرولتر من تخفيف 20 مرة من نفس الجسيمات.

يجب أن يكون اتجاه المسح أقصر من البعدين المستويين. اضبط نقطة البداية وطول المسح الضوئي باستخدام علامات المسطرة على اللوحة. أدخل هذه القيم في برنامج المسح الضوئي ، ثم قم بتعيين إزاحة المسح لتكون أصغر قليلا من الدقة المكانية التي يمكن تحقيقها.

بعد ذلك ، اضبط سرعة المسح مع مراعاة تقليل الإشارة الذي يحدث بسبب تصفية التمرير المنخفض. استخدم قيمة تتراوح بين واحد وسبعة ملليمترات لكل ثانية. الآن ، اضبط مسافة الخطوة.

يتم حساب إجمالي وقت المسح الضوئي باستخدام صيغة متوفرة في بروتوكول النص. قبل المسح ، قم بتأمين العينة بشريط لاصق. بالنسبة للفحص ، قم بإنشاء ملف NVD لبرنامج التحكم في الحركة.

افتح برنامج التحكم في الحركة PMC وقم بتحميل ملف NVD. اضغط على زر الصفحة الرئيسية لتعيين نقاط الأصل الميكانيكية. أغلق برنامج التحكم في الحركة وارجع إلى برنامج الماسح الضوئي.

ثم قم بتنفيذ عمليات الفحص. بالنسبة لهذه عمليات المسح ، تم تحليل شدة الإشارة كدالة لتركيز الخرز المغناطيسي وكانت سرعة المسح 10 ملليمترات في الدقيقة. تم العثور على علاقة قوية بين تركيز الخرزة والإشارة.

تم فحص العلاقة بين سرعة مرحلة المسح وشدة الإشارة باستخدام كريات ورقية مبللة بالخرز المغناطيسي. تم الحصول على إشارات أعلى بسرعات مسح أقل. أظهرت مقارنة فحص p-FMMD مع صورة بصرية لعينة غشاء النيتروسليلوز بوضوح فائدة p-FMMD كماسح ضوئي MPI.

يرجع اتساع الفحص بشكل أساسي إلى ملف تعريف حساسية رأس القياس. وبالمثل ، تم تصوير شعيريين مملوءين بتركيزات مختلفة من الجسيمات المغناطيسية ومسحهما ضوئيا بواسطة p-FMMD. من الواضح أن التركيزات التي تختلف بمعامل 20 يمكن تمييزها بسهولة.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تحليل 10 عينات تحتوي على جزيئات مغناطيسية نانوية باستخدام تقنية FMMD. بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في حوالي ساعة واحدة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحث في مجال الكيمياء الحيوية والتشخيص الطبي لاستكشاف توزيع الجسيمات النانوية المغناطيسية التي تستشهد بالأحرى بأجسام مضادة محددة في نظام الأعضاء.