إثراء وتحليل الذكور الماوس الموجات فوق الصوتية النطق (أوسف) الأغاني

الهدف العام من هذا الإجراء هو جمع وإجراء تحليل صوتي بشكل موثوق على الأصوات بالموجات فوق الصوتية للفأر البالغ أو USVs عبر مجموعة متنوعة من السياقات الاجتماعية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول التواصل الصوتي والاضطرابات المرتبطة به. بما في ذلك الاضطرابات العصبية والنفسية واضطرابات التوحد باستخدام نماذج الفئران.

تتمثل إحدى المزايا الرئيسية لهذه التقنية في أنها توفر وسيلة للمرء لاستنباط USV في سياقات مختلفة. بشكل عام ، قد يكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لجعل فئرانهم تتصرف ، لذلك عليك التعامل مع الفئران بعناية ولطف من أجل حملها على الغناء. السكن القياسي للحيوانات كاف لهذا البروتوكول.

قبل ثلاثة أيام من إجراء التسجيل في أقفاص محايدة ، قم بتعريض الذكور لأنثى ناضجة ومتقبلة جنسيا بين عشية وضحاها. في كل قفص يمكن إقران ما يصل إلى ثلاثة ذكور بأنثى واحدة. في اليوم التالي قم بإزالة الإناث.

احتفظ بالذكور في مجموعاتهم لمدة يومين آخرين على الأقل قبل جلسة التسجيل الأولى. لتسجيل USV من ذكر مستعد ، انقل برفق من الذيل إلى قفص نظيف بدون فراش. ضع هذا القفص داخل صندوق عازل للصوت.

ثم قم بتغطية القفص بغطاء سلكي مفتوح. أغلق الصندوق واترك يعتاد عليه لمدة 15 دقيقة وفي الوقت نفسه قم بإعداد منبه للفحص كما هو موضح في القسم التالي. لاستخدام عينات البول الطازجة ، اجمعها في غضون خمس دقائق من جلسة التسجيل.

أولا أمسك الفأر من القفص كما هو الحال بالنسبة لحقن المخدرات. ثم باستخدام طرف قطني تمسك به ملاقط ، افركي برفق وادفعي مثانة الحيوان لاستخراج قطرة من البول وامتصاصها تماما مع القطن. بعد ذلك ، حدد فأرة من قفص مختلف وكرر العملية باستخدام نفس طرف القطن.

من المهم استخدام مزيج من البول الطازج. قم بتخزين طرف القطن على طبق نظيف لحين الحاجة لإعداد أنثى تنبيهية كمحفز ، حدد واحدة في مرحلة ما قبل الشبق أو الشبق. سيكون للفأر فتحة مهبلية واسعة وأنسجة محيطة باللون الوردي.

اعزل مثل هذه الأنثى لحين الحاجة. لتحضير فأر مخدر ، ما عليك سوى توفير التخدير كالمعتاد. تأكد من حالة التخدير بقرصة إصبع القدم وقم بتطبيق مرهم العين.

لحين الحاجة ، احتفظ بالحيوان المخدر في قفص نظيف على منشفة ورقية مع وسادة حرارية أسفل القفص مضبوطة على الحد الأدنى من الحرارة. تأكد من فحص تنفس ودرجة حرارة الجسم بانتظام. يمكن استخدام الفأر المخدر في ما يصل إلى ثلاث جلسات متتالية.

عندما تكون جاهزا للتسجيل ، انقر فوق زر التسجيل في البرنامج أثناء تقديم التحفيز في نفس الوقت. لتقديم البول أو حيوان حي ، ما عليك سوى وضعه داخل القفص. ومع ذلك ، لتقديم مخدر ، ضعه فوق غطاء الأقفاص.

ثم أغلق الصندوق بهدوء وسجل USV لمدة خمس دقائق أو نحو ذلك. لإنهاء التسجيل ، اضغط على مربع التوقف في البرنامج. تحقق من المخدر كل 15 دقيقة على الأقل.

حتى يستعيد الركوع القصي. ثم يمكن إعادته إلى قفص منزله. بين الاختبارات ، قم بتنظيف قفص الاختبار بنسبة 70٪ من الكحول والماء المقطر.

قم بمعالجة التسجيلات الصوتية باستخدام برنامج محلل أغنية الماوس. وبالتالي يمكن تحليل المقطع اللفظي والبنية الصوتية وبناء الجملة وإعادة هيكلتها للتشغيل حسب الحاجة. اغسل جهاز التشغيل أولا بالكحول بنسبة 70٪ متبوعا بالماء المقطر.

استخدم متاهة y سوداء اللون وغير شفافة بأذرع 30 سم. في الأطراف القصوى من ذراعين ، تم حفر ثقوب على مستوى الأرض تناسب مكبرات الصوت بالموجات فوق الصوتية. بعد الغسيل ، جفف المتاهة بالمنشفة.

بمجرد التجفيف ، قم بإعداده باستخدام مكبرات الصوت وكاميرا الفيديو العلوية المثبتة. لبدء الاختبار ، ضع الأنثى أولا في المتاهة لمدة 10 دقائق. بعد 10 دقائق إذا لم تكن الأنثى في ذراع البداية ، ادفعها برفق إلى ذراع البداية وأغلق نافذة الفصل البلاستيكية برفق.

ثم ابدأ تسجيل الفيديو وابدأ التسجيلات الصوتية عند التشغيل الحلقي. على سبيل المثال ، قم بتشغيل أغنية تم التقاطها من التحفيز البولي في إحدى الذراعين وتشغيل أغنية تم التقاطها من تحفيز الأنثى في الذراع الأخرى. الآن اسمح للأنثى باستكشاف المتاهة لمدة خمس دقائق.

ويشكل هذا الجلسة جلسة واحدة. بعد خمس دقائق أوقف التسجيل وأعد الأنثى إلى ذراع البداية. احتفظ بها هناك لمدة دقيقة واحدة أثناء التنظيف باستخدام الماء المقطر لإزالة أي بول أو براز.

افعل ذلك بين جميع الجلسات. بالنسبة للجلسة الثانية ، قم بتبديل التشغيل المسجل إلى الذراعين المعاكسين وسجل الأنثى وهي تستكشف هذا السيناريو لمدة خمس دقائق. بالنسبة للجلستين الثالثة والرابعة ، كرر معلمي الجلسة السابقة ليصبح المجموع 20 دقيقة من تسجيلات الاختبار.

أوقف دائما تسجيل الفيديو في نهاية جميع الجلسات. بعد أسبوع ، قم بإجراء اختبار آخر على نفس المجموعة من. لكن استخدم نماذج أغنية مختلفة.

افعل ذلك لتعزيز موثوقية النتائج. للتحليل ، قم بقياس الوقت الذي تقضيه الإناث في كل ذراع لكل جلسة. باستخدام البروتوكول المقدم ، تم تمييز التغييرات في السلوك الصوتي وبناء جملة ذكور B6D2F1J الفئران.

خلال جلسة تسجيل مدتها خمس دقائق ، استجاب الذكر العادي بشكل مختلف تماما للمنبهات الثلاثة. قام الذكور أيضا بتغيير ذخيرتهم عبر السياق. على سبيل المثال ، استجابة للبول الطازج ، أنتج الذكور جزءا أعلى بكثير من الأصوات متعددة المقاطع في أغانيهم.

الذكور أيضا بتغيير السمات الصوتية للمقاطع الفردية عبر السياق. على سبيل المثال ، غنوا مقاطع معينة بسعة وعرض نطاق ترددي أعلى في سياق بول الإناث. وعند نقاء طيفي أعلى في السياق الأنثوي المستيقظ.

في اختبار تفضيل الأغاني ، اختارت الإناث في متاهة y قضاء المزيد من الوقت في الذراع مع الأغاني المعقدة التي تحتوي على نطقين أو أكثر من المقاطع المتعددة. على عكس الذراع المعاكسة حيث تم تشغيل الأغاني البسيطة فقط. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية جمع USV للفأر عبر مجموعة متنوعة من السياقات الاجتماعية ، وكيفية تشغيلها مرة أخرى على الفئران ، وكيفية إجراء تحليل صوتي وتسلسلي لأصواتهم.

بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء تسجيلات السلوك في غضون خمس إلى 10 دقائق لكل ماوس. يجب أن تترك عدة ساعات للتحليل. وتأكد من التعامل مع الفئران بحذر ، حتى لا تغير الاستجابات السلوكية.