إعادة برمجة الخلايا الليفية الفأر الجنينية مع عوامل النسخ للحث على برنامج مكون للدم

الهدف العام من بروتوكول الحث الدموي هذا هو التحريض على عملية تنموية في الخلايا الليفية للفئران من خلال الإفراط في التعبير عن عامل النسخ لتوليد خلايا سلائف مكونة للدم في المختبر تنتج خلايا مكونة للدم عند زراعة طويلة. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال البرمجة المكونة للدم مثل ما إذا كان يمكن تطوير بروتوكول للحصول على HSCs حقيقية من جديد قادرة على تعدد الأنساب والتطعيم. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه من خلال الإفراط في التعبير عن الحد الأدنى من عوامل النسخ ، يمكن بدء عملية التطور في الخلايا المعاد برمجتها التي لا تتطلب السفر عبر وسيط متعدد القدرات.

بعد زراعة الخلايا الليفية الجنينية للفأر أو MEFS ، وإنتاج الفيروس وفقا لبروتوكول النص ، استخدم 0.1 في المائة من الجيلاتين في PBS لطلاء ألواح 6 آبار مسبقا. التأكد من أن الجيلاتين يغطي كامل مساحة البئر. ضع الأطباق في حاضنة 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة على الأقل.