أنيونية البلمرة من كوبوليمر محبة للجهتين لإعداد كتلة كوبوليمر المذيلات استقرت بواسطة تفاعلات التراص π-π

الهدف العام من هذا العمل هو توضيح الخطوات الحاسمة اللازمة لتخليق مواد البوليمر المشترك عن طريق البلمرة الأنيونية المفتوحة للحلقة ، وإظهار التدفق الضروري للدراسات لصياغة مذيلات البوليمر المشترك للكتلة لدواء كاره للماء. يوضح هذا البروتوكول التنفيذ السليم للخطوات والإجراءات اللازمة لتخليق البوليمر المشترك للكتلة عن طريق البلمرة الأنيونية. الميزة الكبيرة لفتح الحلقة للبلمرة الأنيونية هي تخليق المواد ذات الإنتاجية الجيدة ، وتشتت منخفض الملوث.

بالإضافة إلى قابلية التوسع في العملية. هذا وقت مثير لتوصيل الأدوية البوليمرية. مع عدد من الأدوية التي تعتمد على تركيبة وكتلة المذيلات البوليمر المشترك ، وهي الآن في مرحلة متأخرة من التطور قبل السريري أو السريري.

إعداد الكواشف والمواد اللازمة للنقل كما هو موضح في بروتوكول النص. تزن ميثوكسي بولي إيثيلين جلايكول بوزن جزيئي يبلغ 5 ، 000. أضف mPEG إلى قارورة مجففة تحتوي على قضيب تقليب ، وأغلق محول التنظيف بحاجز في الأعلى.

قم بتوصيل القارورة بالمشعب ، وقم بتثبيت القارورة لمدة دقيقتين إلى ثلاث دقائق باستخدام الأرجون. أدر الصمام إلى وضع الفراغ لوضع القارورة. قم بتدوير القارورة يدويا ، وجفف وعاء التفاعل بشكل متجانس ، باستخدام مجفف شعر أو مسدس حراري ، حتى يذوب mPEG.

بعد دقيقة واحدة ، قم بكسر الفراغ عن طريق تدوير الصمام الموجود على المشعب باتجاه وضع الأرجون مع عدة لقطات سريعة لتبريد القارورة. احتفظ بالمبدئ الكبير البوليمري تحت الفراغ لمدة ساعتين تقريبا ، ثم تحت الأرجون قبل أن يبدأ التفاعل. بعد ذلك ، قم بتركيب جهازين للتقطير عالي الفراغ تم تجفيفهما مسبقا في فرن تحت الغطاء.

جهاز واحد مخصص لتقطير DMSO ، وجهاز واحد لتقطير المونومر ، فينيل جلسرين الأثير. قم بتوصيل القوارير المنفصلة بالجهازين ، وقم بتثبيت كل منهما على رف تسخين نصف كروي ، أو في حمام زيت. قم بتوصيل الماء البارد بالجزء العلوي من كل جهاز ، وبالمشعب.

تأكد من أن كل جهاز آمن ومحكم الغلق جيدا. قم بتعطيم الفراغ عبر الصمام. اضبط التسخين عبر جهاز التحكم في درجة الحرارة ، وابدأ في تقليب المحاليل.

بعد ساعتين من تقطير الدورة الدموية ل DMSO ، أغلق صمام التفريغ العالي لجمع ما يقرب من 20 مل من المحلول. بعد ذلك ، حرر الكسر في القارورة ، وكرر العملية مرة أخرى ، لضمان نقاء الكسر المطلوب الذي يتم جمعه لاحقا. قم بتسخين القارورة التي تحتوي على mPEG تحت الفراغ باستخدام المسدس الحراري حتى يذوب البوليمر ، ثم الجلوس مرة أخرى مع الأرجون.

بعد ساعتين ، أغلق صمام التفريغ العالي ، واجمع حجم المذيب. توقف عن التسخين ، وكسر الفراغ من المشعب. حرر الأرجون في الغرفة ، كما هو موضح سابقا.

تحت ضغط إيجابي من الأرجون ، قم بتوصيل جانب واحد من القناة بأسطوانة متدرجة ، أو مباشرة بالقارورة التي تحتوي على mPEG ، أيضا تحت الأرجون ، واغمر الطرف الآخر بعناية في الجزء المقطر حديثا. قم بتوصيل فقاعات إضافية بالقارورة ، وأغلق تدفق الأرجون ، واستخدم ضغط الأرجون فقط من جهاز التقطير. لتجنب أي حوادث ناتجة عن ضغط الأرجون ، افتح محبس الزجاج لمدة ثانية إلى ثانيتين ، وأعد أغلقه لمواصلة تدفق DMSO حتى يكتمل النقل الكامل.

بعد ذلك ، تحت الأرجون ، قم بتوصيل جانب واحد من القناة من الأسطوانة المتدرجة المجففة ، المختومة بواسطة الحاجز ، بمحلول مخزون من 0.3 مولار من النفثالين البوتاسيوم. بعد ذلك ، أضف فقاعات إضافية إلى الأسطوانة المتدرجة ، وأغلق تدفق الأرجون إلى الأسطوانة ، وتحت ضغط الأرجون الموجب ، انقل خمسة ملليلتر من 0.3 مولار من النفثالين البوتاسيوم عبر التقنح من محلول المخزون ، إلى الأسطوانة المتدرجة. أدخل إبرة أخرى من المشعب في الأسطوانة ، وقم بإزالة الفقاعات الإضافية.

قم بإزالة القنية المتصلة بمحلول المخزون ، وأدخلها بعناية ، وأدخلها بسرعة في قارورة التفاعل ، وقم بتوصيل فقاعات إضافية. بعد ذلك ، كما هو موضح سابقا ، أضف القاعدة قطرة قطرة حتى يصبح المحلول مظلما. بعد الاختفاء البطيء للون ، أضف جزءا آخر حتى يظهر اللون الداكن مرة أخرى ، وكرر ذلك حتى النقل الكامل.

كما هو موضح سابقا ، انقل الحجم المطلوب من المونومر إلى التفاعل للوصول إلى درجة بلمرة البوليفينول جلايكول الأثير من حوالي 18 إلى 20 وحدة. اترك التفاعل لمدة 48 ساعة عند 80 درجة مئوية ، تحت جو الأرجون مع التحريك المستمر ، لضمان البلمرة الكاملة. قم بإخماد التفاعل بإضافة قطرات من حمض الهيدروكلوريك العادي والميثانول ، كما لوحظ من خلال اختفاء اللون.

استخرج النفثالين من محلول DMSO بالهكسان. قم بإزالة ما يقرب من 70 مل من DMSO عن طريق التقطير تحت الفراغ. قم بتبريد محلول الملاط وأضف 15 مل من THF.

قم بإزالة الملح من محلول الملاط عن طريق الطرد المركزي عند 5 ، 000 مرة جم لمدة عشر دقائق. انقل المادة الطافية ، وأضف قطريا إلى 500 مل من ثنائي إيثيل الأثير البارد. اجمع الراسب عن طريق الترشيح أو الطرد المركزي.

بعد تكرار هطول الأمطار مرتين ، جفف الراسب في درجة حرارة الغرفة تحت غطاء المحرك ، طوال الليل ، ثم تحت الفراغ عند 30 درجة مئوية لمدة 24 إلى 48 ساعة ، للحصول على عائد 85٪ البوليمر المشترك جاهز الآن للتوصيف ، كما هو موضح في بروتوكول النص. قم بإذابة 12 ملليغرام من دوكسوروبيسين في مليلتر واحد من الأسيتونيتريل. أضف 10 ميكرولترات من ثلاثي إيثيل أمين ، واترك المحلول يقلب في الظلام لمدة ساعتين.

قم بإذابة 45 ملليغرام من البوليمر المشترك في مليلتر واحد من THF ، وحرك لنفس الفترة الزمنية. أضف محلول البوليمر المشترك إلى محلول دوكسوروبيسين ، واشطف البوليمر المشترك المتبقي الذي يحتوي على كمية إضافية من THF. بعد ذلك ، أضف خليط البوليمر المشترك والدواء بالتنقيط إلى 20 مليلتر يحتوي على 15 مل من محلول ملحي 0.9٪ مع التحريك.

انقل المحلول إلى كيس غسيل الكلى ، وقم بغسيل الكلى مقابل 500 مل من محلول ملحي 0.9٪. انقل غسيل الكلى إلى أنبوب سعة 15 مليلتر وجهاز طرد مركزي عند 5 ، 000 مرة ، لمدة 15 دقيقة. بعد ذلك ، انقل المادة الطافية إلى نظام ترشيح فائق يحتوي على غشاء غسيل الكلى.

ضع محول التحريك في نظام الترشيح الفائق ، وأغلق الغطاء ، وافتحه على تيار من النيتروجين. ركز محلول المذيلات الكوبوليمر إلى حجم أربعة ملليلتر ، وأضف ستة ملليلتر من المحلول الملحي الطازج. بعد ذلك ، ركز محلول المذيلات الكوبوليمر إلى 4 ملليلتر مرة أخرى ، واشطف الغرفة ب 0.5 مل من المحلول الملحي ، وأضفها إلى المحلول.

قم بتخزين المحلول الناتج في شخات بنية اللون في درجة حرارة الغرفة في الظلام ، قبل الاستخدام مرة أخرى. تم استخدام البلمرة الأنيونية لفتح الحلقة لإثير فينيل الجلسرين على المبدئ الكبير mPEG لإعداد البوليمر المشترك ثنائي الكتلة البرمائية بواسطة البروتونات العميقة لمجموعة الهيدروكسيل من mPEG. استخدام النفثالين البوتاسيوم كأنيون جذري ، يليه بلمرة مونومر الأثير فينيل الجلسرين.

أكد توصيف البوليمر المشترك للكتلة بواسطة كروماتوغرافيا نفاذية الهلام ، وتحليل التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي للبروتون توزيعا ضيقا للوزن الجزيئي مع درجة بلمرة فينيل جلسرين الأثير من 15 وحدة. في وسائط المكتسبات ، تتجمع البوليمرات المشتركة للكتل البرمائية لتشكيل مذيلات تتكون من نواة كارهة للماء محاطة بقشرة محبة للماء. أكد المجهر الإلكتروني للإرسال أن مورفولوجيا كروية ويشير تشتت الضوء الديناميكي إلى قطر هيدروديناميكي يبلغ 25 نانو متر.

تم تغليف دوكسوروبيسين بنجاح في كتلة مذيلات البوليمر المشترك. بالمقارنة مع الدواء البروتوني الحر في المحلول ، أكد التبريد الذاتي للدوكسوروبيسين ، الذي لوحظ بواسطة التحليل الطيفي الفلوري ، دمج الدواء في المذيلات البوليمرية ، بقدرة تحميل دواء تصل إلى 14٪ يشير ملف إطلاق دوكسوروبيسين ، من مذيلات البوليمر المشترك ، إلى استقرار جيد لهذه التركيبة عند درجة الحموضة المحايدة. والإفراج المستمر عن الدواء على مدى أربعة أيام في ظل ظروف فسيولوجية ذات صلة.

بمجرد إتقانها ، يمكن أن تساعد هذه التقنية المتدربين في العلوم الصيدلانية على إعداد البوليمرات المشتركة ثنائية الكتلة التوليفية لتطبيقها في توصيل الأدوية. يمكن تطبيق هذا الإجراء الموضح هنا لتخليق مجموعة واسعة من البوليمرات المشتركة مع PEG كبادئ. تم التركيز هنا على ضمان الممارسات المختبرية الجيدة ، التي توفر ظروفا لا مائية ، وتؤدي إلى مواد عالية الجودة.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لدي فهم جيد لكيفية العمل في ظل ظروف لامائية ويجب أن أكون الآية قادرة على تطبيق هذه الخطوات لتخليق البوليستر PEG أو مواد البوليستر PEG. عند متابعة أي من الأبحاث الموصوفة ، من الضروري أن تتذكر أنك تعمل في ظل ظروف خاضعة للرقابة ، مع مذيبات عضوية خطرة محتملة ، وعوامل أخرى. علاوة على ذلك ، فإن جميع الأدوية سامة ويجب التعامل معها باستخدام الاحتياطات اللازمة.

مثل ارتداء القفازات ومعطف المختبر والأحذية القريبة من أصابع القدم وكذلك ارتداء قناع عندما تريد وزن الأدوية.