بروتوكول الأمثل لRadiolabeling كفاءة من جزيئات الذهب عن طريق استخدام ¹²⁵ أزيد المجموعة الترقيعي المسمى أنا

الهدف العام لهذا البروتوكول هو توفير طريقة اصطناعية فعالة وسريعة لجزيئات نانو الذهب المسماة باليود المشع باستخدام تفاعل النقر الحر للنحاس الذي تم عززه السلالة. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الكيمياء الإشعاعية مثل تخليق النظائر الراديوية المسمى حوالي ثلاث سنوات بالإضافة إلى مجسات التصوير المنتظمة لدراسات التصوير بالوسادة أو المواصفات. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن تصنيع واحد إلى خمسة يود مصنف بجزيئات ذهبية بكفاءة باستخدام مجموعة الأطراف الاصطناعية الأزيد ذات الإنتاجية الكيميائية الإشعاعية الممتازة والنقاء الكيميائي الإشعاعي.

العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم خطوات التقييم الراديوي. نظرا لأن مثل هذه الإجراءات تتطلب منشأة مناسبة والتعامل مع تجربة وضع العلامات اللاسلكية. إلى جانب الدراسة ، سيقوم طالب الإذاعة Ha Eun Shim بعرض الإجراء.

لإجراء تفاعل اليود الراديوي ، أضف محلول سلائف إلى أنبوب 1.5 مل. أضف 10 ميكرولترات من حمض الأسيتيك إلى محلول السلائف في درجة حرارة الغرفة. ثم أضف 150 ميجا بيكاريل من اليود 125 في 50 ميكرولتر ، 0.1 مولار هيدروكسيد الصوديوم إلى خليط التفاعل.

أضف محلول الكلورامين T وأغلق أنبوب الطرد المركزي الدقيق الذي يحتوي على خليط التفاعل. احتضان خليط التفاعل في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس عشرة دقيقة حتى يكتمل تفاعل اليود الراديوي. ثم أضف محلول ميتابيسلفيت الصوديوم إلى خليط التفاعل لإخماد تفاعل اليود الراديو.

اسحب 0.2 ميكرولتر من المنتج الخام ثم قم بتخفيفه ب 100 ميكرولتر من 50٪ أسيتو نيتريل في الماء للحصول على كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ، أو تحليل HPLC. تحليل المنتج الخام المخفف باستخدام HPLC الراديوي التحليلي ذو الطور العكسي. انقل خليط التفاعل بالكامل إلى قارورة HPLC.

اشطف أنبوب التفاعل ب 0.5 مل من أسيتو نيتريل وأضف الشطف إلى نفس قارورة الحقن. خفف المحلول الذي تم جمعه بمل واحد من الماء. لتنقية المنتج الخام باستخدام HPLC التعويضي ، قم بحقن المنتج الخام على HPLC راديوي تحضيري.

اجمع الذروة المشعة التي تمثل اليود 125 المسمى الأزيد في أنبوب اختبار زجاجي. قم بقياس العائد الكيميائي الراديوي للكسر باستخدام معاير جرعة النشاط الإشعاعي وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. ثم حقن المنتج المنقى على راديو تحليلي HPLC باستخدام نفس شروط HPLC لتحديد النقاء الكيميائي الراديوي للمنتج.

لإجراء استخراج الطور الصلب للمنتج ، قم بتخفيف الجزء الذي يحتوي على المنتج المطلوب ب 40 مل من الماء النقي. أضف المحلول المخفف إلى خرطوشة TC18 مكيفة مسبقا. اغسل الخرطوشة ب 15 مل إضافية من الماء.

قم بإزالة المنتج المحاصر في الخرطوشة ب 2 مل من الأسيتون في قارورة زجاجية سعة 10 مل محمية بدرع من الرصاص. قم بقياس النشاط الإشعاعي للمنتج المغطى باستخدام معاير جرعة النشاط الإشعاعي وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. بعد تبخير الأسيتون ، قم بإذابة البقايا مع 100 إلى 200 ميكرولتر من DMSO لخطوة وضع العلامات اللاسلكية التالية.

قم بإجراء تخليق جزيئات الذهب النانوية المعدلة من مجموعة DBCO كما هو موضح في بروتوكول النص. تحضير محلول مركز لجزيئات الذهب النانوية المعدلة من مجموعة DBCO باستخدام الطرد المركزي. واضبط تركيز جزيئات الذهب النانوية على ضرسين صغيرين.

أضف 4.1 ميجا بيكاريل من اليود 125 المسمى أزيد في 5 ميكرولترات من DMSO إلى تعليق 50 ميكرولترا من جزيئات الذهب النانوية المولية الدقيقة. احتضان خليط التفاعل الناتج عند 40 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة. اسحب 0.2 ميكرولتر من المنتج الخام وقم بتطبيقه على كروماتوغرافيا طبقة رقيقة مشفرة بالسيليكا أو لوحة TLC.

تطوير لوحة TLC باستخدام أسيتات الإيثيل كمرحلة متحركة. ضع لوحة TLC على ماسح ضوئي لاسلكي TLC وقم بتشغيل الماسح الضوئي لمراقبة تفاعل وضع العلامات اللاسلكية وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. تنقية خليط التفاعل الذي يحتوي على اليود 125 جسيمات الذهب النانوية عن طريق الطرد المركزي.

صب المادة الطافية وإضافة الماء النقي لإعادة تعليق كريات الجسيمات النانوية الذهبية. اسحب 0.2 ميكرولتر من المنتج المنقى وضعه على لوحة TLC مطلية بالسيليكا. قم بتطوير لوحة TLC باستخدام أسيتات الإيثيل كمرحلة متحركة.

ضع لوحة TLC على ماسح ضوئي لاسلكي TLC وقم بتشغيل الماسح الضوئي لتحديد العائد الكيميائي الإشعاعي والنقاء الكيميائي الإشعاعي لجزيئات الذهب النانوية المسماة باليود 125 ، وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. تظهر هنا النتائج التمثيلية للمجموعة الاصطناعية المصنوعة من اليود 125 المسمى أزيد. تم تحديد عائد كيميائي إشعاعي بنسبة 75٪ باستخدام معاير جرعة النشاط الإشعاعي.

تظهر نتيجة HPLC الراديوي التحليلي نقاء كيميائيا إشعاعيا ممتازا للمنتج. تظهر هنا النتائج التمثيلية لليود 125 جسيم الذهب النانوي. يظهر تحليل TLC الراديوي أن كلا من الإنتاجية الكيميائية الإشعاعية ونقاء جسيمات النانو الذهبية المنقى كانت أكثر من 95٪ بمجرد إتقان هذه التقنية يمكن إجراؤها في ثلاث ساعات إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

امتدت الآثار المترتبة على هذه التقنية نحو إعداد مجسات جزيئية مختلفة للأغراض العلاجية للتصوير النووي لأن كيمياء الملصقات في الطريقة الحالية عالية الكفاءة ومباشرة. لا تنس أن العمل مع اليود المشع يمكن أن يكون خطيرا للغاية ويجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل الطوب الأخف وزنا أو الأحذية الأخف وزنا أثناء تنفيذ هذا الإجراء.