تحريض الدماغية السكتة الدماغية ونقص التروية ضخه في الفئران عن طريق الشريان الأوسط انسداد تقنية والتخيل من عائق منطقة

الهدف العام من هذا الإجراء الجراحي هو إحداث السكتة الدماغية الإقفارية بشكل رسمي وموثوق مع ترك الشريان الدماغي الخارجي سليما. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال أبحاث السكتة الدماغية ، مثل تأثير العلاج على شدة السكتة الدماغية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه بعد تحريض السكتة الدماغية ، يظل الشريان الدماغي الخارجي متاحا لضخ العلاج مباشرة في نصف الكرة المصاب.

ضع فأرا مخدرا بالأيزوفلوران على سطح الجراحة المحضر وقم بتركيب مخروط أنف لإدارة الأيزوفلوران الممزوج بالأكسجين. تأكد من أن معدل التنفس حوالي تنفس إلى اثنين في الثانية دون اللهاث. بالإضافة إلى ذلك ، تأكد من أن لا يظهر رد فعل على تحفيز الشعيرات أو منعكس الدواسة.

ضع قطرة من زيوت تشحيم العين على كل عين ، باستخدام مسحة معقمة لمنعها من الجفاف أثناء العملية. بعد حلق منطقة الشق ، قم بتطهير منطقة الجراحة جيدا باستخدام 70٪ من الإيثانول ومحلول الكلورهيكسيدين. احتفظ بالحيوان على سطح جراحي دافئ تحت مجهر ستيريو.

بعد ذلك ، باستخدام المقص الجراحي والملقط ، قم بإجراء شق خط الوسط الضحل في الرقبة من فوق عظم الثدي إلى أسفل الفك. باستخدام الملقط ، افصل الأنسجة الدهنية والضامة بعناية لكشف القصبة الهوائية. يجب أن تنفصل الأنسجة بسهولة وبشكل طبيعي عن كلا الجانبين.

ثم ضع وسادة أو أي جسم دائري آخر يبلغ قطره حوالي 0.5 سم تحت الجزء الخلفي من الرقبة لتمديد الرقبة وكشف المنطقة للجراحة. افتح الشق باستخدام ضام الأنسجة أو الخطافات. ثم على الجانب الأيسر من القصبة الهوائية ، قم بفصل النسيج الضام بعناية لكشف الشريان السباتي المشترك الأيسر دون الإضرار بالأعصاب والأوردة الرئيسية القريبة.

بعد ذلك ، أدخل الملقط المنحني أسفل CCA لاختراق النسيج الضام ثم اسمح لها بالفتح ببطء لتحرير CCA. افصل CCA عن الأنسجة الأساسية وفضح التفرع العلوي y للشريان الدماغي الداخلي والشريان الدماغي الخارجي. بمجرد تعرض CCA ، أدخل ثلاثة أجزاء من خياطة النايلون تحت CCA.

تأكد من عدم التواء CCA ، لأن هذا من شأنه أن يعقد إدخال الخيط بشكل كبير. ثم عند أدنى نقطة ممكنة ، أغلق الخيط السفلي باستخدام عقدة دائمة. اربط الخيط العلوي أسفل تفرع ICA و ECA مباشرة باستخدام عقدة منزلقة قابلة للإزالة.

بعد ذلك ، اربط الخيط الأوسط باستخدام عقدة منزلقة قابلة للإزالة ، لكن اتركها مفتوحة على مصراعيها. بعد ذلك ، باستخدام مقص زنبركي التشريح الدقيق ، قم بإنشاء 0.2 ملم في CCA بين الغرز السفلية والوسطى بالقرب من الخيط السفلي. باستخدام الملقط ، أدخل خياطة MCAO في شق CCA ، ووجهها نحو الخيط العلوي.

ثم شد العقدة الزلقية للخياطة الوسطى على CCA برفق بحيث تقيد تدفق الدم حول خياطة MCAO ، ولكنها فضفاضة بما يكفي للسماح لخياطة MCAO بالتحرك بحرية. الآن قم بفك الخيط العلوي بعناية ، وتأكد من أن خياطة MCAO لا تنزلق. أدخل خياطة MCAO بضعة ملليمترات في ICA ثم أعد إغلاق الخيط العلوي بعقدة زلة كما كان من قبل.

بعد ذلك ، قم بتوجيه خياطة MCAO إلى منطقة الانسداد ، أولا عن طريق توجيهها إلى ICA بعد ECA ، ثم عن طريق التأكد من بقاء الخيط في ICA ، متجاوزا الشريان الجفرية. يكون الإدخال ناجحا إذا كان هناك القليل من التدفق الدموي العكسي من شق CCA وإذا كانت علامة التسعة ملليمترات الفضية تقع بين شق CCA وتشعب ICA و ECA. بعد الانسداد الناجح ، اربط الخيط الأوسط والعلوي بإحكام ثم دس الغرز في منطقة الشق.

بعد إزالة الضام أو خطافات المناديل والوسادة ، قم بتنظيف منطقة الخياطة باستخدام محلول ملحي معقم على قطعة قطن. ثم أغلق الجلد بخياطة من النايلون. ضع الفأر في قفص نظيف يقع على وسادة ساخنة لمنع انخفاض حرارة الجسم والسماح بالوصول إلى الماء والطعام المخفف.

راقب بحثا عن علامات السكتة الدماغية لمدة خمس إلى 10 دقائق على الأقل. اعتمادا على بروتوكول إعادة تروية نقص التروية، اترك خياطة MCAO في مكانها من 30 دقيقة إلى 120 دقيقة أو أكثر. بعد تخدير كما كان من قبل وإزالة خيوط إغلاق الجرح ، استخدم الملقط وفواصل الأنسجة لإعادة فتح الشق وفضح CCA.

ثم قم بإزالة الخيط العلوي بعناية واسحب خياطة MCAO برفق حتى يقع الجزء المطلي بالسيليكون في العقدة الوسطى. أعد خياطة العقدة العلوية لمنع تدفق الدم عبر خياطة MCAO. ثم قم بفك العقدة الوسطى بعناية واسحب خياطة MCAO بعد العقدة العلوية ، مع الاحتفاظ بها داخل CCA.

أغلق العقدة العلوية بإحكام لمنع تدفق الدم في الشريان. بعد ذلك ، اسحب خياطة MCAO بالكامل وأغلق العقدة الوسطى بإحكام. أغلق الجرح وقم بإدارة الرعاية بعد الجراحة كما كان من قبل.

يوضح هذا التخطيطي منطقة الانسداد الناتجة عن الإجراء الموضح في هذا الفيديو باللون الأزرق. تقع منطقة الجراحة في الجزء السفلي من الشكل ، ويشار إليها بالشكل البيضاوي ، ويشار إلى موضع الخيط بخطوط سوداء. تظهر الصور التالية وضع TTC لأقسام الدماغ.

تمثل هذه الصورة تلطيخا نموذجيا بعد إدخال الزائف. تمثل الصورة تلف الأنسجة الناجم عن MCAO لمدة 60 دقيقة ، تليها 90 دقيقة من إعادة التروية. يظهر تلف أكبر للأنسجة بعد 24 ساعة من إعادة التروية ، بعد 60 دقيقة MCAO.

تلطيخ الفلورسنت المناعي للعلامة العصبية MAP2 بفقدان الخلايا العصبية من 60 دقيقة من الانسداد ، متبوعا ب 23 ساعة من إعادة التروية ليتم تصورها بوضوح في الصورة الموجودة على اليمين. يظهر داء النجمة بعد تلطيخ الفلورسنت المناعي باستخدام GFAP. في الصورة على اليمين ، تتركز الخلايا الدبقية في المنطقة المجاورة لتلف الأنسجة في دماغ إعادة تروية نقص التروية ، بينما تظهر طقطقة منتشرة من التلوين في التحكم الذي يعمل بالعار.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم مراقبة رفاهية ووقت الانسداد. بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء تقنيات أخرى مثل تحليل السلوك الغريب والتألق المناعي للإجابة على أسئلة إضافية حول إصابة الأنسجة والتعافي.