الوريد الإعتراض نموذج: نموذج مناسب لدراسة الالتفافية الكسب غير المشروع الإنفتاح
January 15th, 2017
يوضح هذا الفيديو نموذجا لدراسة تطور تضخم عضلي بعد جراحة التدخل الوريدي في الفئران.
الهدف العام من هذا الإجراء هو دراسة سالكية الكسب غير المشروع الجانبي في نموذج تداخل وريد الفئران. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال جراحة المجازة ، مثل المسار الأساسي للعمليات البيولوجية والفسيولوجية أثناء انسداد المجازة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن الإجراء الجراحي سهل وسريع ، والذي يمكن استخدامه لدراسة العلاجات والمسالك الجديدة في الجسم الحي.
سيظهر هذه التقنية جريجول تيدياشفيلي ، الجراح الدقيق من مختبرنا. قبل الجراحة ، تحقق من وجود عمق كاف للتخدير عن طريق الضغط على القدمين الخلفيتين للفأر والتحقق من عدم وجود ردود أفعال. بعد ذلك ، ضع بعض المرهم البيطري على العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير.
بعد ذلك ، انشر الأرجل الخلفية وقم بإصلاح موضعها باستخدام شريط لاصق. بعد ذلك ، احلق الشعر الإربي باستخدام ماكينة تشذيب الشعر ، متبوعا بتطهير المنطقة على نطاق واسع باستخدام بوفيدون اليود متبوعا بنسبة 80٪ كحول. كرر هذه الدعك المتناوبة ما مجموعه ثلاث مرات.
الآن تحت المجهر ، قم بإجراء شق رأسي على طول الخط الإربي. بعد ذلك ، استخدم ملقطين لفصل الأنسجة تحت الجلد برفق ، وفضح الوريد الشرسوفي السطحي حتى أصله على الوريد الفخذي. افعل ذلك بحذر شديد ، لأن الوريد هش.
بعد ذلك ، أوقف تدفق الدم عبر الوريد الشرسوفي السطحي باستخدام مشابك. الآن ، حصاد جزء من الوريد. ارفع الوريد المعزول بعناية واقطع الوعاء باستخدام مقص صغير.
ثم ضع الجزء الوريدي على شاش معقم. هناك ، حرك إبرة قياس 30 بعناية في أحد طرفيها واغسل الوريد بالهيبارين. ثم انقل الوريد إلى 1٪ ليدوكائين ، واحتفظ به على الجليد لمنع التشنجات.
الآن ، قم بالقتل الرحيم للفأر المتبرع عن طريق زيادة التخدير إلى 5٪ إيزوفلوران. بعد ذلك ، استعدادا للاستئدام ، قم بإعداد الجرذ المتلقي بنفس طريقة الجرذ المتبرع حتى خطوة الحلاقة. بعد دقيقتين إلى ثلاث دقائق من 5٪ isoflurane ، افتح بطن الجرذ المتبرع على طول الخط ، واقطع الحجاب الحاجز ، وأزل القلب لوقف الدورة الدموية.
استمر في تحضير الجرذ المتلقي للجراحة. احلق الجانب الإنسي من الساقين باستخدام أداة تشذيب الشعر وقم بتطهير الجلد بثلاثة مقشرات متناوبة من بوفيدون اليود و 80٪ إيثانول. قبل المضي قدما ، قم بإجراء قرصة أخرى على إصبع القدم لمراقبة التخدير.
الآن ، قم بإجراء شق متوسط الفخذ من الركبة إلى الطية الأربية. تحت المجهر ، استخدم ملقطين لفصل الشريان الفخذي عن محيطه. بعد ذلك ، استخدم مشابك صغيرة لإيقاف تدفق الدم ، مع وضع المشبك القريب أولا.
بعد ذلك ، قم بقص جزء قصير من الشريان الفخذي المثبت وتخلص منه. تقصير الجذع الشرياني المتبقي لترك فجوة أكبر من الطعم الوريدي بمقدار ملليمتر إلى ملليمترين. ثم اغسل الجذع الشرياني بالهيبارين من إبرة قياس 30.
إذا برزت adventitia قليلا خارج جذع الوعاء الدموي ، فاستخدم الملقط لسحب adventitia قليلا فوق نهاية الوعاء ، ثم قم بإزالة قطعة من adventitia. الآن ، ضع الجزء الوريدي المحصود بين جذوع الشرايين في الاتجاه الصحيح ، واضبط حجم الفجوة لملاءمة جيدة. الآن ، قم بإجراء مفاغرة قريبة أولا باستخدام خياطة 10-0 برولين.
ابدأ بخياطة كل جانب جانبي ، ثم أضف ثلاث خيوط أخرى إلى الجانب البطني. انتهي بثلاث غرز على الجانب الظهري. بعد ذلك ، قم بتوصيل الأوعية البعيدة باستخدام نفس التقنية ، بدءا من خياطة على كل جانب جانبي ، تليها ثلاث خيوط على الجانب البطني ، ثم تنتهي على الجانب الظهري.
بعد الانتهاء من مفاغرة ، قم بتحميل حقنتين سعة ملليلتر واحد بمكونات غراء الفيبرين. بعد ذلك ، ارفع الكسب غير المشروع بعناية باستخدام ملقط ، وقم بتطبيق ما يقرب من 100 ميكرولتر من المكون الأول تحت الكسب غير المشروع ، متبوعا ب 100 ميكرولتر من المكون الثاني. يجب دائما إضافة المكونين في نفس وحدات التخزين.
الآن ، ضع الكسب غير المشروع مرة أخرى في موضعه ، وقم بتطبيق 100 ميكرولتر من كل مكون على الكسب غير المشروع لتغطية الكسب غير المشروع ومفاغرة بالكامل. هذا يمنع القصور المفاغرة والإفراط في انتفاخ الطعم الوريدي. الآن ، افتح المشابك بعناية بدءا من المشبك البعيد.
بعد ذلك ، تأكد من نجاح الجراحة عن طريق التحقق من وجود نبض مرئي في الوريد المزروع والشريان البعيد للطعم. قبل إغلاق الجلد ، قم بإزالة أي غراء مفرط يمكن أن يعيق الإغلاق. ثم أغلق طبقات الجلد باستخدام 5-0 خيوط برولين.
قبل أن يستيقظ الفئران ، قم بحقن أربعة إلى خمسة ملليغرامات من الكاربروفين لكل كيلوغرام تحت الجلد. راقب حتى يستعيد وعيه الكافي للحفاظ على الاستلقاء القصي. ثم امنح الفئران قفصا منزليا بدون أخرى.
خلال الأيام الثلاثة المقبلة ، قم بتوفير الميتاميزول في مياه الشرب ، وتحقق من تعافي الفئران يوميا. بمجرد التعافي التام ، يمكن إيواء الفئران مع الفئران الأخرى. تتعافى جيدا من الجراحة وأظهرت حالة بدنية ممتازة بعد العملية.
تم تأكيد الاندماج الناجح للوريد في الشريان الفخذي وسالكية الكسب غير المشروع بعد الزرع بشكل غير جراحي باستخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية المزدوجة. عن طريق زرع وريد فأر إيجابي الفتر إلى فأر سلبي ، تم استخدام التصوير الحيوي لمراقبة وجود الطعم. وجد أن تضخم عضلي البطن يتطور تدريجيا في الكسب غير المشروع بمرور الوقت.
يوضحالتلوين النسيجي باستخدام ثلاثي الألوان لماسون التكوين العضلي داخل الصفيحة المرنة الداخلية. للتأكد من أن النموذج يعيد إنتاج ديناميكيات تضخم عضلي ، تم قياس الطمس اللمعي. لوحظ فقدان تدريجي لسالك الكسب غير المشروع من سبعة أيام إلى 28 يوما بعد الجراحة ، وهو ما يناسب النموذج بشكل جيد.
بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في 20 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. شكرا لك على المشاهدة ، ونتمنى لك السعادة في تجاربك.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
نظرة عامة
يوضح هذا الفيديو نموذجًا لدراسة تطور تضخم العضلة الوعائية بعد جراحة التدخل الوريدي في الفئران. تهدف الإجراء إلى التحقيق في انفتاح الطعوم الجانبي والعمليات البيولوجية المتضمنة خلال انسداد المجازة.
مكونات الدراسة الرئيسية
مجال العلوم
- علم الأعصاب
- بيولوجيا الأوعية الدموية
- التقنيات الجراحية
الخلفية
- تضخم العضلة الوعائية هو مصدر قلق كبير في جراحة الأوعية الدموية.
- فهم انفتاح الطعوم الجانبي أمر بالغ الأهمية لتحسين النتائج الجراحية.
- يوفر نموذج تدخل الوريد للفأر رؤى حول هذه العمليات.
- تسمح هذه التقنية بدراسة العلاجات الجديدة في الجسم الحي.
غرض الدراسة
- للتحقيق في تطور تضخم العضلة الوعائية.
- لتقييم انفتاح الطعوم الجانبية في نموذج مسيطر عليه.
- لاستكشاف الاستجابات البيولوجية والفسيولوجية خلال انسداد المجازة.
الطرق المستخدمة
- نموذج تدخل الوريد للفأر للإجراءات الجراحية.
- تقييم عمق التخدير قبل الجراحة.
- تطبيق مرهم بيطري لمنع جفاف العينين أثناء التخدير.
- عرض التقنيات الجراحية بواسطة جراح دقيق مدرب.
النتائج الرئيسية
- التأسيس الناجح لنموذج لدراسة تضخم العضلة الوعائية.
- تبرهن على كفاءة العملية الجراحية وسهولة الأداء.
- رؤى حول العمليات البيولوجية خلال انسداد المجازة.
- إمكانية لدراسات مستقبلية حول العلاجات الجديدة.
الاستنتاجات
- نموذج تدخل الوريد للفأر فعال لدراسة الاستجابات الوعائية.
- يمكن لهذه التقنية تسهيل البحث في جراحة المجازة.
- يمكن للدراسات الإضافية أن تبني على النتائج لتحسين النتائج الجراحية.
الأسئلة المتداولة
Executive Industry Relevance
This rat vein interposition model provides a cost-effective and scalable system to study bypass graft patency loss, a critical challenge in vascular therapeutics development. By enabling longitudinal assessment of myointimal hyperplasia—the primary cause of graft failure—it supports mechanistic de-risking of novel interventions targeting vascular remodeling pathways. The model’s compatibility with duplex sonography and histological analysis allows for quantitative, translatable readouts that inform go/no-go decisions in preclinical pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses related to vascular injury response and neointima formation mechanisms.
- Operational Value: Facilitates biological de-risking of targets through reproducible induction of graft patency loss in a disease-relevant system.
- Predictive Value: Supports target confidence by modeling progressive luminal obliteration over time, aligning with clinical timelines of restenosis.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Prepares validated venous grafts for compound testing by establishing a consistent baseline of patency loss progression.
- Operational Value: Delivers quantitative duplex sonography outputs and histological metrics suitable for assay standardization and inter-laboratory reproducibility.
- Scalability: Permits sufficient tissue yield for multimodal analysis, supporting medium-throughput screening of pharmacological or genetic modifiers.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Recapitulates human-like myointimal hyperplasia dynamics, enhancing translational biomarker relevance for vascular proliferation pathways.
- Operational Value: Bridges discovery and preclinical stages by providing a continuous readout of graft integrity from acute surgery to chronic failure.
- Risk Mitigation: Informs preclinical advancement decisions by quantifying time-dependent patency loss, reducing failure risk in later-stage vascular device or drug evaluation.
Pipeline & Workflow Integration
The model fits within the discovery-to-preclinical continuum, particularly for vascular biology programs focused on restenosis, graft failure, or anti-proliferative therapies.
- Discovery Biology: Supports pathway clarification and target validation by enabling controlled study of smooth muscle cell proliferation and extracellular matrix deposition in venous grafts.
- Screening: Provides assay-ready grafts with measurable patency endpoints via duplex sonography, allowing reliable compound effect assessment.
- Analytics: Generates quantitative luminal area measurements and histological scoring that help compare therapeutic conditions and mechanism of action.
- Translational Research: Aligns with preclinical validation by modeling progressive graft failure observed in clinical saphenous vein bypass grafts.
- Enterprise Reuse: Represents a reusable vascular surgery platform adaptable to multiple therapeutic modalities, including siRNA, small molecules, or tissue-engineered grafts.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Delivers predictive confidence in target validation by modeling a clinically relevant mechanism of graft failure.
- Operational Value: Ensures standardization and reproducibility through defined surgical steps, anesthesia protocols, and non-invasive imaging validation.
- Strategic Value: Improves capital efficiency by enabling early go/no-go decisions based on quantifiable patency outcomes, reducing late-stage attrition.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of vascular programs by providing mechanistic insight into neointima formation modifiers.
Implementation Considerations
- Requires microsurgical expertise and access to stereomicroscopes, micro-instruments, and vascular sutures.
- Dependent on duplex sonography equipment for longitudinal patency monitoring and histological processing infrastructure for endpoint analysis.
- Necessitates cross-team standardization between surgery, imaging, and histology teams to ensure consistent data collection.
- Adaptation to other rodent models or vascular beds may require technical adjustments due to vessel size and hemodynamic differences.
- Practical limitations include the need for aseptic technique, postoperative analgesia protocols, and controlled housing to minimize confounding variables in recovery and graft assessment.
