يوليو 2, 2017
يصف هذا البروتوكول بيوبرينتينغ 3D من الأنسجة القلبية دون استخدام المواد الحيوية. 3D بيوبرينتد بقع القلب المعرض التكامل الميكانيكي من الكروية عنصر واعدة للغاية في تجديد الأنسجة القلب ونماذج 3D من أمراض القلب.
الغرض من هذا الفيديو هو إظهار الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد لأنسجة القلب دون استخدام المواد الحيوية ، باستخدام الخلايا فقط. أولا ، يتم عزل خلايا عضلة القلب والخلايا البطانية والخلايا الليفية وعدها وخلطها بنسب الخلايا المرغوبة. ثم يتم توزيعها باستخدام ماصة متعددة القنوات وعلى الآبار الفردية في ألواح 96 بئر منخفضة للغاية.
يتم تحضين الخلايا الموجودة في ألواح الآبار البالغ عددها 96 لمدة ثلاثة أيام ، وبعد ثلاثة أيام ، تشكل كرويات تنبض تلقائيا. يكشف الفحص المجهري متحد البؤر عن التعبير عن الوصلات في 43 ، والتي تم تصنيفها باللون الأخضر بالفلورسنت في خلايا عضلة القلب الإيجابية Troponin T ، والتي يتم تصنيفها بالفلورسنت باللون الأحمر التام داخل الفيريات. ثم يتم تحميل ألواح الآبار البالغ عددها 96 التي تحتوي على الكرويات في الطابعة الحيوية ثلاثية الأبعاد.
تبدأ الطابعة الحيوية ثلاثية الأبعاد بنقل لوحة البئر 96 إلى موقع بجوار مجموعة الإبرة باستخدام منصة متحركة. ثم تقوم الطابعة الحيوية ثلاثية الأبعاد بفحص جميع الكرويات الموجودة في لوحة البئر 96 للحصول على البيانات ذات الصلة بكل كروي مثل قطره وشكله. هذه نظرة عن قرب لعملية الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد.
يتم التقاط الكروي من لوحة البئر 96 على اليسار بواسطة فوهة باستخدام شفط الفراغ ووضع موقع محدد في مجموعة إبرة على اليمين. تتكرر هذه العملية حتى تكتمل عملية الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد. حتى يتم طباعة جميع الكرويات ولوحة البئر 96 ، ستقوم الطابعة الحيوية ثلاثية الأبعاد بتخزين لوحة البئر 96 الخارجية وتحميل لوحة جديدة ، باستخدام المنصة المتحركة.
هذا مقطع فيديو بفاصل زمني يظهر منظرا جويا للطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد لرقعة تسعة في تسعة بسرعة 100 مرة ، ويتم ترتيب الإبر الموجودة في مجموعة الإبرة في تشكيل جماعي ويتم تحميل الكرات على كل إبرة من الأعلى. بعد ثلاثة أيام في ظل ظروف معقمة ، تتم إزالة رقعة القلب ثلاثية الأبعاد للطابعة الحيوية بعناية فائقة من مجموعة الإبرة عن طريق تحريك قطعة البلاستيك الصلب برفق في مجموعة الإبرة أسفل الرقعة لأعلى. التشحيم باستخدام محلول ملحي مخزن بالفوسفات أو PBS ، ربما يتم تطبيقه على الإبر خلال هذه الخطوة حسب الحاجة ، لإزالة أكثر سلاسة وسهولة.
التصحيح القلبي المطبوع بيولوجيا ثلاثي الأبعاد هش للغاية ، مباشرة بعد إزالته من مجموعة الإبرة ، لذلك يجب توخي الحذر الواجب حتى لا تتلفها. ثم يتم نقل رقعة القلب المطبوعة حيويا ثلاثية الأبعاد إلى طبق زراعة أنسجة 35 ملم يحتوي على وسائط خلوية مناسبة. مباشرة بعد إزالتها من مجموعة الإبرة ، يلاحظ أن الرقعة تنبض بالفعل ، مع تغيير حجم ثقوب الإبرة مع كل نبضة.
يسمح لرقعة القلب المطبوعة بيولوجيا ثلاثية الأبعاد بالنضوج ، وخلال هذه الفترة ، تمتلئ فراغات الأنسجة التي تسببها مجموعة الإبرة بواسطة الأنسجة المحيطة. تستمر رقعة القلب ثلاثية الأبعاد للطباعة الحيوية في النبض تلقائيا. في الختام ، من الممكن طباعة أنسجة القلب ثلاثية الأبعاد دون استخدام المواد الحيوية.
تظهربقع القلب المطبوعة بيولوجيا ثلاثية الأبعاد تكاملا ميكانيكيا لمكون spheroids. 3D الطباعة الحيوية لأنسجة القلب لها تطبيقات سريرية واعدة وتجديد أنسجة القلب ولها نماذج ثلاثية الأبعاد لأنسجة القلب ، والنسخ المتماثل في علم الأدوية التنبؤي وعلم السموم وتطوير العلاجات الموجهة للخلايا والجينوم.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يصف هذا البروتوكول الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد لأنسجة القلب باستخدام الخلايا فقط، دون استخدام مواد حيوية. وتظهر الرقاقات القلبية الناتجة تكاملاً ميكانيكياً، كما تبدي إمكانات واعدة في تجديد أنسجة القلب وكنماذج لدراسة أمراض القلب.
تتيح هذه الطريقة الطباعة الحيوية ثلاثية الأبعاد لأنسجة قلبية وظيفية دون الحاجة إلى مواد حيوية، مما يوفر نهجاً قابلاً للتوسع لإنتاج رقع نسيجية متكاملة ميكانيكياً لنمذجة الأمراض قبل السريرية والطب التجديدي. ومن خلال استخدام الخلايا فقط، تساهم هذه الطريقة في تقليل التباين الناتج عن السقالات الخارجية وتعزز الملاءمة الفسيولوجية في اختبارات الاستجابة للدواء والسمية. وتدعم الرقع الناتجة، والتي تخفق تلقائياً، مرحلة التحقق المبكر من الأهداف والحد من المخاطر الميكانيكية في مسارات اكتشاف أدوية القلب والأوعية الدموية.
يضع سير العمل هذا عملية توليد الكريات الحيوية والطباعة الحيوية كجسر يربط بين مرحلة الاكتشاف المبكر والتحقق قبل السريري، مما يتيح إنشاء أنسجة قلبية معقدة لإجراء التقييمات الوظيفية اللاحقة.