Name: NMR الطيفي كأداة قوية لتقييم السريع من الدهون الملف من السمك ملاحق النفط (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-01T11:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: اكتشف تحليل البروفايل الدهني لمكملات زيت السمك باستخدام تقنية طيف الرنين المغناطيسي النووي. توفر هذه الطريقة تحليلاً سريعاً وقوياً للأحماض الدهنية وتوزيعها المكاني دون الحاجة إلى خطوات فصل معقدة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذا العمل من قبل فودز للصحة ديسكفري موضوع في جامعة ولاية أوهايو، وقسم علوم وتكنولوجيا الأغذية في جامعة ولاية أوهايو. فإن الكتاب أود أن أشكر منشأة NMR في جامعة ولاية أوهايو ومرفق NMR في جامعة ولاية بنسلفانيا.

<ol><li>Simopoulos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+ratio+of+omega-6%2Fomega-3+essential+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids.</a> Biomed. Pharmacother. 56 (8), 365-379 (2002).</li>
<li>Goodnight, S. H. Jr, Harris, W. S., Connor, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+dietary+omega+3+fatty+acids+on+platelet+composition+and+function+in+man%3A+a+prospective%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The effects of dietary omega 3 fatty acids on platelet composition and function in man: a prospective, controlled study.</a> Blood. 58 (5), 880-885 (1981).</li>
<li>Harper, C., Jacobsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+omega-3+fatty+acids+and+the+prevention+of+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of omega-3 fatty acids and the prevention of coronary heart disease.</a> Am. J. Cardiol. 96 (11), 1521-1529 (2005).</li>
<li>Kremer, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high-dose+fish+oil+on+rheumatoid+arthritis+after+stopping+nonsteroidal+antiinflammatory+drugs.+Clinical+and+immune+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Effects of high-dose fish oil on rheumatoid arthritis after stopping nonsteroidal antiinflammatory drugs. Clinical and immune correlates.</a> Arthritis and Rheumatol. 38 (8), 1107-1114 (1995).</li>
<li>Malasanos, T., Stackpoole, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+effects+of+omega-3+fatty+acids+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Biological effects of omega-3 fatty acids in diabetes mellitus.</a> Diabetes Care. 14, 1160-1179 (1991).</li>
<li>Han, Y., Wen, Q., Chen, Z., Li, P. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1876610211019503">Review of Methods Used for Microalgal Lipid-Content Analysis.</a> Energ. Procedia. 12, 944-950 (2011).</li>
<li>Guillén, M., Ruiz, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.200300799/abstract">1H nuclear magnetic resonance as a fast tool for determining the composition of acyl chains in acylglycerol mixtures.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 105, 502-507 (2003).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, I., Aubourg, S. P., Addeo, F., Paolillo, L. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/237943502_Proton_Nuclear_Magnetic_Resonance_Rapid_and_Structure-Specific_Determination_of_o-3_Polyunsaturated_Fatty_Acids_in_Fish_Lipids">Proton nuclear magnetic resonance rapid and structure specific determination of ω-3 polyunsaturated fatty acids in fish lipids.</a> J. Am Oil Chem Soc. 70, 225-228 (1993).</li>
<li>Igarashi, T., Aursand, M., Hirata, Y., Gribbestad, I. S., Wada, S., Nonaka, M. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/226798699_Nondestructive_Quantitative_Acid_and_n-3_Fatty_Acids_in_Fish_Oils_by_High-Resolution_1H_Nuclear_Magnetic_Resonance_Spectroscopy">Nondestructive quantitative acid and n-3 fatty acids in fish oils by high-resolution 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 77, 737-748 (2000).</li>
<li>Plans, M., Wenstrup, M., Saona, L. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-015-2666-8">Application of Infrared Spectroscopy for Characterization Dietary Omega-3 Oil Supplements.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 92, 957-966 (2015).</li>
<li>Jian-hua, C. I. A. <a target="_blank" href="http://pubs.sciepub.com/jfnr/2/2/1/">Near-infrared Spectrum Detection of Fish Oil DHA Content Based on Empirical Mode Decomposition and Independent Component Analysis.</a> J Food Nutr Res. 2 (2), 62-68 (2014).</li>
<li>Millen, A. E., Dodd, K. W., Subar, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+vitamin%2C+mineral%2C+nonvitamin%2C+and+nonmineral+supplements+in+the+United+States%3A+The+1987%2C+1992%2C+and+2000+National+Health+Interview+Survey+results%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Am.+Diet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Use of vitamin, mineral, nonvitamin, and nonmineral supplements in the United States: The 1987, 1992, and 2000 National Health Interview Survey results.</a> J. of Am. Diet Assoc. 104 (6), 942-950 (2004).</li>
<li>Dwyer, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+developing+analytical+and+label-based+dietary+supplement+databases+at+the+NIH+office+of+dietary+supplements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Compos.+Anal%22%5BJournal%5D)">Progress in developing analytical and label-based dietary supplement databases at the NIH office of dietary supplements.</a> J. Food Compos. Anal. 21, S83-S93 (2008).</li>
<li>Monakhova, Y. B., Ruge, I., Kuballa, T., Lerch, C., Lachenmeier, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+coenzyme+Q10+in+food+supplements+using+1H+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Vitam.+Nutr.+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of coenzyme Q10 in food supplements using 1H NMR spectroscopy.</a> Int. J. Vitam. Nutr. Res. 83 (1), 67-72 (2013).</li>
<li>Monakhova, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardless+1H+NMR+determination+of+pharmacologically+active+substances+in+dietary+supplements+and+medicines+that+have+been+illegally+traded+over+the+internet%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Test.+Anal%22%5BJournal%5D)">Standardless 1H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the internet.</a> Drug Test. Anal. 5 (6), 400-411 (2013).</li>
<li>Berger, S., Braun, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerger%2C+S+%22200+and+more+NMR+experiments%3A+a+practical+course%22">200 and more NMR experiments: a practical course</a>. , Wiley-VCH. Weinheim. (2004).</li>
<li>Knothe, G., Kenar, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+fatty+acid+profile+by+1H-NMRspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Lipid+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Determination of the fatty acid profile by 1H-NMRspectroscopy.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 106, 88-96 (2004).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, J. I., Aubourg, S. P., Paolillo, I. G. L., Addeo, F. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf00032a016">Quantitative High-Resolution 13C NMR Analysis of Lipids Extracted from the White Muscle of Atlantic Tuna (Thunnus alalunga).</a> J. Agric. Food Chem. 41 (8), 1247-1253 (1993).</li>
<li>Dais, P., Misiak, M., Hatzakis, E. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/277335832_Analysis_of_marine_dietary_supplements_using_NMR_spectroscopy">Analysis of marine dietary supplements using NMR spectroscopy.</a> Anal. Methods. 7 (12), 5226-5238 (2015).</li>
<li>Pickova, J., Dutta, P. C. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-003-0809-7">Cholesterol Oxidation in Some Processed Fish Products.</a> J. Anal. Oil Chem. Soc. 80 (10), 993-996 (2003).</li>
<li>Siddiqui, N., Sim, J., Silwood, C. J. L., Toms, H., Iles, R. A., Grootveld, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicomponent+analysis+of+encapsulated+marine+oil+supplements+using+high-resolution+1H+and+13C+NMR+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Lipid+Rsrch%22%5BJournal%5D)">Multicomponent analysis of encapsulated marine oil supplements using high-resolution 1H and 13C NMR techniques.</a> J. of Lipid Rsrch. 44 (12), 2406-2427 (2003).</li>
<li>Sua´rez, E. R., Mugford, P. F., Rolle, A. J., Burton, I. W., Walter, J. A., Kralovec, J. A. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-010-1638-2">13C-NMR Regioisomeric Analysis of EPA and DHA in Fish Oil Derived Triacylglycerol Concentrates.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 87, 1425-1433 (2010).</li>
<li>Youlin, X. A., Moran, S., Nikonowiczband, E. P., Gao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Z-restored+spin-echo+13C+1D+spectrum+of+straight+baseline+free+of+hump%2C+dip+and+roll%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Chem%22%5BJournal%5D)">Z-restored spin-echo 13C 1D spectrum of straight baseline free of hump, dip and roll.</a> Magn. Reson. Chem. 46, 432-435 (2008).</li>
<li>Tengku-Rozaina, T. M., Birch, E. J. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.201300357/abstract">Positional distribution of fatty acids on hoki and tuna oil triglycerides by pancreatic lipase and 13C NMR analysis.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 116 (3), 272-281 (2014).</li>
<li>Berry, S. E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triacylglycerol+structure+and+interesterification+of+palmitic+and+stearic+acid-rich+fats%3AAn+overview+and+implications+for+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr.+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Triacylglycerol structure and interesterification of palmitic and stearic acid-rich fats:An overview and implications for cardiovascular disease.</a> Nutr. Res. Rev. 22 (1), 3-17 (2009).</li>
<li>Hunter, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+effects+of+dietary+fatty+acids+as+related+to+their+position+on+triglycerides%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Studies on effects of dietary fatty acids as related to their position on triglycerides.</a> Lipids. 36, 655-668 (2001).</li>
<li>Vlahov, G. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/(SICI)1097-458X(199805)36:5%3C359::AID-OMR274%3E3.0.CO;2-Z/abstract">Regiospecific analysis of natural mixtures of triglycerides using quantitative 13C nuclear magnetic resonance of acyl chain carbonyl carbons.</a> Magnetic Res. in Chem. 36, 359-362 (1998).</li>
</ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

التعديلات واستراتيجيات لاستكشاف الأخطاء وإصلاحها جودة الطيفية. وlinewidth للإشارة NMR، وبالتالي القرار من الطيف NMR يعتمد اعتمادا كبيرا على الملئ، وهي عملية لتعظيم الاستفادة من تجانس الحقل المغناطيسي للأرض. لتحليل روتيني، 1D الملئ غير كاف وغير مطلوب الملئ 3D، بالنظر إلى أن يتم تنفيذ ذلك من قبل أفراد NMR على أساس منتظم. إذا لم تكن هذه هي الحالة، يجب تنفيذ عملية الملئ 3D قبل التحليل باستخدام عينة تحتو...

وقد ثبت أن استهلاك الأحماض الدهنية ن -3 في النظام الغذائي أن يكون مفيدا ضد عدة أمراض مثل أمراض القلب 1، 2، 3، 4 الأمراض الالتهابية ومرض السكري 5. يعتبر النظام الغذائي الغربي الفقراء في ن -3 الأحماض الدهنية، وبالتالي ينصح استهلاك مكملات زيت السمك لتحسين ن -6 / ن -3 التوازن في التغذية المستهلك 1. وعلى الرغم من الزيادة الأخيرة في الأسماك استهلاك المكملات النفط، ما زالت هناك تساؤلات حول سلامة وصحة، ونوعية بعض من هذه المنتجات. التحليل التركيبي سريع ودقيق للمكملات زيت السمك ضروري لتقييم صحيح نوعية هذه المنتجات التجارية وضمان سلامة المستهلك. المنهجيات الأكثر شيوعا لتقييم ملحق زيت السمكالصورة هي اللوني للغاز (GC) والأشعة تحت الحمراء الطيفي (IR). في حين أن هذه هي أساليب حساسة للغاية، وأنها تعاني من عدة عيوب 6. تحليل GC هو مضيعة للوقت (4-8 ح) لفصل واشتقاق من المركبات الفردية مطلوب 7 و قد تحدث أكسدة الدهون أثناء التحليل 8 و 9. بينما أطياف الأشعة تحت الحمراء يمكن أن يكون الكمي، مطلوب نموذج التنبؤ التي يتم بناؤها باستخدام جزئي الأقل الساحات الانحدار (PLSR)، على الرغم من أن هناك استثناءات فيها العصابات IR يمكن أن يعزى إلى مجمع واحد (10). يتطلب PLSR تحليل عدد كبير من العينات، مما يزيد من وقت التحليل 11. لهذا السبب، هناك اهتمام متزايد في تطوير منهجيات تحليلية جديدة تتيح تحليل دقيق وسريع لعدد كبير من عينات زيت السمك. منظمات مثل OFFIوتعاونت م من المكملات الغذائية (ODS) في المعاهد الوطنية للصحة (NIH) وإدارة الغذاء والدواء (FDA) مع رابطة الرسمية تحليلية الكيميائيين (AOAC) لتطوير هذه الأساليب الجديدة 12 و 13. إحدى الطرق التحليلية الواعدة لفحص وتقييم مصفوفات متعددة عنصر، مثل المكملات الغذائية، وغير النووية الرنين المغناطيسي (NMR) الطيفي 14 و 15. NMR الطيفي ديها العديد من المزايا: فهو أسلوب غير المدمرة والكمية، فإنه يتطلب الحد الأدنى من دون إعداد العينات، ويتميز دقة ممتازة والتكاثر. وبالإضافة إلى ذلك، NMR الطيفي هو منهجية صديقة للبيئة لأنها تستخدم كميات صغيرة فقط من المذيبات. العيب الرئيسي للNMR الطيفي هو حساسيتها منخفضة نسبيا بالمقارنة مع غيرها من analytiطرق كال، ومع ذلك، فقد زادت التطورات التكنولوجية الحديثة في الأجهزة مثل حقول المغناطيسية أقوى، تحقيقات المبردة من مختلف الأقطار، ومعالجة البيانات المتقدمة، وتسلسل نبض تنوعا والتقنيات حساسية تصل إلى نطاق نانومتر. في حين NMR الأجهزة من حيث التكلفة عالية، وحياة طويلة من الطيف الرنين المغناطيسي النووي والعديد من تطبيقات NMR تخفيض تكلفة التحليل على المدى الطويل. ويهدف هذا البروتوكول فيديو مفصل للمساعدة الممارسين جديد في مجال تجنب المزالق المرتبطة 1 H و 13 تحليل الطيفي C NMR من مكملات زيت السمك.

<table><tbody><tr><td>أداة Avance III 850 NMR</td><td>أداة Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avance III 500 أداة NMR</td><td>مسبار Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TCI 5 مم</td><td>مسبار Bruker</td><td></td><td>Helium معكوس مبرد (deetected بالبروتون) مسبار NMR يتميز بثلاث قنوات مستقلة (1H ، 13C ، 15N)</td></tr><tr><td>مسبار BBO المعجزة 5 مم</td><td>Bruker</td><td></td><td>مسبار مراقبة مبرد بالنيتروجين (تم اكتشاف نوى X) ، يتميز بقناتين. واحد للكشف عن 1H و 19F وواحد للنوى X (تغطي من 15N إلى 31P)</td></tr> <tr><td>التوربين الدوار</td><td>مغازل Bruker</td><td></td><td>NMR مصنوعة من مواد البوليمر ولها حلقة مطاطية لتثبيت أنبوب الرنين المغناطيسي النووي بشكل آمن في مكانه</td></tr><tr><td>Topspin 3.5</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>deuterated chloroform</td><td>Sigma-Aldrich</td> <td>& nbsp ؛ 865-49-6</td><td>99.8 ذرة٪ D ، يحتوي على 0.03 TMS</td></tr><tr><td>2،6-Di-tert-butyl-4-methylphenol</td><td>Sigma-Aldrich</td> <td>& nbsp ؛ 128-37-0</td><td>نقاء >99٪</td></tr> <tr>عينات <td></td><td></td><td></td><td>زيت السمك</td></tr><tr><td>أنابيب الرنين المغناطيسي النووي عصر</td><td>جديد</td><td>NE-RG5-7</td><td>5 مم OD روتين" R&rdquo; سلسلة الرنين المغناطيسي النووي عينة أنبوب BSMS</td></tr><tr><td></td><td>Bruker</td><td></td><td>نظام إدارة الأنظمة ؛ جهاز نظام التحكم</td></tr></tbody></table>

nmr الطيفي كأداة قوية لتقييم السريع من الدهون الملف من السمك ملاحق النفط

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

النظام الغذائي الغربي هو فقير في الأحماض ن -3 الدهنية، لذلك ينصح استهلاك مكملات زيت السمك لزيادة تناول هذه المواد الغذائية الأساسية. والهدف من هذا العمل هو للتدليل على التحليل الكمي والكيفي للمكملات زيت السمك مغلفة باستخدام عالية الدقة 1 H و 13 C NMR الطيفي باستخدام الرنين المغناطيسي النووي صكين مختلفة. ميغاهيرتز 500 وأداة 850 ميغاهيرتز. كل من البروتون (1 H) والكربون (13 C) NMR الأطياف يمكن استخدامها لتحديد كمية المكونات الرئيسية من مكملات زيت السمك. ويتحقق الكمي من الدهون في مكملات زيت السمك خلال دمج إشارات الرنين المغناطيسي النووي المناسبة في أطياف 1D ذات الصلة. النتائج التي حصل عليها 1 H و 13 C NMR هي في اتفاق جيد مع بعضها البعض، على الرغم من الاختلاف في القرار، وحساسية بين اثنين من النوى والصكوك اثنين. 1 H NMR العرضسا تحليل أسرع مقارنة مع 13 C NMR، كما يمكن تسجيل الطيف في أقل من 1 دقيقة، على النقيض من 13 تحليل C NMR، الذي يستمر من 10 دقيقة إلى ساعة واحدة. وNMR الطيف 13 C، ومع ذلك، هو أكثر إفادة بكثير. ويمكن أن توفر البيانات الكمية لعدد أكبر من الأحماض الدهنية الفردية، ويمكن استخدامها لتحديد توزيع الموضعية من الأحماض الدهنية على العمود الفقري الجلسرين. ويمكن لكل من نوى تقديم المعلومات الكمية في تجربة واحدة فقط من دون الحاجة إلى تنقية أو الانفصال الخطوات. قوة المجال المغناطيسي يؤثر في الغالب 1 H NMR الأطياف بسبب انخفاض قرارها فيما يتعلق 13 C NMR، ومع ذلك، أدوات NMR حتى أقل تكلفة يمكن تطبيقها بكفاءة كوسيلة من وسائل قياسية في صناعة المواد الغذائية ومراقبة الجودة المختبرات.

تم جمع 1 H و 13 الأطياف C NMR لمكملات زيت السمك المتوفرة تجاريا باستخدام أداتين NMR. على ميغاهيرتز 850 و مطياف 500 ميغاهيرتز. هذه الأطياف يمكن استخدامها لتحديد كمية مكونات زيت السمك، مثل حمض الدوكوساهيكسانويك (DHA) وحمض الدهني (EPA)، ومركبات أخرى مثل جيدا مثل ن -1 سلاسل الأسيل ومؤشر مهم من الناحية التغذوية مثل ن -6 / ن -3 النسبة. الكمي لا يمكن أن يؤديها حتى من دون استخدام معيار داخلي، ومع ذلك، يجب ال...

هنا، تم استخدام عالية الدقة 1 H و 13 C النووية الرنين المغناطيسي (NMR) الطيفي كأداة سريعة وموثوق بها للتحليل الكمي والنوعي للمكملات زيت السمك مغلفة.

NMR الطيفي كأداة قوية لتقييم السريع من الدهون الملف من السمك ملاحق النفط

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential ...

الهدف العام من هذه الطريقة هو تحديد ملف الدهون لمكملات زيت السمك باستخدام مطيافية الرنين المغناطيسي النووي. يمكن لهذه الطريقة أن تساعد في الإجابة على أسئلة رئيسية في تحليل الدهون، مثل محتويات الدهون في مكملات زيت السمك والتوزيع الموضعي للأحماض الدهنية المختلفة على هيكل الجلسرول. وتكمن الميزة الرئيسية لهذه التقنية في أنها تجعل التحليل السريع والقوي لعدة جزيئات مختلفة ممكناً في لقطة واحدة دون الحاجة إلى خطوات الفصل والتنقية.لتحضير العينات لتحليل الرنين المغناطيسي النووي (NMR) للبروتون والكربون، استخرج أولاً 120 µL، وهو ما يعادل حوالي 110 mg من زيت السمك، من كبسولة غذائية باستخدام حقنة وضعها في قنينة زجاجية سعة 4 mL. سجل وزن زيت السمك. استخدم 500 µL من محلول BHT المخزون لإذابة 100 mg ± 10 mg من زيت السمك.بعد إذابة الزيت، انقل كل المحلول مباشرة إلى أنبوب NMR عالي الجودة بقطر خمسة مليمتر وثبّت السدادة. قم بتحليل العينات في غضون 24 ساعة من تحضيرها. ثم أدخل أنبوب NMR في توربين الدوار.ضع الدوار والأنبوب فوق مقياس عمق مدرج، ثم ادفع الجزء العلوي من الأنبوب برفق حتى يلامس جزؤه السفلي قاع المقياس. بعد ذلك، ضع أنبوب NMR في فتحة شاغرة في صندوق العينات. دون رقم الفتحة التي وُضعت فيها العينة.لتحميل العينة في جهاز NMR، ارجع إلى جهاز الكمبيوتر الخاص بالتحكم واكتب SX-number، حيث تمثل number الفتحة الموجودة في حامل العينات والتي تحتوي على العينة. انتظر حتى تظهر إشارة الديتيريوم الخاصة بالكلوروفورم المديترن على الشاشة. وبمجرد ظهور إشارة الديتيريوم، اكتب lock" على سطر الأوامر واختر الكلوروفورم المديترن من قائمة المذيبات لتثبيت العينة باستخدام رنين الديتيريوم الخاص بها.اكتب "bsmsdisp" في سطر الأوامر للتأكد من أن عملية الدوران غير نشطة. إذا كان زر الدوران باللون الأخضر، فانقر عليه لإيقاف الدوران. بعد كتابة الأمر "new" لإنشاء مجموعة بيانات جديدة، أدخل اسماً لمجموعة البيانات في علامة تبويب الاسم ورقم التجربة في علامة تبويب رقم التجربة المعنونة بـ EXPNO.استخدم الرقم واحد في علامة تبويب رقم العملية المسماة PROCNO. اكتب عنوان التجربة في علامة تبويب TITLE. وفي علامة تبويب Experiment، انقر فوق Select واختر ملف المعاملات C13IG.بعد ذلك، اضغط على "Set selected item in editor" ثم انقر فوق OK. اكتب "getprosol" في سطر الأوامر للحصول على المعلمات القياسية للمجس NMR والمذيب المستخدم حالياً. ثم اكتب الأمر "atma" لإجراء الضبط التلقائي والمطابقة للمجس لكل من نوى الكربون والبروتون. بعد ذلك، قم بإجراء عملية موازنة التدرج أحادية البعد (one-dimensional gradient shimming) لتحقيق مجال مغناطيسي عالي التجانس، وبالتالي الحصول على الشكل الأمثل للخطوط لإشارات NMR.للقيام بذلك، استخدم الإجراء التلقائي القياسي لعملية الضبط أحادي البعد (1D shimming) ببساطة عن طريق تنفيذ الأوامر qu topshim 1dfast ss؛ و qu topshim tuneb ss؛ و qu topshim report بالتتابع في سطر الأوامر. وبعد تحسين المعلمات كما هو موضح في البروتوكول النصي، قم بالحصول على أطياف الرنين المغناطيسي النووي (NMR) للكربون أحادي البعد. وللقيام بذلك، انتقل إلى مجموعة بيانات الكربون واستخدم تسلسل نبضات مفكوك الاقتران ذو البوابة العكسية عن طريق كتابة pulprog zgig في سطر الأوامر.أدخل الأوامر في سطر الأوامر لضبط النطاق الطيفي باستخدام nppm، ومركز جهاز إرسال التردد الراديوي RF، وعدد عمليات المسح، وعدد عمليات المسح الوهمية، وعدد نقاط البيانات، ومدة النبضة لزاوية نبضة تبلغ تسعين درجة. ثم أدخل "digmod baseopt" في سطر الأوامر للحصول على طيف بخط أساس مُحسن. بعد ذلك، قم بضبط تأخير الاسترخاء على 60 s للجهاز الذي يعمل بتردد 850 megahertz عن طريق كتابة "di 60s" في سطر الأوامر.اضبط كسب المستقبل إلى قيمة مناسبة باستخدام الأمر rga" للحساب التلقائي لكسب المستقبل. أخيراً، ابدأ عملية الاستحواذ عن طريق كتابة أمر الاستحواذ على النبضة zg" في سطر الأوامر. لمعالجة البيانات، اكتب أولاً si 64K" في سطر الأوامر لتطبيق ملء الأصفار وتعيين حجم طيف السكك الحديدية إلى 64K.ثم اضبط معامل توسيع الخط على 1.0 hertz عن طريق كتابة "lb 1.0" في سطر الأوامر لتطبيق دالة انتظار بمعامل توسيع خط قدره 1.0 hertz قبل تحويل 4ea. نفذ تحويل 4ea عن طريق كتابة "efp" في سطر الأوامر. بعد ذلك، قم بإجراء تصحيح الطور التلقائي عن طريق كتابة الأمر "apk" في سطر الأوامر.إذا كانت هناك حاجة إلى تعديلات إضافية في الطور لتحسين الطيف بشكل أكبر، فانقر فوق علامة التبويب Process. ثم انقر فوق أيقونة Adjust Phase وأيقونات Phase Correction لتصحيح الطور من الرتبة صفر والرتبة الأولى. وأثناء النقر على أيقونات تصحيح الطور من الرتبة صفر والرتبة الأولى، قم بسحب الماوس حتى تصبح جميع الإشارات في وضع الامتصاص الموجب.قم بتطبيق قيم تصحيح الطور وحفظها بالنقر على زر Return and Save للخروج من وضع تصحيح الطور (Phase Correction). لتطبيق دالة حدودية من الدرجة الرابعة لتصحيح الخط القاعدي عند التكامل، اكتب الأمر abs n" في سطر الأوامر. للإبلاغ عن الإزاحات الكيميائية بوحدة ppm نسبةً إلى TMS، قم بتكبير إشارة TMS، ثم انقر على أيونة المعايرة (Calibration) وضع المؤشر مع الخط الأحمر فوق إشارة NMR المراد استخدامها كمرجع، وهي TMS في هذه الحالة.لتعديل شدة العتبة، استخدم الزر الأوسط للفأرة إذا لزم الأمر. انقر بزر الفأرة الأيسر واكتب 0. عند استخدام BHT كمعيار داخلي، قم بتكامل القمة عند delta 151.45 ممتدة بمقدار خمسة هرتز من كل جانب من القمة.بعد ذلك، اجعل التكامل مساوياً للميكرومولات من BHT لكل 0.5 milliliters من المحلول المخزون. قم بتكامل القمم المعنية التي تمتد بمقدار fiver hertz من كل جانب من جوانب القمة. إذا كانت هناك حاجة للتركيز على منطقة معينة، انقر فوق أيقونة التمييز لإلغاء تنشيطها.ثم انقر بزر الماوس الأيسر واسحب لتكبير المنطقة. انقر على أيقونة التمييز مرة أخرى لتنشيط وظيفة التكامل والانتقال إلى القمة التالية. انقر بزر الماوس الأيسر واسحب المؤشر عبر التكامل.انقر فوق زر Return Save Regions. يظهر هنا طيف نموذجي لتحليل Carbon NMR في منطقة كربون الكربونيل. تظهر إشارات NMR لكل من EPA و DHA في المواضع sn-1، 3 و sn-2.يمكن استخدام هذه الإشارات للتحديد الكمي لـ EPA وDHA. يظهر هنا طيف ممثل لتحليل proton NMR. كما تظهر إشارات NMR الخاصة بـ EPA وDHA التي يمكن استخدامها لتحديدهما.يتميز طيف الرنين المغناطيسي النووي للبروتون (proton NMR) بعرض طيفي أضيق مقارنة بطيف الرنين المغناطيسي النووي للكربون، وبالتالي دقة طيفية أقل. وبمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن إجراؤها في أقل من 30 دقيقة إذا تم تنفيذها بشكل صحيح. وبعد تطويرها، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال تحليل الدهون لتحليل مختلف مكونات الدهون التي تظهر في المصفوفات متعددة المكونات بسرعة، مثل المكملات الغذائية والزيوت النباتية والوقود الحيوي.بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تطبيق مطيافية الرنين المغناطيسي النووي (NMR) للبروتون والكربون لتحليل ملف الدهون في مكملات زيت السمك. لا تنسَ أن العمل مع المجالات المغناطيسية القوية التي تنتجها أجهزة مطياف الرنين المغناطيسي النووي يمكن أن يكون خطيرًا للغاية على أجهزة تنظيم ضربات القلب والأطراف الاصطناعية الجراحية، وكذلك العناصر الإلكترونية مثل بطاقات الائتمان والساعات.

nmr-spectroscopy-as-robust-tool-for-rapid-evaluation-lipid-profile

Research

JoVE Journal

Chemistry

الكيمياء

ويرد طريقة لاستخراج المستقلب من المجتمعات العوالق الجرثومية. ويتحقق كل مجتمع أخذ العينات عن طريق الترشيح على مرشحات أعدت خصيصا لذلك. بعد lyophilization، يتم استخراج مائي للذوبان في الأيضات. ويسمح هذا النهج لتطبيق الايض البيئية عبر omics التحقيقات في المجتمعات الميكروبية الطبيعية أو التجريبية.

تركيز من الأيضات من المجتمعات العوالق منخفض الكثافة لالايض البيئية باستخدام التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي

ووصف الإجراء الاستعمار التدريجي لمواصلة تقييم تأثيره على المضيف الاستقلاب الكبدي. ويتم رصد الاستعمار غير جراحية من خلال تقييم إفراز البول من الجراثيم التي شاركت في الأيضات الرنين المغناطيسي النووي القائم على التنميط الأيضية في حين يتم تقييم استقلاب كبدي بواسطة عالي الدقة ماجيك غزل زاوية (ماس HR) الرنين المغناطيسي النووي التنميط من الخزعة سليمة.

تقييم التغيرات الأيضية الكبدي خلال الاستعمار التدريجي الماوس مجانا من جرثومة 1 H NMR الطيفي

ووصف طريقة لتحديد محتوى الأحماض الدهنية وتكوين الطحالب في القائمة على تعطيل الميكانيكية الخلية، المذيبات استخراج الدهون مقرها، الجزيئيات التبادلي، والقياس الكمي وتحديد الأحماض الدهنية باستخدام كروماتوغرافيا الغاز. ويستخدم معيار الداخلية tripentadecanoin للتعويض عن الخسائر المحتملة خلال استخراج والجزيئيات التبادلي غير مكتملة.

تحليل الأحماض الدهنية المحتوى والتركيب في الطحالب الدقيقة

يوصف بروتوكول بسيط لتحديد محتوى الدهن محايدة من خلايا الطحالب باستخدام إجراء تلطيخ النيل الأحمر. هذه التقنية لتوفير الوقت يوفر بديلا للدهون البروتوكولات التقليدية الكمي القائم على الجاذبية. وقد تم تصميمه لتطبيق معين من الأداء رصد العمليات الحيوية.

بسيط وبروتوكول السريع لقياس الدهون في خلايا الطحالب المحايدة عن طريق الإسفار

تتغير الكيمياء العصبية لدماغ الثدييات في العديد من الأمراض العصبية والجهازية. يمكن الحصول على الملامح المميزة للمستقلبات الدماغية بكفاءة بناء على المستخلصات الخام لأنسجة المخ. تحقيقا لهذه الغاية ، يتم استخدام التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي عالي الدقة ، مما يتيح التحليل الكمي التفصيلي لتركيزات المستقلب (التمثيل الغذائي).

تحليل Metabolomic من دماغ الفئران بواسطة عالية الدقة النووية الرنين المغناطيسي الطيفي مقتطفات من الأنسجة

ويصف هذا البروتوكول سرعة نقل واحد للتقنيات التحليلية واوميكس تكميلية بلغت ذروتها في توصيف إقران تماما من المواد العضوية الطبيعية والبروتينات الميكروبية في النظم الإيكولوجية المختلفة. ويسمح هذا النهج مقارنات قوية لتحديد المسارات الأيضية والتحولات الهامة لوصف إنتاج غازات الدفيئة والتنبؤ بالاستجابات للتغير البيئي.

واحد الإنتاجية التكميلية التقنيات التحليلية عالية الدقة لوصف خليط معقد من المواد العضوية الطبيعية

تقدم هذه المقالة بروتوكولا معياريا لعلم الدهون في الأنسجة وعلم النسخ ، والدهون في البلازما في نماذج فئران الأمراض العصبية التي تستهدف الدهون الكامنة وراء الالتهاب والنشاط العصبي ، والدهون الغشائية ، والرسل في اتجاه المصب ، والإنزيمات / المستقبلات المشفرة للحمض النووي الريبوزي المرسال الكامنة وراء وظيفة الدهون. يتم تحديد إجراءات أخذ العينات ومعالجة العينات واستخراجها وقياسها كميا.

علم الشحوم وعلم النسخ في الأمراض العصبية

يسمح الفحص المجهري المحفز لتشتت رامان (SRS) بالتصوير الانتقائي الخالي من التسميات للمويات الكيميائية المحددة وقد تم استخدامه بشكل فعال لتصوير جزيئات الدهون في الجسم الحي. هنا، ونحن نقدم مقدمة موجزة لمبدأ المجهر SRS ووصف أساليب لاستخدامه في تخزين الدهون التصوير في Elegans Caenorhabditis.

التصوير الخالي من التسميات لديناميكيات تخزين الدهون في Elegans Caenorhabditis باستخدام المجهر التشتت رامان المحفزة

هذا البروتوكول هو لتحديد الدهون في مياه البحر والعينات البيولوجية. يتم استخراج الدهون في الخيوط مع الكلوروفورم أو خليط من الكلوروفورم والميثانول في حالة المواد الصلبة. يتم قياس فئات الدهون بواسطة الكروماتوغرافيا رقيقة الطبقة قضيب مع الكشف عن تأين اللهب ومجموعها يعطي محتوى الدهون الكلي.

تحديد مجموع الدهون والدهون الطبقات في العينات البحرية

تقدم الدهون القائمة على قياس الطيف الكتلي للبندقية لقطة كمية حساسة لمجموعة واسعة من فئات الدهون في وقت واحد في قياس واحد من أنسجة القوارض المختلفة.

بندقية الدهون من أنسجة القوارض

اكتشف تحليل البروفايل الدهني لمكملات زيت السمك باستخدام تقنية طيف الرنين المغناطيسي النووي. توفر هذه الطريقة تحليلاً سريعاً وقوياً للأحماض الدهنية وتوزيعها المكاني دون الحاجة إلى خطوات فصل معقدة.

NMR الطيفي كأداة قوية لتقييم السريع من الدهون الملف من السمك ملاحق النفط

استكشف المزيد من الفيديوهات