بروتوكول عالمي جرنة على نطاق واسع "الإنتاج مكتبة" من أي "مصدر الحمض النووي"

12.4K مشاهدة

استشهد بها 2

10:32 دقيقة

ديسمبر 6, 2017

10.3791/56264-v

ديسمبر 6, 2017

12.4K مشاهدة
 , 

ينبغي أن تكون أساليب لإنشاء مكتبات واسعة النطاق جرنة بسيطة وتتسم بالكفاءة والفعالية من حيث التكلفة. يصف لنا وضع بروتوكول لإنتاج مكتبات جرنة استناداً إلى الهضم الأنزيمي للهدف الحمض النووي. هذا الأسلوب، يعرض كورالينا (جرنة شامل مكتبة الجيل من خلال نشاط نوكلاس الخاضعة للرقابة) كبديل لتوليف اليغنوكليوتيد مخصصة مكلفة.

استكشف المزيد من الفيديوهات

نظام CRISPR/Cas9

Chapters in this video

0:05

العنوان

0:48

هضم الحمض النووي باستخدام إنزيم MNase وفصل قطع الحمض النووي بواسطة الفصل الكهربائي للهلام باستخدام بولي أكريلاميد (PAGE)

3:05

عزل قطع الحمض النووي من هلام PAGE وتوليد الوصلات

4:26

إصلاح النهايات للقطع المنقاة من الهلام وربط الوصلات

5:32

اختيار الحجم وتجميع بنية الناقل والمُدرج

6:18

التثقيب الكهربائي لخلايا E. coli من سلالة TG1 الكفؤة كهربائياً

8:38

النتائج: يمكن توليد مكتبة gRNA من الحمض النووي المستهدف

9:56

الخلاصة

Related Videos