إيمونوبريسيبيتيشن الكروماتين (رقاقة) من "التعديلات هستون" من Saccharomyces cerevisiae

12.5K مشاهدة

استشهد بها 8

11:06 دقيقة

ديسمبر 29, 2017

10.3791/57080-v

ديسمبر 29, 2017

12.5K مشاهدة

Meagan Jezek¹ , Alison Jacques¹ , Deepika Jaiswal¹ , Erin M. Green¹

¹Department of Biological Sciences, University of Maryland

هنا، يمكننا وصف بروتوكول الكروماتين إيمونوبريسيبيتيشن من هيستونيس المعدلة من مهدها الخميرة Saccharomyces cerevisiae. إيمونوبريسيبيتاتيد الحمض النووي بعد ذلك تستخدم ل PCR الكمي لاستجواب بوفرة والتعريب من التعديلات هيستون بوستترانسلاشونال في جميع أنحاء الجينوم.

استكشف المزيد من الفيديوهات

نوكلياز المكورات العنقودية

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي

محلل الخميرة

الربط التقاطعي بالفورمالديهايد

الخرزات المغناطيسية

Chapters in this video

0:05

العنوان

0:52

الربط التشابكي للبروتينات بالحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين *In Vivo*

2:19

تحضير مستخلصات الخميرة

4:08

الترسيب المناعي (IP) للهستونات المعدلة

5:11

غسل الرواسب المناعية، واستخلاص معقدات الهستون والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين، وعكس الربط التشابكي بين البروتين والحمض النووي

7:24

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) للكشف عن المناطق الجينومية المثرية

8:46

النتائج: الترسيب المناعي للكروماتين (ChIP) يكشف حالة تعديل الهستون في منطقة جينومية معينة

10:17

الخلاصة

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.