طريقة جديدة لحمل مثل الاكتئاب وسلوك في الفئران

الهدف العام من هذا النموذج هو إنشاء عدوى الاكتئاب في الفئران. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في المجال السلوكي مثل آلية العمل والوقاية والاحتواء وعلاج الاكتئاب المعدي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن هذا نموذج جديد لتأسيس الاكتئاب المعدي.

تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاج الاكتئاب لأنه في الوقت الحالي ، لا يوجد تنسيق حالي لدراسة الاكتئاب المعدي. بالنسبة للإجراء التجريبي ، اختر ذكور فئران Sprague Dawley التي لا تحتوي على أمراض علنية يتراوح وزن كل منها بين 300 و 350 جراما. ضع ثلاثة فئران في كل قفص مع توفر الطعام والمياه المتاحة.

اترك أسبوعين على الأقل من التكيف في دورة الضوء والظلام لمدة 12 ساعة. قبل بدء التجربة ، اختبر جميع الفئران بحثا عن وجود سلوكيات شبيهة بالاكتئاب باستخدام اختبار تفضيل السكروز لمدة ثلاثة أيام. للقيام بذلك ، ضع الفئران في أقفاص فردية في نفس غرفة السكن أثناء الدورة المظلمة.

ضع زجاجة من 100 مل من محلول السكروز 1٪ في كل قفص لمدة 24 ساعة واتركها للتكيف. بعد 24 ساعة ، قم بإزالة الزجاجات وحرم الفئران من الطعام والماء لمدة 12 ساعة. بعد 12 ساعة ، ضع زجاجتين ، إحداهما تحتوي على 100 مل من محلول السكروز بنسبة 1٪ والأخرى 100 مل من ماء الصنبور في كل قفص لمدة أربع ساعات.

بعد أربع ساعات ، سجل الحجم بالملليلتر حول محلول السكروز المستهلك والماء واحسب التقارب مع تفضيل السكروز كما هو موضح. تخلص من الفئران التي ثبتت إصابتها بالاكتئاب ، ثم تخلص من الفئران التي كانت موجودة في نفس أقفاص الفئران المكتئبة. إذا لزم الأمر ، استبعد الفئران الإضافية بشكل عشوائي لإنشاء المجموعات النهائية.

ضع علامة على الفئران باستخدام ملصقات مرقمة. للحث على الاكتئاب ، أخضع 60 فئرانا في الإجهاد المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به لأي اثنين من الضغوطات السبعة التالية. بترتيب عشوائي لمدة خمسة أسابيع متتالية ، استخدم أحد الضغوطات أثناء النهار والآخر في الليل.

بإيواء الفئران في مجموعات أكبر عن طريق وضع ستة فئران بدلا من الثلاثة المعتادة لكل قفص لمدة 18 ساعة. ضع الفئران في قفص مائل 45 درجة على طول المحور الرأسي لمدة ثلاث ساعات. الطعام يحرم الفئران لمدة 18 ساعة.

حرم الفئران من الماء لمدة 18 ساعة ، مما يعرضها لزجاجات المياه الفارغة بعد ساعة واحدة. ضع الفئران في قفص به فراش مبلل لمدة ثماني ساعات خلال الدورة الليلية. قم بتعريض الفئران للإضاءة المستمرة لمدة 24 ساعة في دورة عكسية للضوء والظلام مرتين في الأسبوع.

ضع الفئران في بيئة حارة عند 40 درجة مئوية لمدة خمس دقائق خلال الدورة الليلية. بعد التعرض للضغوطات المختارة ، تأكد من تطور الاكتئاب عن طريق إجراء اختبار تفضيل السكروز. أولا ، ضع فأرين معرضين لجامعة تكوير CUS لكل قفص في 30 قفصا مختلفا.

ثم أضف فأرا واحدا من مجموعة عدوى الاكتئاب إلى كل قفص يحتوي على فأرين معرضين لعدوى CUS والسماح بالتعايش لمدة خمسة أسابيع في ظل الظروف القياسية. بعد خمسة أسابيع من التعايش ، أخضع جميع المجموعات لتفضيل السكروز ، والحقول المفتوحة ، واختبارات السباحة القسرية. نظف الجهاز بالكحول بنسبة 5٪ قبل إدخال كل.

ضع الجرذ في زاوية الحقل المفتوح المواجه للحائط. سجل سلوك الفئران بكاميرا فيديو لمدة خمس دقائق. تحليل التسجيلات اللاحقة لمسافة السفر الإجمالية والسرعة في الجزء المركزي من الحقل والوقت الذي يقضيه في الجزء المركزي من الحقل.

للتعود ، ضع الجرذ في أسطوانة زجاجية تحتوي على ماء في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة. أخرج الفئران من الأسطوانة وجففها بالمناشف الورقية وضعها في قفص دافئ لمدة 15 دقيقة قبل إعادة الجرذ إلى قفص المنزل. في اليوم التالي ، قم بتصوير جلسة سباحة مدتها خمس دقائق بالفيديو وقم بتحليل التسجيلات بحثا عن الجمود والتسلق والتغوط.

بعد تعريض الفئران لخمسة أسابيع من CUS لتحريض الاكتئاب ثم تعريض الفئران السليمة لاحقا للفئران المعرضة ل CUS لمدة خمسة أسابيع أخرى ، أظهرت كلتا المجموعتين من الفئران سلوكيات شبيهة بالاكتئاب في النهاية كما هو موضح من انخفاض تفضيل السكروز. في اختبار المجال المفتوح ، انخفضت الفئران في كل من مجموعات عدوى CUS المعرضة والاكتئاب مسافات السفر الإجمالية وانخفضت متوسط السرعات مقارنة بالمجموعة الضابطة. كان الوقت الذي تقضيه الفئران من المجموعة الضابطة في المجموعتين التجريبيتين في وسط الحقل المفتوح مختلفا بشكل غير كبير.

أظهرت كل من الفئران المعرضة للعدوى والاكتئاب الجمود الممتد بعد اختبار السباحة القسرية. ومع ذلك ، تم تسجيل وقت طويل بشكل ملحوظ من الخمول فقط في المجموعة المعرضة لتجربة CUS عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة. في معلمة اختبار أخرى تم التحقيق فيها ، وقت التسلق ، أظهرت كلتا المجموعتين من فئران الاكتئاب المعرضة لعدوى CUS خصائص تسلق محدودة للغاية عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة.

نتج عن تقييم معدل التغوط تسجيل كميات كبيرة من البراز لكلتا المجموعتين التجريبيتين مقارنة بالسيطرة. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التخطيط مسبقا للتناوب العشوائي للضغوطات أثناء نموذج الإجهاد المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به بسبب ارتفاع الطلب على العمل اليدوي. باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء اختبارات أخرى مثل متاهة الجمع المرتفعة أو اختبار المرآة من أجل إجراء مزيد من التحقيق في التغييرات السلوكية بعد الاكتئاب.