بروتوكول لخلق الجروح المزمنة في الفئران السكري

يمكن لهذا النموذج الماوس تساعد في الإجابة على الأسئلة في المجال الطبي من مزمنة الجرح. الميزة الرئيسية لهذا النموذج هو أن الجروح المزمنة في الفئران تحاكي العديد من جوانب الجروح المزمنة في البشر. للبدء ، ضع الماوس على سطح نظيف والاحتفاظ به في مكانه عن طريق قرص قاعدة ذيله.

ثم إعداد مقصات الشعر وتكون على استعداد لسحب بسرعة بعيدا إذا كان الماوس يجعل أي حركات مفاجئة. حلق كامل الظهر من الرقبة إلى الذيل بما في ذلك جميع أنحاء الذيل. تشغيل طفيفة شفرة ضد اتجاه نمو الشعر لقطع الأكثر كفاءة.

لا تضغط على المقصات في عمق الجلد لأن هذا يمكن أن كدمة أو قطع. المقبل، وإعداد الجلد لتطبيق محلول إزالة الشعر. تبلّل الجلد بمنشفة ورقية منقوقة بالماء لمنع الحروق الكيميائية.

اضغط بخفة مع ما يكفي من الضغط لتبلل قص الشعر إلى أسفل ضد الجلد. ثم في حين أن الجلد الرطب، فرك dollop صغيرة من محلول مزيل في المنطقة حلق لمدة 15 إلى 20 ثانية. بمجرد تطبيقها، دع محلول يتفاعل مع الجلد لمدة 20 إلى 45 ثانية.

قبل الشطف قبالة محلول، مسح طفيفة بعيدا بعض محلول في مواقع مختلفة للتحقق من رد فعل. إذا كان الجلد ورديًا وبلا شعر ، فإن رد الفعل يكون كاملًا. ثم قبضة الماوس لغسله.

استخدام اليد nondominant مع الإبهام اضغط أسفل قاعدة ذيله ضد النخيل وإغلاق الأصابع الأخرى. ثم مع أنف الفأر صعودا وبعيدا عن الماء، والسماح للمياه تشغيل أكثر من ظهر الحيوان. ثم بسرعة، ولكن بلطف، فرك الجزء الخلفي من الماوس مع اليد الأخرى لغسل غسول.

بعد إزالة كل كريم إزالة الشعر، وتجفيف الجلد بمنشفة ورقية. من المهم عدم تطبيق محلول على الأذنين أو الذيل أو أي مكان بالقرب من الوجه. إذا كان هذا ينبغي أن يحدث، على الفور مسح محلول مع منشفة مبللة ثم تشغيل المياه فوق الماوس لمنع الأضرار التي لحقت هذه المناطق.

إذا لاحظت أي بقع داكنة بعد استخدام كريم، إعادة تطبيق كريم لتلك المناطق. سوف تنمو بقع داكنة من الجلد الشعر أسرع طوال مدة التجربة. حتى مقطع الشعر القصير كل ثلاثة إلى خمسة أيام عند الضرورة.

تصحيح أو اثنين التي ليست على مدى الجرح الموقع هو مقبول، ولكن إذا كان الجزء الخلفي من الماوس لديه بقع أكثر داكنة، لا تستخدم لنموذج الجرح المزمن. بعد إزالة الشعر، منزل الماوس وحده ليوم واحد على الأقل قبل الجرح لأن الجلد سوف تكون حساسة جدا من محلول إزالة الشعر. قبل 30 دقيقة من الجراحة، حقن الماوس مع 120 ميكرولتر من البوبرينورفين intraperitoneally في برنامج تلفزيوني عقيمة.

تفترض كافة وحدات التخزين في هذا الإجراء ماوس 60 غرام. قبل 20 دقيقة من الجراحة، حقن الماوس مع 480 ميكرولترات من ATZ intraperitoneally في برنامج تلفزيوني عقيمة. تقسيم وحدة التخزين على جانبي البطن.

بعد إدارة ATZ، ضع الماوس في حاوية بلاستيكية صغيرة فوق وسادة تدفئة دافئة حتى تبدأ الجراحة. غطي الحاوية الصغيرة بمنشفة ورقية للمساعدة في احتواء الحرارة. يجب أن تهدئة الماوس كما أنه يدفأ.

بعد التأكد من حالة تخدير، المضي قدما في الجرح. لبدء الإجراء الجرح، رش مسحة كيمية مع 70٪ الإيثانول لمسح الجزء الخلفي من الماوس لتنظيف موقع الجرح وسطح الجلد. لا يمسح بشكل مفرط أو سيكون هناك خطر قتل البكتيريا الموجودة على الجلد.

يعتمد نجاح نموذج الجرح المزمن على الظروف غير العقيمة. هذه الفئران ليست خالية من الجراثيم ويتم وضعها في فيفاريوم التقليدية. الميكروبيوم البكتيرية التي توجد على الجلد أمر بالغ الأهمية لبدء وتطوير الجروح المزمنة اللاحقة عند العلاج مع مثبطات الانزيمات المضادة للأكسدة.

الآن النظر في مكان المكان الجرح. من الناحية المثالية، استخدم الجانب الظهري من الماوس مركزة وبعيدا عن بقع داكنة من الجلد. الآن تنفيذ الجرح إلى إجراء خلع الملابس في 30 إلى 45 ثانية.

أولا اضغط بخفة على لكمة خزعة الجلد سبعة ملليمتر على موقع الجرح المطلوب وتحريف لكمة حول عميقة بما يكفي لترك انطباع من لكمة. ثم قم باستئصال الجلد المحدد عن طريق سحب ما يصل إلى مركز لكمة مع ملاقط وقطع على طول الخطوط العريضة مع مقص الجراحية. بمجرد الانتهاء، تغطية الجرح بحزم مع نصف قطعة من صلصة الفيلم شفافة.

في غضون 10 دقائق من الجرح، وتطبيق 60 ميكرولتر aliquot من MSA في برنامج تلفزيوني عقيمة وإيداع MSA موضعيا على الجرح. في وقت لاحق، ست ساعات بعد الجراحة، وإدارة آخر يفعل من البوبرينورفين. ويمكن إعطاء جرعات إضافية حسب الحاجة.

يحدث بدء الجروح المزمنة في أقل من ست ساعات ويتم تغيير هامش الجرح بشكل واضح من الإجهاد التأ المؤاكس. الجرح المزمن هو الجرح الذي لا يزال مفتوحا، الموسع مقارنة بالجرح الأولي ويحتوي على بيو فيلم. بعد 20 يوما، الجرح هو في كامل المزمنة.

بيو فيلم تشكيل البكتيريا التي تهيمن على موقع الجرح وتشمل Pseudomonas aeruginosa، Enterobacter cloacae، ومختلف أنواع المكورات العنقودية وكورينباكتيريوم. وتوجد هذه البكتيريا أيضا في الجروح المزمنة البشرية. بعد مشاهدة هذا الفيديو يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية خلق الجروح المزمنة في الفئران.

بمجرد أن تكون قد أنشأت هذه الجروح المزمنة ، يمكنك استخدامها بعد ذلك للتحقيق في العديد من الآليات الجزيئية الخلوية المشاركة في بدء مزمنة الجرح.