مقارنة عالية الاستبانة للترددات الاقتران البكتيري

يمكن لهذه الطريقة أن تساعد في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال علم الأحياء الدقيقة حول عدد المرات التي يمكن أن ينتشر فيها الحمض النووي البلازميد بين البكتيريا المختلفة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه من خلال الحد من الخلفية ، يمكننا اكتشاف اختلافات صغيرة في تردد الاقتران بدقة عالية. إثبات الإجراء سيكون كوسوكي ياناغيا، وهو طالب دراسات عليا من مختبري.

لحساب تردد الاقتران حسب العدد الأكثر احتمالا، مرشح ميت ملليلتر واحد من ثقافة المانحين بين عشية وضحاها مع ملليلتر واحد من ثقافة المتلقي بين عشية وضحاها لمدة 45 دقيقة في 30 درجة مئوية، كما هو موضح للتو. في حين أن الثقافة المشتركة هي احتضان، وتمييع تسلسليا المانح الأصلي والثقافات المتلقي للطلاء في ثلاث ية على مرق لوريا المانحة، أو LB، بالإضافة إلى kanamycin، أو LB المتلقي بالإضافة إلى لوحات gentamycin لثقافة لمدة يومين في 30 درجة مئوية. في نهاية الحضانة، resuspend الثقافة على مرشح في LB العقيمة التي تحتوي على كاناميسين وجنتاميسين لتخفيف المسلسل في لوحة ثقافة خلية 96 جيدا في رباعية.