في الموقع المجهر لتحديد في الوقت الحقيقي من المورفولوجية خليه واحده في العمليات الحيوية

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول عدم تجانس السكان من خلال التقييم المورفولوجي للخلايا. في المجهر في الموقع يسمح دراسة ظروف زراعة، وغلة العملية، وجودة المنتج. وتتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية في القياس في الموقع، الذي يوفر بيانات آنية دون أخذ العينات أو خطر التلوث.

يمكن أن يوفر المجهر في الموقع إلى جانب التعرف التلقائي على الصور معلومات إضافية حول الهياكل الخلوية والشكل وتكتل الخلايا الذي يتجاوز الحجم. من الممكن أيضاً قياس تركيزات الخلايا. وقد ثبت أن الأسلوب أداة يمكن الاعتماد عليها.

لا توجد طريقة بديلة توفر نفس المعلومات في مثل هذا الوقت القصير والجهد المنخفض لإعداد العينة. وقد تم تكييف هذه الطريقة لمختلف العمليات الحيوية والكائنات الدقيقة، والفطريات الشعيرة SEG، والحساسية الدقيقة، والخميرة. ويستخدم المسبار بالاقتران مع الحاسوب.

يتكون الجهاز من مسبار قضيب واحد مع كاميرا CCD عالية الدقة. يتم تصوير الخلايا التي تمر عبر فجوة قياس قابلة للتعديل بواسطة الكاميرا. يدخل الضوء الفجوة المقابلة للكاميرا، مما يعني أن الإضاءة هي عن طريق الإرسال.

تعيين معلمات الأجهزة باستخدام تركيزات الخلايا التي تمتد النطاق المتوقع. ابدأ في إجراء الاستعدادات للقياسات غير المتصلة بالإنترنت. استخدام مقياس سمك لضبط فجوة القياس.

ثم بدوره الجوز المسمار التحقيق لتعيين الفجوة قياس إلى خمسة أو 10 مرات قطر الخلية المتوقعة الحد الأقصى. في الكمبيوتر، افتح برنامج وحدة تحكم التحقيق. في البرنامج، حدد المسبار المطلوب والذهاب إلى إجراءات القسم.

ثم اضغط على الاتصال. بعد ذلك، انتقل إلى علامة التبويب "التحكم في المسبار" ثم افتحه. ابدأ بث الفيديو بالضغط على زر التشغيل.

إصلاح المسبار إلى ترايبود وتنفيذ الخطوات التالية لكل قياس. العمل مع التحقيق ورذاذ الإيثانول في فجوة القياس. امسح بعناية أي غبار أو تراب بالأوراق البصرية.

في الكمبيوتر، استخدم المنظر المباشر للتحقق من خلو زجاج المستشعر من الجسيمات. بعد ذلك، ضع ورقة بصرية جافة في فجوة القياس للتركيز. بدوره المسمار ملزمة لنقل التركيز يدويا.

التوقف عن التركيز عندما ألياف واحدة من ورقة في الفجوة قياس وينظر بوضوح. الآن، الحصول على أنبوب مليئة مرق الثقافة. تراجع المجهر في مرق، وبالتالي فإن الفجوة مغطاة تماما مع تعليق الخلية.

استخدام مسامير الربط لضبط التركيز على الخلايا. بمجرد الانتهاء من هذا التركيز، لا تقم بتغييره مرة أخرى أثناء التجربة. العودة إلى البرنامج الخاص بالتجربة.

انتقل إلى القائمة "المشغل". ضمن القائمة Triggering، قم بتعيين معدل الإطار. يوصى بهرتز واحد للقياسات دون اتصال.

من هناك، انتقل إلى حقل الإطارات لكل مشغل وتعيينه حسب الضرورة للإحصائيات الجيدة. هنا، حوالي 200. أيضا، انتقل إلى القائمة العامة.

هناك، حدد الدليل الذي سيتم حفظ الصور فيه. ابدأ الحصول على الصورة باستخدام الزر بدء تشغيل مشغل الصورة. نقل بلطف أنبوب للحث على تدفق في فجوة القياس.

استخدم الصور من التشغيل الأول للتجربة كـ مجموعة تدريب. وقد مفتوحة المصدر فيجي البرمجيات جاهزة وإسقاط الصور من التجربة في نافذتها. عند الانتهاء، حدد تحليل، متبوعاً بالأدوات، ثم مدير ROI.

بعد ذلك، اختر أداة تحديد. في الصورة، تقرر على الجسيمات إلى التعليق الذي هو في التركيز. رسم دائرة حوله مع أداة التحديد.

اضغط على إضافة لإضافة التعليق التوضيحي إلى مدير عائد الاستثمار. بعد ذلك، حدد أداة فرشاة واختر حجم بكسل مناسب. استخدم أداة الفرشاة لتحسين التحديد.

استمر في وضع علامات على جميع الأشياء ذات الأهمية بنفس الطريقة على حوالي 15 صورة. حفظ الملفات المشروحة واستخدامها كـ مجموعة تدريب. عندما يتم تدريب خوارزمية التعرف وجاهزة، استخدمها لتصور النتائج.

في "محلل النتائج"، انتقل إلى ملف متبوعاً "ملف الاستيراد". هناك، حدد ملف النتائج المطلوبة. تابع بالضغط على الزر إنشاء مخطط.

حدد مخطط التوزيع. هذا سيعرض التوزيع المورفولوجي للثقافة. العودة إلى إنشاء مخطط لتحديد رسم الحساسية.

يمكن أن تساعد المعلومات المعروضة في تحديد عدد الخلايا التي يجب تحليلها للحصول على الدقة المطلوبة. تنفيذ القياسات عبر الإنترنت بعد إكمال القياسات دون اتصال. بالنسبة للقياسات عبر الإنترنت، قم بتوصيل المسبار مباشرة بمُنْفِر حيوي.

مرة واحدة متصلة، تعقيم بشكل صحيح الجمعية. حدد المراقبة في لوحة المعلومات. هناك زر تشغيل لبدء الحصول على صورة وزر إيقاف لوضع حد لها.

اضغط على زر التشغيل. في مفاعل حيويّ, يبدأ تلقين من الثقافة. ستقوم الكاميرا بالتقاط فيديو للخلايا والتعرف عليها تلقائيًا للتحليل.

الرصد يوفر بيانات على الانترنت من أحجام الخلايا والأشكال من مورفولولوجيا الخلايا المختلفة خلال التخمير بأكمله. يمكن تنسيق نتائج الوقت الحقيقي بطرق مختلفة وكذلك تصديرها لمزيد من التحليل. يتم إنشاء هذه المؤامرة من التوزيعات التراكمية لقطر الخلية S.Cerevisiae من البيانات تحليلها باستخدام هذه التقنية.

وهو يوضح أن التعرف التلقائي على الخلايا قادر على التمييز بين الخلايا الناشئة وغير الناشئة. المنحنى الصلب هو التوزيع أثناء الزراعة في ثلاث ساعات. المنحنى المنقط هو توزيع نفس الزراعة في سبع ساعات.

يمثل المنحنى المتقطع البيانات التي تم جمعها في 13 ساعة. يستغرق إجراء التعليق التوضيحي وقتًا طويلاً، ولكنه المفتاح لتحقيق الدقة المطلوبة لتعريف الخلية. باستخدام هذا الإجراء، إذا كانت أوقات القياس أقصر من ديناميكيات العملية، فإن القياس في الوقت الحقيقي يكون قادراً على استخدامه للتحكم في العملية.

هذه التقنية تمهد الطريق لاستخدام قياس تجانس السكان كمعلمة عملية للزراعة الميكروبية من خطوات تطوير العملية المبكرة إلى مقياس الإنتاج.