Name: عملية جديدة للطباعة 3D ديسيلولاريزيد المصفوفات (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 14 s
Description: اكتشف طريقة الطباعة ثلاثية الأبعاد المشتركة للهياكل الاصطناعية والمكونات البيولوجية لإنشاء دعامات هندسة الأنسجة. تُحسّن هذه التقنية من ظروف زراعة الخلايا من خلال تكرير البيئة الطبيعية للأنسجة بدقة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم تمويل هذا المشروع جزئيا بمنحه من طب تقويم العظام المجتمع من أمريكا الشمالية (بوسنا) و "المعاهد الوطنية للصحة" منح نيبيب R21EB025378-01 (منحة بحثية الهندسة الحيوية الاستكشافية).

1-الحصول على وتجهيزها الجزئي المجالات الخرز الصغير
<ol><li>تغليف المنتجات الجزئي المجالات الخرز الصغير مع المصفوفة المطلوبة (جيش التحرير الشعبي الصيني مارك ألماني)2. ملاحظة: لا بد أن الجزئي المجالات الخرز الصغير ذات حجم موحد. لهذا السبب، من الضروري النخل الجزئي المجالات الخرز الصغير مسبقة لاستخدام. على الرغم من أن قد تم التفصيل مصفوفة ديسيلولاريزيشن والتغليف في المنشورات السابقة2، فيما يلي ملخص موجز للعملية.<ol>
<li>أولاً، الحصاد المقابس الغضروف من الخنزير هند أطرافه. ديسيلولاريزي الغضروف في سلسلة من يغسل مع 0.05% التربسين/0.5 مم صوديوم حمض الإيثيلين (يدتا)، تعديل دولبيكو النسر حمض الاستيك المتوسطة (دميم)، و 1.5% و 2.0% X-100 تريتون ح 4 كل مع يغسل الماء المقطر قبل وبعد كل خطوة2.</li>
		<li>استنزاف مصفوفة ديسيلولاريزيد وتجميدها، ليوفيليزي، وطحن ويذوب في حل بيبسن. وبعد انحلال، مزيج الحل بيبسن مع جيش التحرير الشعبي الصيني الذي قد تم حله في الميثان.</li>
		<li>إضافة الخليط دروبويسي إلى 3% البولي فينيل كحول في المحلول المائي. الطرد المركزي الناتج الجزئي المجالات الخرز الصغير والشطف واستنزاف، وليوفيليزي مرة أخرى. ملاحظة: للحصول على تفاصيل كاملة حول العملية انظر البروتوكول المنشورة سابقا2.</li>
	</ol>
</li>
	<li>منخل الجزئي في المجالات الخرز الصغير.<ol>
<li>التأكد من أن جميع لوحات غربال قد تم تنظيفها وجافة قبل الاستعمال. إذا كان ضروريا، نظيفة المسارب استخدام الموجات فوق الصوتية الأنظف ضمان إزالة كافة المجالات من المنخل.</li>
		<li>تجميع شاكر غربال مع علبة غربال ميكرومتر 106 في الجزء العلوي، علبة ميكرومتر 53 بعد، وغربال عموم في الجزء السفلي.</li>
		<li>وضع الجفاف الجزئي المجالات الخرز الصغير في علبة غربال الأعلى ووضع الغطاء على الدرج العلوي. قم بتشغيل النخل الخشنة لمقدار 8 إلى 10 تكرار في غرامة لمدة 8 إلى 10 دقائق. ملاحظة: قد تحتاج مرات غربال أن تزيد أو تنقص حسب الدفعة.</li>
		<li>إزالة لوحات غربال واحداً تلو الآخر ووضعها رأسا على عقب على ورقة كبيرة تزن بعناية. اضغط على الجانبين برفق للتأكد من أن معظم مجالات قد انخفضت من المنخل وعلى الورقة.</li>
		<li>تجاهل المجالات ذات الحجم الكبير (> 106 ميكرومتر) ومجالات الأصغر (< ميكرومتر 53). إضافة المجالات التي هي في حدود حجم ميكرون 53 إلى 106 إلى أنبوب الطرد مركزي مسمى مع عدد دفعة ونوع ثم ضعه في ثلاجة-20 درجة مئوية حتى استخدامها مرة أخرى.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2-ميكروسفيري مراقبة جودة التقييمات
ملاحظة: انظر الشكل 1.
<ol><li>إجراء تقييم العيانية والبصرية للتأكد أن الجزئي المجالات الخرز الصغير موحدة والكروية، مع لا من المجاميع الحالية.</li>
	<li>تقييم الجزئي المجالات الخرز الصغير باستخدام مسح الإلكترون صورة مجهرية (SEM).<ol>
<li>لهذا، مكان الجزئي المجالات الخرز الصغير إلى وزارة شؤون المرأة تشاك وتفل معطف مع البلاديوم الذهب في أجواء الأرجون استخدام المغطى الرش لسمك 4 نانومتر.</li>
		<li>ملاحظة السمات السطحية ومورفولوجيا وأقطار الجزئي المجالات الخرز الصغير باستخدام 10 كيلوفولت التعجيل بمسافة عمل 10 ملم والجهد لضمان أن الإنتاج والنخل للجزئي المجالات الخرز الصغير كان ناجحاً.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3-إنشاء خيوط للطباعة ثلاثية الأبعاد
<ol><li>قياس وتسجيل كتلة الجزئي المجالات الخرز الصغير التي تم الحصول عليها من الخطوات 2 و 3؛ ويلزم على الأقل 25 غراما.</li>
	<li>إضافة مسحوق polycaprolactone (PCL) إلى الجزئي المجالات الخرز الصغير لنسبة 1:4 وزن الجزئي المجالات الخرز الصغير إلى PCL.</li>
	<li>مزيج مسحوق الخليط في خلاط مصغرة متداول 20 لفة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ثم الوجه الحاوية ومزيج 20 لفة في الدقيقة لمدة 5 دقائق إضافية (انظر الشكل 2).</li>
	<li>العديد من اكستروديرس المتوفرة تجارياً (انظر الجدول للمواد) قد سترات عازلة لأن الحرارة العامل المقصود بهم خيوط النمذجة (FDM) ترسب تنصهر التقليدية. تعديل في الطارد (إذا لزم الأمر) عن طريق إزالة المواد العازلة واستخدامه في تركيبة مع المشجعين سطح المكتب (التي تهب الهواء المحيط على الطارد وخيوط مقذوف) لاستخدام الطارد عند درجات حرارة منخفضة. ملاحظة: مراوح سطح المكتب التي تهب الهواء المحيط لتبريد الطارد وخيوط مفيدة لهذا الإجراء.</li>
	<li>إعداد إعداد معدات البثق. انظر الشكل 3.<ol>
<li>الإعداد الطارد حيث يكون لها منفذ ~ 60 سم من المدخل للتخزين المؤقت، مع مسار مباشر من مخرج النتوء إلى مدخل المخزن المؤقت. ملاحظة: التخزين المؤقت يمكن اختيارياً يمكن رفع 3-4 بوصة من على مقاعد البدلاء إذا ما تبين أن الشعيرة هي تدلي إلى النقطة لمس في benchtop.</li>
		<li>ضع مروحة سطح مكتب ~ 15 سم من سترة التدفئة وتوجيهها صوب سترة التدفئة توفر التبريد مع الهواء المحيط في جميع أنحاء الإنتاج الشعيرة. ضع مروحة تبريد ثانية في منتصف الطريق تقريبا بين الطارد والتخزين المؤقت وتوجيهها صوب اكستروداتي للمساعدة في التبريد خيوط مع الهواء المحيط.</li>
		<li>ضبط الموضع كما هو مطلوب في جميع مراحل العملية.</li>
	</ol>
</li>
	<li>تعيين الطارد تعديل تدفئة العنصر إلى 52 درجة مئوية، وتشغيل سطح المكتب مراوح التبريد، وتسمح هذه الوسيلة للتوصل إلى التوازن لضمان أن فوهة المناسبة يتم إرفاقه الطارد كحد أدنى 20 إلى 30.</li>
	<li>فقط قبل بداية، ملء هوبر الطارد مع خليط ميكروسفيري/PCL من الخطوة 3، 3. تشغيل التخزين المؤقت ومثقب الطارد الشروع في البثق للشعيرة.</li>
	<li>عندما هو مقذوف الشعيرة الأولى، يدوياً سحب اكستروداتي من مخرج البثق بالملقط وتغذية للتخزين المؤقت الشعيرة.</li>
	<li>خيوط المطلوب سوف يستغرق بعض الوقت للخروج من التخزين المؤقت. استخدام البكرات منفصلة أو الشريط، الاحتفال بوضوح عندما يظهر تكوين خيوط بصريا موحد.</li>
	<li>رصد العملية عن كثب وتعديل المعلمات حسب الضرورة. ضبط درجة الحرارة الطارد، سرعة مثقب البثق وسرعة التخزين المؤقت للحصول على خيوط قطرها 1.75 مم مقاسا بالفرجار. ضبط الجماهير حسب الحاجة لتهدئة الشعيرة بشكل صحيح لتجنب المقاطع العرضية خيوط غير دائرية. خلط وتعبئة هوبر حسب الضرورة. ملاحظة: مطلوب الاهتمام الوثيق خلال هذه العملية للحصول على خيوط كافية للطباعة 3D اللاحقة. سيتم تغيير المعلمات أعلاه تبعاً للظروف المحيطة، ومستوى التعبئة وتوحيد المخلوط في هوبر، وديناميات الديناميكا الحرارية وتدفق من دفعات محددة PCL والجزئي المجالات الخرز الصغير.</li>
	<li>مواصلة البثق حتى قد استخدمت كل من المسحوق وهوبر فارغ تقريبا. إضافة مسحوق PCL (دون الجزئي المجالات الخرز الصغير) إلى هوبر لطرد الخليط ميكروسفيري في الطارد الوقت الحالي. متابعة إضافة مسحوق PCL إلى هوبر حتى لا الجزئي المجالات الخرز الصغير أكثر مرئية في اكستروداتي.</li>
	<li>ومن المؤكد أن تسمية ومنفصلة الشعيرة التي تتضمن الجزئي المجالات الخرز الصغير في تركيز المطلوب، كبعد أن يتم تبريده خيوط أصعب لتمييز خيوط موحدة من خيوط غير موحدة.</li>
	<li>مواصلة البثق حتى يكون هناك مسحوق أدنى اليسار في هوبر، ثم إيقاف تشغيل التخزين المؤقت, أوجير الطارد، الطارد والتدفئة، والمشجعين.</li>
</ol>4-الطباعة مع الشعيرة
<ol><li>تصميم هندسة الشكل المطلوب والنموذج باستخدام برنامج تصميم الحاسوب. ثم شريحة الطراز وإملاء toolpath استخدام البرمجيات تشريح متوافق مع 3D آلة الطباعة المستخدمة.</li>
	<li>تحميل خيوط من الخطوة 3 إلى أي طابعة FDM القياسية، مزودة بفوهات قياسية للقطر المطلوب (عادة 0.4 مم). تبدأ الطباعة (عادة في سرعة خطي 65-70 درجة مئوية و 300 ملم/دقيقة) كما الشعيرة المخصصة المودعة-قبل-طبقة طبقة بالجهاز.</li>
	<li>تأكد من تولي اهتماما خاصا للطبقة الأولى وضبط الإعدادات حسب الحاجة للحصول على نوعية جيدة من الطباعة. ملاحظة: يجوز إجراء تعديلات على سرعة الطباعة وطباعة درجة الحرارة ودرجة حرارة منصة، مضاعف البثق والمعلمات الأخرى. الرجوع إلى الطابعة ودليل الشركة المصنعة تشريح استكشاف الأخطاء وإصلاحها للحصول على مزيد من المساعدة.</li>
</ol>5-مراقبة جودة التقييم
<ol><li>وضع بنيات المطبوعة في SEM كوكس وتفل معطف مع البلاديوم الذهب في أجواء الأرجون استخدام المغطى الرش لسمك 4 نانومتر.</li>
	<li>مراقبة تحت المجهر باستخدام 10 كيلوفولت التعجيل بالجهد ومسافة عمل 10 ملم للتحقق من السمات السطحية ووجود أو غياب الجزئي المجالات الخرز الصغير إذا كان ذلك ممكناً.</li>
</ol>6-وظيفية اختبار من بنيات المطبوعة
ملاحظة: يمكن استخدام الفوسفاتيز القلوية (حزب العمال الأسترالي) كبديل لمصفوفة ديسيلولاريزيد لتحديد ما إذا كانت مغلفة البروتينات النشيطة بيولوجيا بعد عملية إنتاج خيوط. ويستخدم حزب العمال الأسترالي نظراً لأنه يحفز رد فعل من الركازة، فوسفات نيتروفينيل ف، أن تغير من عديم اللون إلى مشتقات الأصفر، فنيتروفينول والفوسفات غير العضوي، ولكن فقط إذا كان الب في تكيف وظيفي.
<ol><li>طباعة هندسة (n = 3) الذي يحتوي على كتلة نهاية على الأقل 400 ملغ مع خيوط ميكروسفيري الب (PCL-الب/جيش التحرير الشعبي الصيني) باستخدام معلمات طباعة متطابقة السقالات PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-مارك ألماني. أيضا طباعة PCL-فقط (السقالات PCL(-)) للهندسة نفسه السقالات PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-الب. تغرق بها في المخزن المؤقت تريس-HCl 1 مل واحتضانها ح 24 في تناوب 37 درجة مئوية و 110 دورة في الدقيقة للسماح بنشر الإنزيم.</li>
	<li>أضف 1 مل من 1 ملغ/مل فنيتروفينيل فوسفات وثنائي سداسي هيدرات في تريس-HCl. إينكوباتي في 37 درجة مئوية، في الدقيقة 110 ل h. 10 إضافية قراءة امتصاص طافية في 415 نانومتر.</li>
</ol>

<ol><li>Hutchmaker, D., Teoh, S., Zein, I., Ng, K. W., Schantz, J. -T., Leahy, J. C. <a target="_blank" href="https://www.astm.org/DIGITAL_LIBRARY/STP/PAGES/STP15307S.htm">Design and Fabrication of a 3D Scaffold for Tissue Engineering Bone.</a> Synthetic Bioabsorbable Polymers and Implants. 15 (2), 845-847 (1988).</li>
<li>Ghosh, P., Gruber, S. M. S., Lin, C. -Y., Whitlock, P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29394158">Microspheres containing decellularized cartilage induce chondrogenesis and remain functional after incorporation within a poly(caprolactone) filament useful for fabricating a 3D scaffold.</a> Biofabrication. , (2018).</li>
<li>Partington, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemical+changes+caused+by+decellularization+may+compromise+mechanical+integrity+of+tracheal+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Biochemical changes caused by decellularization may compromise mechanical integrity of tracheal scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 9 (2), 5251-5261 (2013).</li>
<li>Hutmacher, D. W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11071603">Scaffolds in tissue engineering bone and cartilage.</a> Biomaterials. 21 (24), 2529-2543 (2000).</li>
<li>Kang, H., Hollister, S. J., La Marca, F., Park, P., Lin, C. -Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porous+biodegradable+lumbar+interbody+fusion+cage+design+and+fabrication+using+integrated+global-local+topology+optimization+with+laser+sintering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+biomechanical+engineering%22%5BJournal%5D)">Porous biodegradable lumbar interbody fusion cage design and fabrication using integrated global-local topology optimization with laser sintering.</a> Journal of biomechanical engineering. 135 (10), 101013-101018 (2013).</li>
<li>Kang, H., Lin, C. Y., Hollister, S. J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s00158-010-0508-8">Topology optimization of three dimensional tissue engineering scaffold architectures for prescribed bulk modulus and diffusivity.</a> Structural and Multidisciplinary Optimization. 42 (4), 633-644 (2010).</li>
<li>Lin, C. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+bone+engineering+using+ex+vivo.+gene+therapy+and+topology-optimized%2C+biodegradable+polymer+composite+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering%22%5BJournal%5D)">Functional bone engineering using ex vivo. gene therapy and topology-optimized, biodegradable polymer composite scaffolds.</a> Tissue Engineering. 11 (9-10), 1589-1598 (2005).</li>
<li>Lin, C. -Y., Hsiao, C. -C., Chen, P. -Q., Hollister, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interbody+Fusion+Cage+Design+Using+Integrated+Global+Layout+and+Local+Microstructure+Topology+Optimization%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Interbody Fusion Cage Design Using Integrated Global Layout and Local Microstructure Topology Optimization.</a> Spine. 29 (16), 1747-1754 (2004).</li>
<li>Zopf, D., Hollister, S., Nelson, M., Ohye, R., Green, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioresorbable+Airway+Splint+Created+with+a+Three-Dimensional+Printer%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Bioresorbable Airway Splint Created with a Three-Dimensional Printer.</a> New England Journal of Medicine. 368 (21), 2043-2045 (2013).</li>
<li>Pati, F., Song, T. H., Rijal, G., Jang, J., Kim, S. W., Cho, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ornamenting+3D+printed+scaffolds+with+cell-laid+extracellular+matrix+for+bone+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Ornamenting 3D printed scaffolds with cell-laid extracellular matrix for bone tissue regeneration.</a> Biomaterials. 37, 230-241 (2015).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+interface+microstructure+on+interfacial+shear+strength+for+osteochondral+scaffolds+based+on+biomimetic+design+and+3D+printing%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Science+and+Engineering+C%22%5BJournal%5D)">The effect of interface microstructure on interfacial shear strength for osteochondral scaffolds based on biomimetic design and 3D printing.</a> Materials Science and Engineering C. 46, 10-15 (2015).</li>
<li>Williams, J. M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15763261">tissue engineering using polycaprolactone scaffolds fabricated via. selective laser sintering.</a> Biomaterials. 26 (23), 4817-4827 (2005).</li>
<li>Monibi, F. A., Cook, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-Derived+Extracellular+Matrix+Bioscaffolds%3A+Emerging+Applications+in+Cartilage+and+Meniscus+Repair%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">Tissue-Derived Extracellular Matrix Bioscaffolds: Emerging Applications in Cartilage and Meniscus Repair.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. , (2017).</li>
<li>Wiles, K., Fishman, J., Coppi, P., Birchall, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Host+Immune+Response+to+Tissue-Engineered+Organs%3A+Current+Problems+and+Future+Directions%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">The Host Immune Response to Tissue-Engineered Organs: Current Problems and Future Directions.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 22 (3), (2016).</li>
<li>Sutherland, A. J., Detamore, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioactive+Microsphere-Based+Scaffolds+Containing+Decellularized+Cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecular+Bioscience%22%5BJournal%5D)">Bioactive Microsphere-Based Scaffolds Containing Decellularized Cartilage.</a> Macromolecular Bioscience. , (2015).</li>
<li>Whitlock, P. W., Smith, T. L., Poehling, G. G., Shilt, J. S., Van Dyke, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+naturally+derived%2C+cytocompatible%2C+and+architecturally+optimized+scaffold+for+tendon+and+ligament+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A naturally derived, cytocompatible, and architecturally optimized scaffold for tendon and ligament regeneration.</a> Biomaterials. , (2007).</li>
<li>Whitlock, P. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+cyclic+strain+on+tensile+properties+of+a+naturally+derived%2C+decellularized+tendon+scaffold+seeded+with+allogeneic+tenocytes+and+associated+messenger+RNA+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+surgical+orthopaedic+advances%22%5BJournal%5D)">Effect of cyclic strain on tensile properties of a naturally derived, decellularized tendon scaffold seeded with allogeneic tenocytes and associated messenger RNA expression.</a> Journal of surgical orthopaedic advances. 22 (3), 224-232 (2013).</li>
<li>Whitlock, P. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+process+for+optimizing+musculoskeletal+allograft+tissue+to+improve+safety%2C+ultrastructural+properties%2C+and+cell+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery+-+Series+A%22%5BJournal%5D)">A novel process for optimizing musculoskeletal allograft tissue to improve safety, ultrastructural properties, and cell infiltration.</a> Journal of Bone and Joint Surgery - Series A. 94 (16), 1458-1467 (2012).</li>
<li>Schultz, G. S., Davidson, J. M., Kirsner, R. S., Herman, I. M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21362080">Dynamic Reciprocity in the Wound Microenvironment.</a> Wound Repair Regeneration. 19 (2), 134-148 (2012).</li>
<li>Benders, K. E. M., van Weeren, P. R., Badylak, S. F., Saris, D. B. F., Dhert, W. J. A., Malda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+matrix+scaffolds+for+cartilage+and+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Extracellular matrix scaffolds for cartilage and bone regeneration.</a> Trends in Biotechnology. 31 (3), 169-176 (2013).</li>
<li>Crapo, P., Gilbert, T., Badylak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+tissue+and+whole+organ+decellularization+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">An overview of tissue and whole organ decellularization processes.</a> Biomaterials. 32 (12), 3233-3243 (2011).</li>
<li>Guan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+kidneys+as+a+source+of+ECM+scaffold+for+kidney+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Science+and+Engineering+C%22%5BJournal%5D)">Porcine kidneys as a source of ECM scaffold for kidney regeneration.</a> Materials Science and Engineering C. 56, 451-456 (2015).</li>
<li>Dean, R. L. <a target="_blank" href="https://iubmb.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/bmb.2002.494030060138">Kinetic studies with alkaline phosphatase in the presence and absence of inhibitors and divalent cations.</a> Biochemistry and Molecular Biology Education. 30 (6), 401-407 (2002).</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

كلا ديسيلولاريزيد المصفوفات وأظهرت 3D السقالات PCL المطبوعة بشكل مستقل للسماح بإصلاح التصاق وتكاثر الخلايا، والتحقق من استخدامها ل osteochondral10،،من1112. استخدام مصفوفة ديسيلولاريزيد في النهج الهندسية لإصلاح الأنسجة كان موضوعا للكثير من الاهتمام والنجاح في2،3،،من1415الأخيرة. وقد لاحظنا سابقا زيادة ال...

استخدام التقنيات الهندسية الأنسجة الحالية للتطبيقات السريرية مثل إعادة بناء العظام والغضاريف والاوتار والرباط السيارات--واللوجرافتس لإصلاح الأنسجة التالفة. كل من هذه التقنيات هو يؤديها بشكل روتيني ك "معيار الذهبي" في الممارسة السريرية أول حصاد الأنسجة المانحة سواء من المريض أو تطابق المأخوذة، وثم وضع الأنسجة المانحين إلى عيب الموقع2. ومع ذلك، تقتصر هذه الاستراتيجيات المانحة الموقع الاعتلال، ندرة موقع المانحة لعيوب كبيرة، خطر العدوى، وصعوبة العثور على الطعوم التي تطابق هندسة المرجوة. وباﻹضافة إلى ذلك، وقد أظهرت الدراسات أن اللوجرافتس المستخدمة لإعادة الإعمار قد خفضت الخصائص الميكانيكية والبيولوجية بالمقارنة مع الأنسجة الأصلية3. هذه الاعتبارات في الحسبان، ومهندسو الأنسجة تحولت مؤخرا إلى بيوبرينتينج (ثلاثي الأبعاد) الأبعاد الثلاثة لإنتاج الهندسات مخصصة، ومجمع النشيطة بيولوجيا ومصممة لاستيعاب حجم الخلل والشكل مع توفير كافية خصائص ميكانيكية حتى اكتمال إعادة عرض البيولوجية.
ومن الناحية المثالية، سيتألف سقالة طباعة 3D دعامة البوليمرية يمكن الاحتفاظ باستقرار الميكانيكية المطلوبة من الأنسجة الأصلية بينما تقدم البيولوجي إدراج الإشارات البيوكيميائية المحيطة بالخلايا، مما يؤدي إلى الهجرة، الانتشار، التمايز، والأنسجة إنتاج2،5. ولسوء الحظ، تتم معظم بنيات التي تحتوي على المكونات البيولوجية مع المواد الهلامية أو البوليمرات التي أضعف من أن يصمد في فيفو القوات تتعرض الأنسجة المستهدفة لإعمار السيارات/allograft. البوليمرات الأخرى مثل حمض اللبنيك (جيش التحرير الشعبي) هي بيوريسوربابل، 3D للطباعة وهيكليا الصوت، ولكن يتم طباعتها في درجات الحرارة عند أو فوق 210 درجة مئوية--مما يجعل من المستحيل البيولوجي أن المطبوع المشترك أثناء التصنيع. Polycaprolactone (PCL) هو آخر مسح إدارة الأغذية والعقاقير، بيوريسوربابل البوليمر يمكن أن 3D مطبوعة في درجة حرارة أقل (65 درجة مئوية)، التي أصبحت شعبية متزايدة في اختﻻق يزرع المريض على حدة مع مجمع مورفولوجيس5،6 7، ،،من89. بيد أن معظم بيوبرينتيرس باستخدام هوائي التكنولوجيا تجعل من المستحيل على طباعة PCL عند درجات حرارة منخفضة حيث يمكن أن تظل الأنشطة البيولوجية سالمين. حتى الآن، على إدماج هذه البوليمرات مع السيارات/اللوجرافتس مادة بيولوجية قابلة لطباعة رواية لم يتحقق. في غياب مثل هذه المواد، من المستبعد نهجاً صحيحاً أنسجة المهندسة لإعادة بناء الأنسجة. ولذلك، قد سعت إلى الجمع بين جيش التحرير الشعبي الصيني، PCL، وديسيلولاريزيد مصفوفات allograft (مارك ألماني) الاستفادة من مزايا كل المواد لصنع بنية سليمة قادرة على إعادة بناء الأنسجة المعقدة. هذه العملية ستوفر القوة الميكانيكية الأولية اللازمة لمقاومة القوات في فيفو والثبات الحراري لاستيعاب التصنيع المضافة في بنية الحث على تشكيل النسيج المطلوب.
في محاولة الأخيرة لمعالجة العقبات السالفة الذكر، واظهرنا أنه من الممكن لتغليف الغضروف ديسيلولاريزيد المصفوفة خارج الخلية داخل حاجز جيش التحرير الشعبي الصيني حرارياً واقية التي يمكن مقذوف داخل خيوط PCL، الحفاظ على قدرة مارك ألماني للتأثير على الخلايا المضيفة المحيطة بها2. هذا وقد الهمتنا التماس نهج فعالة سريرياً لإعادة بناء الأنسجة. في الدراسة الحالية، ويمكننا الاستفادة من التكنولوجيا منصة لبناء السقالات الكل في واحد التي تشمل جيش التحرير الشعبي الصيني، مارك ألماني، و PCL (PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-مارك ألماني).
أن هدفنا تحسين الفعالية والفائدة من اللوجرافتس باستخدام تقنية بيوفابريكيشن الجديدة المقترحة أن الخص أدق الأنسجة الأصلية، وفي النهاية استخدامها في مختلف التطبيقات.

<table><tbody><tr><td>آلة الغربال</td><td>هافر & أمبير Boecker Tyler</td><td>Ro-Tap RX 29-E Pure</td><td></td></tr><tr><td>Sieve 90 um</td><td>Fisherbrand</td><td>170328156</td><td>رقم 170</td></tr><tr><td>غربال 53 um</td><td>Fisherbrand</td><td>162513588</td><td>رقم 270</td></tr><tr><td>غربال 106 um</td><td>Fisherbrand</td><td>162018121</td><td>رقم 140</td></tr><tr><td>Sputter coater</td><td>Leica</td><td>n / a</td><td></td></tr><tr><td>مجهر إلكتروني ماسح</td><td>هيتاشي ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>غير متوفرة</td><td></td></tr><tr><td>Filabot EX2</td><td>Filabot.com</td><td>FB00061</td><td></td></tr><tr><td>Filabot Spooler</td><td>Filabot.com</td><td>FB00073</td><td></td></tr><tr><td>CAPA 6506</td><td>Perstorp</td><td>24980-41-4</td><td></td></tr><tr><td>محلول ملحي مخزن بالفوسفات ، PBS</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>6</td><td>"منطقة راحة المروحة ، حمام مائي بالموجات فوق الصوتية Amazon</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td></td><td>كول بارمر</td><td>SK-08895-13</td><td></td></tr><tr><td>Dreamer</td><td>FlashForge</td><td>n / a</td><td></td></tr><tr><td>Drum Mixer</td><td>مصنوع حسب الطلب</td><td>N / A</td><td>قطعة مماثلة من المعدات: https://www.coleparmer.com/i/argos-technologies-flexiroll-digital-tube-roller-shaker-120-vac/0439744?PubID=UX&persist=true&ip = no & gclid = CjwKCAjw- dXaBRAEEiwAbwCi5khGDMz0 dTjsraEsBGfhMEH7ytx LQWGUPNgUJYQ1p3vj_yxkYoI_ ixoC9GwQAvD_BwE</td></tr><tr><td>Micro Balance</td><td>Mettler Toledo، Fisher Scientific</td><td>01-913-851</td><td></td></tr><tr><td>Simplify3D</td><td>Simplify3D</td><td>n / a</td><td></td></tr><tr><td>SolidWorks</td><td>SolidWorks SolidWorks</td><td>n / a</td><td></td></tr><tr><td>المجهرية</td><td>المنتجة داخليا ، انظر بشكل متزامن قدمت JoVE تقديم</td><td></td><td></td></tr><tr><td>فوسفات p-nitrophenyl ، ملح ثنائي الصوديوم ، سداسي هيدرات</td><td>Millipore</td><td>4876-5GM</td><td></td></tr><tr><td>فوسفاتيز ، قلوي</td><td>Roche Diagnostics GmbH</td><td>10 713 023 001</td><td></td></tr><tr><td>قارئ الامتصاص</td><td>Tecan</td><td>Sunrise</td><td></td></tr><tr><td>Tris-HCl Buffer</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6455-100ML</td><td></td></tr><tr><td>شاكر ساخن</td><td>جديد برونزويك العلمي</td><td>إكسيلا E24</td><td></td></tr></tbody></table>

عملية جديدة للطباعة 3d ديسيلولاريزيد المصفوفات

Novel Process for 3D Printing Decellularized Matrices

بيوبرينتينج 3D يهدف إلى إنشاء مخصص السقالات النشيطة بيولوجيا واستيعاب الحجم المطلوب والهندسة. دعامة حرارية يمكن أن توفر الاستقرار ميكانيكية مشابهة للنسيج الأصلي بينما توفر العوامل البيولوجية العظة التركيبية للخلايا السلف، مما يؤدي إلى الهجرة والانتشار، والتمايز إلى إعادة تشكيل الأنسجة الأصلية/ أجهزة1،2. لسوء الحظ، العديد من متوافق مع 3D الطباعة، البوليمرات بيوريسوربابل (مثل حمض اللبنيك، جيش التحرير الشعبي الصيني) المطبوع في درجات حرارة 210 درجة مئوية أو أعلى--درجات الحرارة التي تضر بالبيولوجي. من ناحية أخرى، هو polycaprolactone (PCL)، نوع مختلف من البوليستر، بيوريسوربابل، ومواد للطباعة ثلاثية الأبعاد يحتوي على درجة حرارة طباعة الطف من 65 درجة مئوية. ولذلك، كان الافتراض بأنه المصفوفة خارج الخلية ديسيلولاريزيد (ألماني) الواردة ضمن حاجز جيش التحرير الشعبي الصيني حرارياً وقائي يمكن أن تكون طباعة داخل الشعيرة PCL والبقاء في أن تكيف وظيفي. في هذا العمل، كان إصلاح osteochondral التطبيق التي تم اختبار الفرضية. على هذا النحو، كان ديسيلولاريزيد الغضاريف الخنزير ومغلفة في polylactic حمض (جيش التحرير الشعبي) الجزئي المجالات الخرز الصغير الذي كان مقذوف ثم مع polycaprolactone (PCL) في خيوط لإنتاج 3D بنيات عبر تنصهر فيها ترسب النمذجة. بنيات مع أو بدون الجزئي المجالات الخرز الصغير (PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-مارك ألماني و PCL(-)، على التوالي) تم تقييم الفروق في السمات السطحية.

بعد النخل، ينبغي أن تظهر موحدة الجزئي المجالات الخرز الصغير وتكون خالية من المجاميع. تحت وزارة شؤون المرأة، ينخل الجزئي المجالات الخرز الصغير قد المسام الصغيرة على سطحها، ولكن خلاف ذلك تكون كروية والسلس، كما هو مبين في الشكل 1. ينبغي أن تكون جميع خيوط مقذوف قطرها موحد وشريحة دائرية. خيوط تحتوي على الجزئي المجالات الخرز الصغير (PCL/جيش التحرير الشعبي الصيني-مارك ألماني) سوف يكون ماتي أكثر قليلاً الانتهاء بينما PCL فقط (خيوط PCL(-)) تبدو أكثر لامعة. كما سيشعرون...

ويصف هذا البروتوكول إنتاج خيوط polycaprolactone (PCL) مع المضمنة polylactic حمض (جيش التحرير الشعبي) الجزئي المجالات الخرز الصغير التي تتضمن مصفوفات ديسيلولاريزيد (ألماني) للطباعة 3D من الأنسجة الهيكلية الهندسية بنيات.

عملية جديدة للطباعة 3D ديسيلولاريزيد المصفوفات

3D bioprinting aims to create custom scaffolds that are biologically active and accommodate the desired size and geometry. A thermoplastic backbone can ...

تسمح هذه الطريقة بالطباعة المشتركة لكل من التركيبات التركيبية الهيكلية والمكونات البيولوجية للسقالات المهندسة للأنسجة. يمكن لهذه السقالات تكرار بيئة الأنسجة الأصلية بشكل أكثر دقة ، والتي يمكن أن تكون مفيدة للخلايا المستزرعة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن طباعة هياكل الصوت ميكانيكيا دون إتلاف المواد البيولوجية المغلفة داخل السقالات في تقنية الكل في واحد لهندسة الأنسجة.إنتاج microspheres مع المصفوفة المطلوبة مغلفة. وقد صنعت هذه microspheres مع غضروف decellularized من أطرافها الخلفية porcine. أنها تختلف في الحجم.العمل مع آلة منخل للحصول على microspheres من حجم موحدة. تأكد من أن الصواني المنخلة الثلاثة قد تم تنظيفها وتجفيفها قبل الاستخدام. تجميع شاكر المنخل مع علبة شبكة أكبر على رأس وصينية شبكة أصغر في الوسط.ضع مقلاة الغربال في الأسفل. ضع microspheres الجافة في أعلى علبة. ثم ضع الغطاء على الدرج.منخل خشن لمدة 8 إلى 10 دقائق. ثم منخل غرامة لمدة ثماني إلى عشر دقائق. أثناء الانتظار، وترتيب ورقة وزن للمجالات منخل.عندما يكتمل الينج، قم بإزالة صينية منخل بعناية. ضع الدرج رأسًا على ورق الوزن. الاستفادة بلطف الجانبين لضمان معظم المجالات تسقط.مع كل من لوحات المنخل افرغت على ورقة تزن، والتخلص من المجالات المتضخم و الحجم. المجالات المتبقية لها الحجم الصحيح للاستخدام في الخطوات اللاحقة. ضع هذه المجالات في أنبوب الطرد المركزي المسمى.تخزين الأنبوب في 20 درجة مئوية الفريزر حتى الحاجة. وزن المواد اللازمة لجعل المواد خيوط. جعل نسبة الوزن واحد إلى أربعة من microspheres لمسحوق polycaprolactone مع ما لا يقل عن 25 غراما من microspheres.نقل خليط مسحوق إلى خلاط المتداول مصغرة. اخلطي المسحوق بمعدل 20 دوران في الدقيقة لمدة خمس دقائق. بعد خمس دقائق، إيقاف التدوير والوجه الحاوية.ثم اخلطي 20 دورة في الدقيقة لمدة خمس دقائق إضافية. للمتابعة، خذ الخليط إلى إعداد الطارد والمجعد. إعداد الطارد حتى مأخذه حوالي 60 سم من مدخل التخزين المؤقت.ثم في عنصر التدفئة الطارد، تأكد من عدم وجود سترة عازلة. ضع مروحة سطح المكتب في منتصف الطريق بين الطارد والمجعد لتبريد البثق. وضع مروحة أخرى بالقرب من سترة التدفئة لتبريده مع الهواء المحيط.المقبل ضمان يتم إرفاق فوهة المناسبة إلى الطارد وتعيين درجة حرارة عنصر التدفئة. بدء تشغيل مراوح التبريد والسماح الصك للوصول إلى حالة ثابتة. بعد 20 إلى 30 دقيقة، والحصول على خليط PCL مجهري وملء النطاط الطارد.بدوره على التخزين المؤقت وبثق البثق لبدء البثق خيوط. استخدام ملقط وسحب يدويا خيوط مقذوف الأولية. تغذية خيوط إلى التخزين المؤقت خيوط.كما هو مقذوف، لاحظ خيوط لتحديد تكوينها. بعد بعض الوقت، سوف تظهر تركيبة خيوط موحدة وهو المطلوب. شريط التفاف حول خيوط بمناسبة بداية المنطقة موحدة.وراء بكرات التخزين المؤقت، مراقبة قطر خيوط. استخدام الفرجار لاختبار ما إذا كان القطر قريب من 1.75 مم المطلوب. ضبط التخزين المؤقت والطارد سرعات ودرجات الحرارة حسب الضرورة.لضبط قطر خيوط، أولاً قم بتغيير سرعات التخزين المؤقت والطارد. يمكنك أيضا تغيير درجة الحرارة الطارد، على الرغم من أن هذا عادة ما يكون غير ضروري. مواصلة إعادة ملء النطاط وقذف حتى يتم استخدام كل من مسحوق.عندما يكون النطاط فارغًا تقريبًا ، أضف مسحوق PCL إلى النطاط لطرد خليط الغلاف الدقيق. مراقبة البثق في حين إضافة مسحوق PCL. في البداية، سوف لا تزال microspheres تكون مرئية في مقذوف.في نهاية المطاف عندما لا يكون أكثر microspheres مرئية، والتوقف عن إضافة PCL. فصل وتسمية خيوط مع microspheres في التركيز المطلوب. عندما يكون هناك الحد الأدنى من مسحوق في النطاط، ووقف البثق وإيقاف تشغيل المعدات.ويمكن استخدام خيوط في معيار تنصهر ترسب النمذجة الطابعة. قم بتحميل خيوط في الطابعة التي تم تركيبها مع فوهات القطر المطلوب. مع النموذج محملة، تعيين درجة الحرارة وسرعة الخطية للطباعة والبدء في إيداع خيوط.يتم إيداع خيوط مخصصة طبقة حسب الطبقة. إيلاء اهتمام خاص للطبقة الأولى وضبط الإعدادات حسب الحاجة. من الصعب تمييز هذه السقالات المطبوعة ثلاثية الأبعاد على هذا المقياس.واحد لديه خيوط تحتوي على البولي كاب تراكيلكتون، PCL فقط. والآخر لديه خيوط PCL مع microspheres جزءا لا يتجزأ من حمض متعدد الولاتشات والمصفوفات ديسيلوارييد. نظر باستخدام المجهر الإلكتروني المسح، سقالة PCL فقط يبدو على نحو سلس في الغالب.وعلى النقيض من ذلك، بالنسبة للخيوط الأخرى، تظهر الميكروسفيرات المضمّنة في PCL في جميع أنحاء العينة. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر أن أكثر من أو أصغر microspheres يمكن أن تؤثر على ديناميات تدفق المواد في الطارد. لهذا السبب، تأكد من إعداد الميكروسفيرات الخاصة بك بشكل صحيح قبل الاستخدام.من أجل تقليل النفايات ، من المستحسن إنشاء دفعة واحدة كبيرة من خيوط المطلوبة لجميع التجارب بدلا من إنشاء دفعات أصغر بشكل أكثر تواترا. الخبرة في إنتاج خيوط سيأتي مع مرور الوقت. يمكن تقييم السقالات التي يتم إنتاجها بعد هذا الإجراء في المختبر وفي الجسم الحي للإجابة على أسئلة إضافية حول تعزيز الحث والقوة الميكانيكية مقارنة مع السقالات الأخرى المطبوعة بيولوجيا.بعد تطورها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال هندسة الأنسجة لاستكشاف التعريفي contragenic من مصفوفة البورسين ديسيلوارييد داخل السقالات 3D. لا تنس أن العمل مع الجسيمات الصغيرة يمكن أن يمثل مخاطر الجهاز التنفسي. يتم تشجيع ارتداء قناع جسيمات صغيرة أثناء هذا الإجراء.

novel-process-for-3d-printing-decellularized-matrices

Research

JoVE Journal

Bioengineering

الهندسة الحيوية

المصفوفة خارج الخلية الأنسجة محددة (ECM) هو الوسيط الرئيسي من وظيفة الخلية. توضح هذه المقالة طرق توليف الرغاوي وناقل دقيق التي هي مستقرة بالثقافة بدون حاجة إلى يشابك الكيميائي لتقديم الطلبات في 3D متقدم في نماذج زراعة الخلايا المختبر أو bioscaffolds الموالية لالتجديدي المستمدة ECM الخالص.

تصنيع كسوات وناقل دقيق مستمد مصفوفة خارج الخلية حيث الثقافة خلية الأنسجة محددة ومنصات التوصيل

ويصف هذا البروتوكول ديسيلولاريزيشن الكامل لعضلة القلب البشري مع الحفاظ على عناصر المصفوفة خارج الخلية. الاستمرار في معالجة نتائج المصفوفة خارج الخلية في إنتاج المجهرية الدقيقة والمائية تجميع ذاتي سيتوبروتيكتيفي.

التجهيز لانسجة القلب البشري تجاه المصفوفة خارج الخلية التي ذاتية تجميع المائية في المختبر و في فيفو التطبيقات

يمكن استخدام ديسيلولاريزيد السقالات المستمدة من الغضروف سقالة لإصلاح الغضروف دليل وكوسيلة لتجديد الأنسجة أوستيوتشوندرال. هذا الكتاب يصف عملية ديسيلولاريزيشن بالتفصيل ويوفر اقتراحات لاستخدام هذه السقالات في الإعدادات في المختبر.

تصنيع السقالات مصفوفة ديسيلولاريزيد المستمدة من الغضروف

والهدف من هذا البروتوكول هو إنتاج الألياف مصفوفة كاملة من خارج الخلية المستهدفة لإصلاح الجرح التي مناسبة للتقييم السريري كجزء من زرع السقالة التجدد. هذه الألياف التي تنتجها ثقافة الليفية في أغشية الألياف الجوفاء والمستخرجة بواسطة انحلال الأغشية.

إنتاج ألياف المصفوفة خارج الخلية عبر الألياف المجوفة الذبيحة غشاء الخلية والثقافة

مصفوفة خارج الخلية المكررة (dECM) يمكن ان توفر العظة البيئية الدقيقة مناسبه لتلخيص الوظائف المتاصله في الانسجه المستهدفة في بناء هندسيا. توضح هذه المقالة البروتوكولات الخاصة بالتقطير الوراثي لأنسجه البنكرياس ، وتقييم الحبر الحيوي dECM المشتق من انسجه البنكرياس ، وإنشاء انسجه البنكرياس ثلاثية الابعاد باستخدام تقنيه القرصنة البيولوجية.

البنكرياس المشتقة الانسجه المستمدة مصفوفة بيونك للطباعة 3D خلايا البنكرياس لادن الانسجه يبني

يسلط هذا البروتوكول الضوء على طريقة لتقييم التوافق البيولوجي بسرعة للخلايا النانوية البلورية (CNC) / agarose المركبة هيدروجيل الحبر المواد الحيوية مع خلايا الصاري نخاع العظم الماوس المستمدة من حيث صلاحية الخلية والتعبير الظاهري لمستقبلات سطح الخلية، كيت (CD117) ومستقبلات IgE عالية التقارب (FcεRI).

تصنيع بلوري Nanocellulose جزءا لا يتجزأ من الحبر Agarose المواد الحيوية لثقافة الخلايا الصاري نخاع العظام المستمدة

في هذا العمل ، تم تحسين بروتوكول إزالة الخلايا للحصول على مصفوفات منزوعة الخلايا لعضلات الهيكل العظمي للفأر الجنيني. يمكن للخلايا العضلية C2C12 استعمار هذه المصفوفات والتكاثر والتمايز. يمكن استخدام هذا النموذج في المختبر لدراسة سلوك الخلية في سياق أمراض العضلات الهيكلية مثل ضمور العضلات.

إعداد مصفوفات 3D Decellularized من العضلات الهيكلية للفأر الجنيني لزراعة الخلايا

يوضح البروتوكول منهجيتين متميزتين لإزالة الخلايا يتم تطبيقهما على الأنسجة الرئوية البقرية الأصلية ، مما يوفر سردا شاملا لخصائص كل منهما.

تطوير وتوصيف الهلاميات المائية خارج الخلية خارج الخلية الرئوية

تحمل مصفوفة الطحال منزوعة الخلايا (DSM) تطبيقات واعدة في مجال هندسة أنسجة الكبد. يحدد هذا البروتوكول إجراءات تحضير DSM للفئران ، والتي تشمل حصاد طحال الفئران ، وإزالة الخلايا منها من خلال التروية ، وتقييم DSM الناتج لتأكيد خصائصه.

تصنيع مصفوفة الطحال منزوعة الخلايا المشتقة من الفئران

يصف هذا البروتوكول تصنيع هياكل عظمية ثلاثية الأبعاد باستخدام خلايا عظمية بشرية مدمجة في هيدروجيلاتين ميثاكريلاتي (GelMA) مع مصفوفة خارج خلايا مفككة الخلية. الطريقة منخفضة التكلفة، قابلة للتوسع، ومتوافقة مع المعدات المختبرية الأساسية، مما يوفر منصة ترجمية لدراسة عمليات أمراض الجهاز العضلي الهيكلي.

منصة ثلاثية الأبعاد لزراعة العظام باستخدام الخلايا العظمية البشرية والمصفوفة خارج الخلايا غير المنفصلة لنمذجة أمراض الجهاز العضلي الهيكلي

اكتشف طريقة الطباعة ثلاثية الأبعاد المشتركة للهياكل الاصطناعية والمكونات البيولوجية لإنشاء دعامات هندسة الأنسجة. تُحسّن هذه التقنية من ظروف زراعة الخلايا من خلال تكرير البيئة الطبيعية للأنسجة بدقة.

عملية جديدة للطباعة 3D ديسيلولاريزيد المصفوفات

استكشف المزيد من الفيديوهات