المرحلة الصلبة ¹¹ج-ميثيل ، تنقيه وصياغة لإنتاج المتتبعين PET

الكربون-11 هو واحد من النظائر المشعة الأكثر استخداما في التصوير المقطعي للانبعاثات البوزيترونية بسبب وفرة في الجزيئات العضوية ونصف عمر قصيرة من 20 دقيقة. في هذا الفيديو، نعرض تقنية فعالة للتلابيل الإشعاعي من الكربون-11 باستخدام خراطيش استخراج الطور الصلب. بالمقارنة مع الطرق التقليدية، التقنيات القائمة على خرطوشة يجنب استخدام HPLC، يقصر وقت التمثيل الإشعاعي، ويحسن الموثوقية التوليف، ويبسط عملية التشغيل الآلي، ويسهل الامتثال لممارسات التصنيع الجيدة، GMP.

يتم عرض تقنية الخراطيش القائمة هنا على التركيب الإشعاعي لC11 PiB ، وهو جهاز تتبع PET يستخدم لتصوير في الجسم الحي لويحات اميلويد في أدمغة المرضى الذين يعانون من مرض الزهايمر. في الآونة الأخيرة، قمنا بتطبيق تقنية ثلاثة في واحد على التصوير الإشعاعي من C11 ABP688، تتبع PET لتصوير مستقبلات الغلوتامات الفوقية من النوع الخامس، فضلا عن غيرها من التتبعات الكربون-11 المسمى. الجمع بين 450 ملليلتر من 0.2-مول من حمض الخليك مع 50 ملليلتر من 0.2-مول من خلات الصوديوم لإعداد العازلة خلات في 3.7 pH كما العازلة واحدة.

تحقق من رقم الـ PH للمخزن المؤقت مع شرائط pH أو مقياس للرُح. ثم, الجمع بين 12.5 ملليلتر من الإيثانول المطلق مع 87.5 ملليلتر من المخزن المؤقت خلات في زجاجة 100 ملليلتر لجعل 12.5٪ محلول الإيثانول مائي كما غسل واحد. الجمع بين 15 ملليلتر من الإيثانول المطلق مع 85 ملليلتر من العازلة خلات في زجاجة 100 ملليلتر لجعل 15٪ محلول الإيثانول مائي كما غسل اثنين.

الجمع بين خمسة ملليلتر من الإيثانول المطلق مع خمسة ملليلترات من العازلة خلات لجعل 50٪ محلول الإيثانول مائي كما ميسو النهائي، ورسم 2.5 ملليلتر من هذا الحل في حقنة 10 ملليلتر. لشرط مسبق على خرطوشة tC18، من نهاية الإناث، واستخدام حقنة لتمرير 10 ملليلتر من الماء تليها خمسة ملليلترات من الأسيتون من خلال خرطوشة. جفف الكارتريدج بتدفق من النيتروجين بمعدل 50 ملليلتر في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة.

في أنبوب إبندورف، تذوب ملليغرامين من السلائف 6-OH-BTA-0 في ملليلتر واحد من الأسيتون اللامائية. عقد طرف لور، 250 ميكرولتر، حقنة الزجاج الدقيق إلى أسفل، سحب 100 ميكرولترات من الحل السلائف ومن ثم 50 ميكرولترات من وسادة الهواء. إزالة الإبرة، والاستفادة من حقنة للتأكد من وسادة الهواء هو فوق المحل في حقنة.

تطبيق حل السلائف لخراطيش tC18 من نهاية الإناث عن طريق دفع ببطء المكبس على طول الطريق إلى أسفل. لا تدفع الهواء أكثر من ذلك. تأمين وتجميع القياسية خمسة منفذ المتاح متعددة على وحدة التوليف.

المنفذ الأول له موقعين. قم بتوصيل المدخل الأفقي بالموزع الآلي المجهز بحقنة 20 ملليلتر. توصيل مدخل عمودي إلى الزجاجة مع غسل واحد.

توصيل الناتج من الوحدة النمطية التي تنتج C11 ميثيل triflate إلى ميناء اثنين من متعددة. تثبيت خرطوشة tC18 محملة السلائف 6-OH-BTA-0 بين الموانئ ثلاثة وأربعة. الميناء الخامس له موقعان.

قم بتوصيل مأخذ أفقي إلى زجاجة النفايات والمأخذ الرأسي إلى القارورة المعقمة لجمع التتبع عبر مرشح معقم. في الخلية الساخنة المحمية بالرصاص، استخدم خط تفلون لتسليم تريفلات الميثيل C11 في المتشعب عبر المنفذ الثاني، وتمريره من خلال خرطوشة tC18 المحملة بمعدل 20 ملليلتر في تدفق الإخراج في الدقيقة. وتنظم وحدة تريفلات الميثيل C11 التدفق عبر الموانئ ثلاثة وأربعة وإلى زجاجة النفايات.

بمجرد نقل كل النشاط الإشعاعي ووقوعه في خرطوشة tC18 كما يتم رصدها بواسطة كاشف النشاط الإشعاعي، قم بإيقاف تدفق الغاز عن طريق إغلاق المنفذ الثاني. اترك الخراطيش لمدة دقيقتين لإكمال التفاعل. ثم، من خلال ميناء واحد، سحب 19 ملليلتر من غسل محلول واحد من زجاجة 100 ملليلتر في حقنة موزع في 100 ملليلتر في الدقيقة الواحدة.

الاستغناء 18.5 ملليلتر من غسل محلول واحد من موزع من خلال خرطوشة tC18 عبر الموانئ ثلاثة وأربعة وفي زجاجة النفايات في 50 ملليلتر في الدقيقة. ضمان عدم وجود فقاعات الهواء في متعددة، لأنها قد تقلل من كفاءة الفصل. كرر الانسحاب والاستغناء أربع مرات مع 18.5 ملليلتر من محلول واحد غسل في كل مرة وحجم إجمالي قدره 92.5 ملليلتر يمر عبر tC18.

تبديل خط الإدخال على منفذ واحد من غسل واحد لغسل اثنين. كرر الانسحاب والاستغناء ثلاث مرات مع 18.5 ملليلتر من محلول غسل اثنين في كل مرة والحجم الإجمالي 55.5 ملليلتر يمر عبر tC18. تبديل صمام خمسة نحو القارورة النهائية.

افصل الخط عن الموزع، وربطه بحقنة 10 ملليلتر التي تحتوي على 2.5 ملليلتر من محلول التلميح النهائي و7.5 ملليلتر من الهواء. عقد حقنة إلى أسفل، ودفع يدويا الحل النهائي مزاله الهواء من خلال خرطوشة tC18 عبر الموانئ ثلاثة وأربعة والقارورة المعقمة لجمع التتبع عن طريق مرشح معقم. تبديل حقنة واحدة تحتوي على 10 ملليلتر من العازلة الفوسفات العقيمة، ودفع وحدة التخزين بأكملها من خلال خرطوشة tC18 في قارورة معقم.

افصل الحقنة، واغسل الخط بـ 10 ملليلترات من الهواء باستخدام نفس الحقنة. باستخدام حقنة مليلتر واحدة، سحب العينات لإجراءات مراقبة الجودة قبل الإصدار، اختبار البوتين البكتيري، واختبار العقم. لتنفيذ إجراءات مراقبة الجودة قبل الإصدار، أولاً تحديد الهوية الكيميائية الإشعاعية، والنقاء الكيميائي الإشعاعي، والنقاء الكيميائي، والنشاط المولى للمتتبع من قبل نظام HPLC التحليلية مجهزة كاشفات النشاط الإشعاعي للأشعة فوق البنفسجية وعمود عكس المرحلة.

تحديد أوقات الاحتفاظ بـ 6-OH-BTA-0 و 6-OH-BTA-1، ومعايرة الأداة لتحديد محتوى كل مركب. تحديد محتوى المذيبات المتبقية بواسطة نظام الكروماتوغرافيا التحليلية الغاز مجهزة عمود الشعرية. تحديد أوقات الاحتفاظ من الأسيتون والإيثانول، ومعايرة الصك لتحديد محتوى كل مذيب.

أجرت هذه الدراسة عملية التركيب الراديوي لـ C11 PiB بواسطة C11-methylation من 6-OH-BTA-0 مع تينفلات الميثيل C11. مراقبة الجودة التحليلية HPLC من C11 PiB يظهر النقاء الكيميائي الإشعاعي كان 98٪ وكانت أوقات الاحتفاظ من 6-OH-BTA-0 و 6-OH-BTA-1 ذروة التتبع على الكروموماتوغرام الأشعة فوق البنفسجية 3.6 و 5.9 دقيقة، على التوالي. ويبين تحليل أثر الأشعة فوق البنفسجية وجود تركيز متبقي من السلائف يقل عن الحد المقبول وهو 1.3 ميكروغرام في غياب شوائب أخرى غير مشعة.

وهذا يشير إلى النقاء الكيميائي الإشعاعي والكيميائية للمتتبع مقبول للدراسات السريرية PET. زيادة كمية السلائف 6-OH-BTA-0 من 0.1 ملليغرام إلى 0.3 ملليغرام تحسين الغلة الكيميائية الإشعاعية من 18.1٪ إلى 32.1٪ على حساب كمية أعلى قليلا من السلائف في المنتج النهائي. وينبغي أن تنطبق هذه التقنية على العديد من النظم المختلفة مع وجود فرق مناسب في القطبية بين السلائف والمنتج الذي تم تصنيفه بشعاع.

ويجب أن تجري جميع عمليات التلاعب التي تنطوي على نظائر مشعة في خلية ساخنة محمية بالرصاص بواسطة موظفين يوفرون التدريب الكافي على التعامل مع المواد المشعة.