الاستفادة من التعكر والتصوير التخثري لتوصيف الجلطات التكميلية

تخثر الدم ومقايسات التعكر هما طريقتان بسيطة ومميزة لتوصيف الجلطة. توفر هذه التقنيات معًا فهمًا أكثر شمولاً لكيفية تأثير متغيرات التخثر على ميزات الجلطة. كل من هذه المقايسات، لا تقدم فقط تحليل جلطة نقطة النهاية ولكن أيضا جذب تشكيل جلطة الفيرين مع مرور الوقت، على عكس العديد من أدوات توصيف الجلطة الأخرى هذه التقنيات يمكن أن تساعد في تطوير منصة جلطة اصطناعية ذات صلة من الناحية الفسيولوجية التي يمكن أن توفر تشخيصا موثوقا للحالة اللابرينوية لمرضى تجلط الدم لرصد عكرة الجلطة مع مرور الوقت، واستخدام أي مقياس الطيف المتاحة تجاريا التي لديها مجموعة امتصاص من 350 إلى 700 نانومتر.

قم بتشغيل المطياف وافتح برنامج التحليل المقابل. ثم حدد لوحة واحدة وفتح علامة التبويب إعدادات لوحة. انقر فوق ABS والحركية لمراقبة امتصاص ديناميكية مع مرور الوقت.

حدد 550 نانومتر في علامة التبويب الطول الموجي، ثم التبديل إلى علامة التبويب توقيت وضبط وقت التشغيل الإجمالي إلى 60 دقيقة مع فاصل زمني من 30 ثانية، حدد الآبار من الفائدة عن طريق تسليط الضوء عليها. ماصة 140 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني في بئر واحد من الأشعة فوق البنفسجية شفافة 96 لوحة جيدا. ثم إضافة 10 ميكرولترات من ثرومبين ومزيج، والشروع فورا تخثر بإضافة 50 ميكرولتر من الفيبرينوجين إلى البئر والماصة صعودا وهبوطا خمس مرات باستخدام فقط المحطة الأولى من الماصة مع الحرص على تجنب خلق فقاعات.

ضع اللوحة في حامل اللوحة وانقر فوق قراءة في البرنامج لبدء قراءة التعكر. عندما تنتهي القراءة من استرداد بيانات التعكر والحصول على منحنى تتبع التعكر عن طريق رسم تغيير الماصات مع مرور الوقت ، تستمد أقصى قدر من التعكر عن طريق أخذ أقصى قيمة امتصاص للمنحنى على مر الزمن ، ثم حساب 90 ٪ كحد أقصى التعكر بضرب التعكر الأقصى بنسبة 0.9. اشتقاق الوقت إلى التعكر الأقصى عن طريق حساب الوقت من بدء تجلط إلى 90٪ التعكر الأقصى.

قم بتشغيل تحليل الجلطات أو محلل TEG، وانتظر استقرار درجة الحرارة عند 37 درجة مئوية، ثم افتح برنامج TEG وقم بإنشاء اسم تجربة تحت قسم الهوية. انقر فوق علامة التبويب TEG واتبع المطالبات التي تظهر على الشاشة لإجراء اختبار eTest لكافة القنوات. ثم ضع الرافعة مرة أخرى إلى موضع التحميل بمجرد اكتمال جميع الشيكات.

انقر على تم في صفحة المعلومات وإدخال معلومات عينة للقنوات التي سيتم استخدامها. ضع كوب TEG غير المصقول في قناته المقابلة. حرك الناقل إلى الأعلى واضغط على أسفل الكأس خمس مرات لإصلاح الدبوس إلى قضيب الالتواء ثم خفض الناقل واضغط على الكأس إلى أسفل في القاعدة حتى النقرات.

Pipette 20 ميكرولترات من محلول الخثار في كأس TEG ، ثم ابدأ التخثر بإضافة 340 ميكرولتر من الفيبرينوجين إلى الكأس للحصول على محلول تخثر 360 ميكرولتر. خلط محتويات الكأس عن طريق الأنابيب صعودا وهبوطا خمس مرات. حرك حامل الكوب المحملة إلى الأعلى حرك الرافعة إلى موضع القراءة وانقر فوق بدء تشغيل البرنامج لبدء قراءة TEG.

بمجرد الانتهاء من القراءة استرداد المعلمات والحصول على منحنى تتبع TEG عن طريق رسم السعة على مر الزمن. انتخاب MA كما السعة القصوى، وهو ما يدل على سلالة جلطة و TMA مع مرور الوقت إلى أقصى قدر من السعة من البرنامج. يتم عرض التعكر التمثيلي ومنحنيات تتبع TEG من جلطات الفيبرين البشرية والبريينة على مستويات مختلفة من الفيبرينوجين هنا.

تظهر منحنيات التتبع أنه بعد فترة التأخر التالية لبدء الجلطة ، تزداد عكرة الجلطة أو سعة الجلطة بمرور الوقت وتزداد المستويات في نهاية تشكيل الجلطة. التعكر الأقصى والوقت إلى أقصى قدر من التعكر هي المعلمتين المستمدة من العكرة، في حين يتم اشتقاق أقصى سعة والوقت إلى أقصى سعة من TEG. على مستوى أعلى من الفيبرينوجين في حل تخثر جميع القيم الأربعة زيادة.

التعكر الأقصى هو مقياس بصري لهيكل الجلطة ، وهو ما يدل على سمك الألياف الفيبرين وكثافة شبكة الفيبرين. في حين أن أقصى سعة هو مقياس ميكانيكي يعكس سلالة الجلطات المطلقة ، فإن القيمتين معاً توفران رؤية مجانية حول الهياكل الدقيقة الجلطة. هذا الإجراء يوضح نموذج مبسط تخثر لدراسة المتغيرات التي تؤثر أساسا البلمرة الفيبرين.

يمكن تخصيص هذا النموذج عن طريق إدراج عوامل تخثر إضافية لدراسة المعلمات الأخرى. يمكن تعديل نموذج التخثر بسهولة باستخدام عينات البلازما السريرية لرصد تشكيل الجلطة وخيبة الأمل في وجود الأدوية المضادة للثثرومبوتيك. يمكن أن توجه النتائج الإدارة العلاجية في المرضى.