Name: نموذج نقص نشاط النافصة في الفئران بواسطة Conus medullaris Transection (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 26 s
Description: تعلم إنشاء نموذج نقص نشاط النافصة في الفئران باستخدام قطع النخاع المخروطي. تُستخدم هذه الطريقة الجراحية لدراسة وظائف المسالك البولية وآليات الخلل الوظيفي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم استخدام جميع الفئران وفقا للبروتوكولات المعتمدة من قبل لجنة التجارب الحيوانية في مستشفى الصداقة بكين ، جامعة العاصمة الطبية.
1. التحضير الجراحي والتخدير والتقنيات الجراحية
ملاحظة: تم الحصول تجاريا على ما مجموعه 40 أنثى من فئران Wistar ، تزن 200-220 جم ، تجاريا لهذه الدراسة. من بين 40 فأرا ، تم اختيار 10 بشكل عشوائي كمجموعة تحكم ، وتم التعامل مع الباقي كمجموعة اختبار. تم إيواء جميع الحيوانات في بيئة معقمة في مرافق الحيوانات في مستشفى الصداقة بكين ، جامعة العاصمة الطبية.
<ol><li>إجراء التخدير العام عن طريق إعطاء بنتوباربيتال الصوديوم داخل الصفاق (40 ملغ / كغ). بدلا من ذلك ، حث التخدير باستخدام 3٪ -4٪ إيزوفلوران والحفاظ عليه عند 1٪ -3٪ (استنشاق). ضع مرهم العيون على العينين لمنع الجفاف. ثم ضع الجرذ على المنصة الجراحية وقدم الدعم الحراري. ملاحظة: تطبيق المسكنات مثل البوبرينورفين، 0.05 ملغ/كغ، SC، 0.1-0.2 مل في بداية الإجراء.</li>
	<li>تحقق من عمق التخدير بسبب عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم. حلق الفراء من منطقة الظهر بأكملها باستخدام ماكينة حلاقة.</li>
	<li>تعقيم موقع الجراحة مع ما لا يقل عن 3 دورات من فرك على مرحلتين مثل الكلورهيكسيدين أو اليود بوفيدون تليها كحول الأيزوبروبيل. تأمين الأطراف بشريط جراحي وإجراء شق متوسط حوالي 3 سم على الظهر بمقص جراحي.</li>
	<li>تعميق شق من خلال الأنسجة تحت الجلد باستخدام مقص جراحي وقطع العضلات المرتبطة بالعمود الفقري.</li>
	<li>حدد بصريا الضلع الثالث عشر واكشفه (المساحة الفقرية المتصلة بهذاالضلع هي الفاصل الزمني T13-L1). بمناسبة الضلع 13عشر باستخدام خياطة.</li>
	<li>بعد تحديد الهوية ، قم باستئصال العضلات المرتبطة بالعمود الفقري بعناية وفضح العمود الفقري. استئصال الرباط فوق الشوكي والأربطة بين الشوكية لتحديد دقيق للعمود الفقري. كشف مستوى L4-L5 بالمقص الجراحي والملقط. ملاحظة: يمكن التعرف على الرباط فوق الشوكي بسهولة بسبب وجود أنسجة رقيقة تحت الجلد. بعد استئصال الرباط فوق الشوكي ، الرباط بين العملية الشوكية هو الرباط بين العمود الفقري.</li>
	<li>قم بتشريح العملية الشائكة الفقرية L4-5 بعناية وأجزاء من العملية المستعرضة باستخدام ملقط كيلي لكشف الحبل الشوكي (الشكل 1).</li>
	<li>كشف النخاع المخروطي تماما على مستوى L4-5 وقطع النخاع المخروطي تماما باستخدام مقص استئصال القزحية. أدخل بعض الأنسجة لمنع تعافي الحبل الشوكي.</li>
	<li>أغلق العضلات والجلد المغطيين على طبقة الجلد الخارجية باستخدام خياطة 4-0 غير قابلة للامتصاص.</li>
	<li>بالنسبة للمجموعة الضابطة، قم بتنفيذ الخطوات 1.1-7، واترك النخاع المخروطي سليما. أغلق الشق وفقا للخطوة 1.9.</li>
</ol>2. استعادة الحيوانات
<ol><li>احتفظ بالفئران في حاضنة يتم التحكم في درجة حرارتها (37 درجة مئوية) خلال الساعة الأولى بعد العملية وراقبها حتى تصبح قصية أو تتحرك بنشاط. ملاحظة: يستغرق الشفاء التام حوالي نصف ساعة.</li>
	<li>نقل الحيوان إلى قفص نظيف مع ما يكفي من الطعام والماء. الحفاظ على الفئران في أقفاص منفصلة. ملاحظة: يشار إلى نجاح عملية الاستئصال عندما تتحرك الفئران في مجموعة الاختبار فقط بمساعدة الأرجل الأمامية ، في حين أن الفئران في المجموعة الضابطة يمكنها المشي بشكل طبيعي.</li>
</ol>3. إدارة ما بعد العملية
<ol><li>حقن البنسلين G ، وهو مضاد حيوي (50000 وحدة / مل لكل) داخل الصفاق. تطبيق المسكنات مثل البوبرينورفين، 0.05 ملغ/كغ، SC، 0.1-0.2 مل كل 6-12 ساعة لمدة 48 ساعة بعد العملية.</li>
	<li>ضغط المثانة البولية في hypogastrium للمساعدة في الإفراغ. قم بإجراء ذلك مرتين يوميا في نفس الوقت (8 صباحا و 8 مساء) لمدة ستة أسابيع. ملاحظة: فقدان الانقباض الطبيعي للنافصة هو رمز اليورانيوم المنضب.</li>
	<li>ضع جميع الفئران في أقفاص استقلابية ، يحتوي كل منها على قمع لجمع البول يوضع فوق ورقة ماصة تم وزنها مسبقا لمراقبة التبول وسلس البول.</li>
	<li>اجمع ولاحظ تغير وزن الورق الماص ، مما يشير إلى الحجم الفارغ (VV) ، وحجم البول المتبقي بشكل منفصل.</li>
</ol>4. اختبار ديناميكا البول
<ol><li>في ستة أسابيع بعد العملية ، قم بإجراء مخطط المثانة ، باستخدام معدات قياس ديناميكا البول على النحو التالي.<ol><li>تخدير الفئران عن طريق حقن 10٪ هيدرات الكلورال في التجويف البريتوني (3 مل / كجم).</li>
		<li>ضغط المثانة للإفراغ ، ثم ثبت الفئران على المنصة الجراحية باستخدام شريط.</li>
		<li>أدخل القسطرة فوق الجافية (3F) في المثانة وقم بتوصيل معدات قياس ديناميكا البول والقسطرة فوق الجافية ومضخة التسريب بواسطة الأنبوب ثلاثي الأطراف.</li>
		<li>ضخ محلول ملحي فسيولوجي بسرعة 0.2 مل / دقيقة لقياس ديناميكا البول (انظر جدول المواد). سجل MCC و DOP ، وامتثال المثانة (محسوبة بقسمة حجم المثانة δ مع ضغط δ للنافصة).</li>
	</ol></li>
</ol>5. التحليل الإحصائي
<ol><li>إجراء التحليل الإحصائي باستخدام البرامج المتاحة تجاريا.</li>
	<li>استخدم اختبار Kolmogorov-Smirnov لاختبار الحالة الطبيعية للبيانات.</li>
	<li>التعبير عن المتغيرات الموزعة بشكل طبيعي كقيم متوسطة مع الانحرافات المعيارية. استخدم اختبارات t المزدوجة للطالب ثنائي الطرف لمقارنة معلمات cystometrogram في كلا المجموعتين. ملاحظة: يشير p < 0.05 إلى أن الفرق كان له دلالة إحصائية.</li>
</ol>

<ol><li>van Koeveeringe, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+underactivity%3A+Pathophysiological+considerations%2C+models+and+proposals+for+future+research%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Detrusor underactivity: Pathophysiological considerations, models and proposals for future research.</a> Neurourology and Urodynamics. 33 (5), ICI-RS 2013 591-596 (2014).</li>
<li>Osman, N. I., Esperto, F., Chapple, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+Underactivity+and+the+Underactive+Bladder%3A+A+Systematic+Review+of+Preclinical+and+Clinical+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Detrusor Underactivity and the Underactive Bladder: A Systematic Review of Preclinical and Clinical Studies.</a> European Urology. 74 (5), 633-643 (2018).</li>
<li>Osman, N. I., Chapple, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contemporary+concepts+in+the+aetiopathogenesis+of+detrusor+underactivity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Urology%22%5BJournal%5D)">Contemporary concepts in the aetiopathogenesis of detrusor underactivity.</a> Nature Reviews. Urology. 11 (11), 639-648 (2014).</li>
<li>Panicker, J. N., Nagaraja, D., Kovoor, J. M. E., Nair, K. P. S., Subbakrishna, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lower+urinary+tract+dysfunction+in+acute+disseminated+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Multiple+Sclerosis%22%5BJournal%5D)">Lower urinary tract dysfunction in acute disseminated encephalomyelitis.</a> Multiple Sclerosis. 15 (9), Houndmills, Basingstoke, England. 1118-1122 (2009).</li>
<li>Lee, W. C., Wu, H. P., Tai, T. Y., Yu, H. J., Chiang, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+urodynamic+characteristics+and+bladder+sensory+function+in+the+early+stages+of+diabetic+bladder+dysfunction+in+women+with+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Investigation of urodynamic characteristics and bladder sensory function in the early stages of diabetic bladder dysfunction in women with type 2 diabetes.</a> The Journal of Urology. 181 (1), 198-203 (2009).</li>
<li>Araki, I., Kitachara, M., Oida, T., Kuno, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voiding+dysfunction+and+Parkinson%E2%80%99s+disease%3A+urodynamic+abnormalities+and+urinary+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Voiding dysfunction and Parkinson’s disease: urodynamic abnormalities and urinary symptoms.</a> The Journal of Urology. 164 (5), 1640-1643 (2000).</li>
<li>Meng, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incomplete+bladder+emptying+in+patients+with+stroke%3A+is+detrusor+external+sphincter+dyssynergia+a+potential+cause%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Incomplete bladder emptying in patients with stroke: is detrusor external sphincter dyssynergia a potential cause.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 91 (7), 1105-1109 (2010).</li>
<li>FitzGerald, M. P., Brubaker, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+etiology+of+urinary+retention+after+surgery+for+genuine+stress+incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">The etiology of urinary retention after surgery for genuine stress incontinence.</a> Neurourology and Urodynamics. 20 (1), 13-21 (2001).</li>
<li>Rahman, M., Siddik, A. B. Neuroanatomy, Pontine Micturition Center. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRahman%2C+M+%22StatPearls%22">StatPearls</a>. , (2020).</li>
<li>Wrobel, A., Lancut, M., Rechberger, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+detrusor+overactivity+in+conscious+rats+induced+by+retinyl+acetate+instillation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">A new model of detrusor overactivity in conscious rats induced by retinyl acetate instillation.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 74 (7), 16(2015).</li>
<li>Rosenzweig, E. S., McDonald, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+treatment+of+spinal+cord+injury%3A+research+trends+and+progress+toward+useful+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Rodent models for treatment of spinal cord injury: research trends and progress toward useful repair.</a> Current Opinion in Neurology. 17 (2), 121-131 (2004).</li>
<li>Yoo, K. H., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+animal+models+of+neurogenic+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Experimental animal models of neurogenic bladder dysfunction.</a> International Neurourology Journal. 14 (1), 1-6 (2010).</li>
<li>Kanai, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sophisticated+models+and+methods+for+studying+neurogenic+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Sophisticated models and methods for studying neurogenic bladder dysfunction.</a> Neurourology and Urodynamics. 30 (5), 658-667 (2011).</li>
<li>Nomiya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+vascular+damage+may+lead+to+bladder+underactivity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Progressive vascular damage may lead to bladder underactivity in rats.</a> The Journal of Urology. 191 (5), 1462-1469 (2014).</li>
<li>Seki, T., Hida, K., Tada, M., Koyanagi, I., Iwasaki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graded+contusion+model+of+the+mouse+spinal+cord+using+a+pneumatic+impact+device%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Graded contusion model of the mouse spinal cord using a pneumatic impact device.</a> Neurosurgery. 50 (5), discussion 1081-1082 1075-1081 (2002).</li>
<li>Yeo, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+rat+model+of+graded+contusive+spinal+cord+injury+using+a+pneumatic+impact+device%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a rat model of graded contusive spinal cord injury using a pneumatic impact device.</a> Journal of Korean Medical Science. 19 (4), 574-580 (2004).</li>
<li>Bergman, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+transplants+permit+the+growth+of+serotonergic+axons+across+the+site+of+neonatal+spinal+cord+transection%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Spinal cord transplants permit the growth of serotonergic axons across the site of neonatal spinal cord transection.</a> Brain Research. 431 (2), 265-279 (1987).</li>
<li>Chancellor, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underactive+bladder%3B+Review+of+progress+and+impact+from+the+International+CURE-UAB+Initiative%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Underactive bladder; Review of progress and impact from the International CURE-UAB Initiative.</a> International Neurourology Journal. 24 (1), 3-11 (2020).</li>
<li>Pfisterer, M. H. D., Griffiths, D. J., Schaefer, W., Resnick, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+age+on+lower+urinary+tract+function%3A+a+study+in+women%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Geriatrics+Society%22%5BJournal%5D)">The effect of age on lower urinary tract function: a study in women.</a> Journal of the American Geriatrics Society. 54 (3), 405-412 (2006).</li>
<li>Duchen, L. W., Anjorin, A., Watkins, P. J., Mackay, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+autonomic+neuropathy+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pathology of autonomic neuropathy in diabetes mellitus.</a> Annals of Internal Medicine. 92 (2), 301-303 (1980).</li>
<li>Schneider, T., Hein, P., Bai, J., Michel, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+muscarinic+receptors+or+rho-kinase+in+hypertension+associated+rat+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urologoy%22%5BJournal%5D)">A role for muscarinic receptors or rho-kinase in hypertension associated rat bladder dysfunction.</a> The Journal of Urologoy. 173 (6), 2178-2181 (2005).</li>
<li>Drake, M. J., Harvey, I. J., Gillespie, J. I., Van Duyl, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localized+contractions+in+the+normal+human+bladder+and+in+urinary+urgency%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Localized contractions in the normal human bladder and in urinary urgency.</a> BJU International. 95 (7), 1002-1005 (2005).</li>
<li>Suskind, A. M., Smith, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+look+at+detrusor+underactivity%3A+impaired+contractility+versus+afferent+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Urology+Reports%22%5BJournal%5D)">A new look at detrusor underactivity: impaired contractility versus afferent dysfunction.</a> Current Urology Reports. 10 (5), 347-351 (2009).</li>
<li>Osman, N. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+underactivity+and+the+underactive+bladder%3A+A+new+clinical+entity%3F+A+review+of+current+terminology%2C+definitions%2C+epidemiology%2C+aetiology%2C+and+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Detrusor underactivity and the underactive bladder: A new clinical entity? A review of current terminology, definitions, epidemiology, aetiology, and diagnosis.</a> European Urology. 65 (2), 389-398 (2014).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

اليورانيوم المنضب هو سبب شائع لأعراض المسالك البولية السفلية لدى كل من الرجال والنساء. إنها مجموعة معقدة من الأعراض مع خيارات علاجية قليلة يمكن أن تقلل بشكل كبير من جودة الحياة (Qol) للمتضررين18. على الرغم من أنه يعتقد أن اليورانيوم المنضب متعدد العوامل ، إلا أن فهم التسبب في المرض لا يزال بدائيا. أظهرت الدراسات أن التسبب في اليورانيوم المنضب قد يكون مرتبطا بعوامل عضلية وعصبية.
في الفرضيات العضلية ، لوحظ أن الأفراد الذين يعانون من اليورانيوم المنضب قد يعانون من انخفاض أ...

نقص نشاط النافصة (DU) هو خلل وظيفي نموذجي في المسالك البولية السفلية ظل قيد الدراسة. على الرغم من أن اليورانيوم المنضب قد تم تعريفه من قبل الجمعية الدولية لسلس البول (ICS)1 ، يتم استخدام العديد من المصطلحات المختلفة للإشارة إلى هذا المرض ، على سبيل المثال ، "فشل النافصة" ، "المثانة المقلصة" ، "المنعكسات النافصة"2. اليورانيوم المنضب، كما عرفته الجمعية الدولية لسلس البول (ICS) في عام 2002، هو تقلص في انخفاض القوة والمدة، مما يؤدي إلى زيادة طويلة في وقت إفراغ المثانة، مما يؤدي إلى الفشل في تحقيق إفراغ المثانة الكامل خلال فترة طبيعية.
قد يؤثر اليورانيوم المنضب على 48٪ من الرجال و12٪ من النساء (الذين تتراوح أعمارهم بين >70 سنة)3 مع انخفاض أعراض المسالك البولية. يبدو أنه متعدد العوامل ، ولا يوجد علاج فعال. يذكر أن اليورانيوم المنضب موجود في كل مكان في المرضى الذين يعانون من خلل وظيفي في المثانة العصبية ، مثل التصلب المتعدد4 ، داء السكري5 ، مرض باركنسون6 ، أو السكتة الدماغية7. يمكن أن يحدث اليورانيوم المنضب أيضا بسبب تلف الأعصاب علاجي المنشأ ، مثل استئصال الرحم بالمنظار أو استئصال البروستاتا أو التدخلات الجراحية الأخرى في الحوض الصغير8. لا تزال التغيرات الفيزيولوجية المرضية والعلاجات المتاحة لليورانيوم المنضب مربكة بسبب عدم وجود نموذج حيواني مناسب للدراسة.
يتم التحكم في منعكس التبول بواسطة مسارات شوكية بصلية نخاعية تجمع بين مركز التبول الجسري والنواة العجزية السمبتاوي ومراكز القشرة الأكبر9. يعتمد تنشيط وصيانة منعكس التبول بشكل أساسي على النقل المنتظم للإشارات الحسية من المثانة إلى مراكز القشرة العليا. قد يفترض أن الخلل الحسي يساهم في اليورانيوم المنضب.
ركزت معظم الدراسات التجريبية على الحيوانات المتعلقة باختلالات المسالك البولية السفلية على نماذج فرط نشاط المثانة (OAB)10. توفر هذه النماذج فهما معقولا للفيزيولوجيا المرضية والتشخيص OAB. ومع ذلك ، لم يتم الإبلاغ إلا عن عدد قليل من نماذج اليورانيوم المنضب ، على سبيل المثال ، إصابة فوق العمود الفقري (الآفات الموضعية ، والدماغ ، وانسداد الشريان الدماغي الأوسط) ، أو استئصال الحبل الشوكي أو إصابة الكدمة ، أو الجهازية (على سبيل المثال ، سيكلوفوسفاميد) أو الإدارة داخل المثانة للعوامل المهيجة أو الالتهابية (مثل الحمض والأكرولين وعديد السكاريد الدهني)11،12،13،14 . من بين هذه الطرق ، يمكن استخدام طريقة استئصال الحبل الشوكي أو إصابة الكدمة فقط في إنشاء نموذج حيواني ل DU13. تم التخلي عن المحاولات التي تنطوي على إصابة مركز التبول الجسري ومراكز القشرة العليا بسبب الصدمة الشديدة. لذلك ، يتم إيلاء اهتمام متزايد للعثور على موقع دقيق في مركز منعكس التبول للحث على اليورانيوم المنضب مع الحد الأدنى من الآثار الجانبية.
كما ذكرنا سابقا ، تتمثل إحدى آليات تحفيز اليورانيوم المنضب في إصابة الحبل الشوكي لإتلاف مسار الإشارات لمنعكس التبول. تم تطوير طريقة ألين لإنقاص الوزن لإنشاء المختبر مع الحبال الشوكية المصابة15. ومع ذلك ، لا توجد بيانات تجريبية أخرى متاحة حول هذه الطريقة. علاوة على ذلك ، نظرا لأن أجزاء من الحيوانات استعادت وظيفة العمود الفقري بعد السكتة الدماغية بدون اليورانيوم المنضب ، فلا يمكن اعتبارها طريقة مثالية لتوليد نموذج حيواني DU16.
في عام 1987 ، قام بريجمان بإخراج عملية نقل الحبل الشوكي لتوليد نموذج اليورانيوم المنضب وحصل على بيانات تجريبية17. ومع ذلك ، لم يتم تطبيق هذه الطريقة لإنشاء نموذج اليورانيوم المنضب. في ذلك الوقت ، كان الباحثون لا يزالون مرتبكين بشأن التسبب في اليورانيوم المنضب. نظرا لأن المواقع في الحبل الشوكي المرتبطة بتحريض OAB أو DU متجاورة مع بعضها البعض ، لم يتمكنوا من العثور على الموقع الدقيق لتلف الحبل الشوكي للحث على DU17. تم تقديم OAB و DU إما معا أو بشكل منفصل بهذه الطريقة. لذلك ، على الرغم من أن هذه الطريقة قدمت اليورانيوم المنضب ، إلا أنها كانت غير دقيقة ولا يمكن استخدامها لفهم حدوث اليورانيوم المنضب ومعالجته.
كما ذكر أعلاه ، فإن عدم وجود نموذج حيواني مناسب لليورانيوم المنضب هو أحد العقبات الرئيسية أمام دراسة اليورانيوم المنضب. يبحث الباحثون باستمرار عن نموذج دقيق ويمكن التحكم فيه يمكنه محاكاة أمراض اليورانيوم المنضب. حتى خيارات العلاج لليورانيوم المنضب لم تتحسن بشكل ملحوظ خلال السنوات ال 20 الماضية. بشكل جماعي ، هناك حاجة كبيرة لوصف بروتوكول قياسي لإنشاء نموذج حيواني لليورانيوم المنضب.
لذلك ، في هذه الورقة ، نصف طريقة لإنشاء نموذج فأر ناجح ل DU عن طريق استئصال النخاع المخروطي. تم إجراء الاستئصال على مستوى L4-5 لفصل النخاع المخروطي. تم تسجيل وتحليل السعة القصوى لقياس المثانة (MCC) وضغط فتح النافصة (DOP) وامتثال المثانة للتحقق من صحة البروتوكول. يجمع البروتوكول المذكور أدناه بين الجدوى والموثوقية بطريقة موحدة لإنشاء نموذج حيواني لليورانيوم المنضب، ومحاكاة حدوث اليورانيوم المنضب ومعالجته. يمكن استخدام البروتوكول كتقنية لمزيد من الدراسة لليورانيوم المنضب.

<table><tbody><tr><td>0.9٪ محلول ملحي</td><td>شركة ووهان بروساي</td><td>مضخة EY-C1178</td><td>لقياس ديناميكا البول</td></tr><tr><td>10٪ هيدرات الكلورال</td><td>شاندونغ يولونغ المحدودة</td><td>H37022673</td><td>3 مل / كجم ، تدار داخل الصفاق</td></tr><tr><td>حقن بوبرينورفين هيدروكلوريد</td> حقن <td>تيانجين معهد أبحاث الأدوية المحدودة</td><td>H12020275</td><td>0.05 مجم / كجم تحت الجلد بعد 24 ساعة و 48 ساعة من العملية</td></tr><tr><td>القسطرة فوق الجافية</td><td>شاندونغ Xinghua المحدودة</td><td>VABR3L</td><td>لقياس ديناميكا</td></tr><tr><td>البول Penicillin G</td><td>Alta Technology Co.، Ltd</td><td>1ST5637</td><td>50،000 وحدة / مل لكل</td></tr><tr><td>بنتوباربيتال</td><td>بكين سولابو التكنولوجيا المحدودة</td><td>NK-WF0001</td><td>40 مجم / كجم ، تدار داخل الصفاق</td></tr><tr><td>خياطة خط (4-0)</td> <td>ETHICON</td><td>VCP422H</td><td>خياطة الإصابة</td></tr><tr><td>أنبوب ثلاثي الأطراف</td><td>Shandong Xinghua Co، Ltd</td><td>VAB3T</td><td>لقياس ديناميكا البول</td></tr><tr><td>مضخة ضخ ضخ</td> تتبع <td>Zhejiang Smith Medical Instrument Co.، Ltd</td><td>20162540335</td><td>ضخ المحلول الملحي بسرعة 0.2 مل / دقيقة لقياس ديناميكا البول</td></tr><tr><td>معدات القياس الديناميكي البولي</td><td>أنظمة القياس الطبيةBV.</td><td>08-0467</td><td>لا يمكن لمعدات قياس ديناميكا البول أن تساعد في تشخيص عسر البول فحسب ، بل توفر أيضا مواد موضوعية للعلاج والتأثير العلاجي. إنها طريقة الفحص الأكثر استخداما في التشخيص السريري وعلاج الأمراض الوظيفية في المسالك البولية السفلية</td></tr><tr><td>Wistar Rats</td><td>HFK Biotechnology Co.Ltd ، بكين ، الصين</td><td>SCXK2012-0023</td><td>200-220 جم</td></tr></tbody></table>

نموذج نقص نشاط النافصة في الفئران بواسطة conus medullaris transection

Detrusor Underactivity Model in Rats by Conus Medullaris Transection

كان الهدف من البروتوكول المقدم هو إنشاء نموذج نقص نشاط النافصة (DU) في الفئران من خلال استئصال النخاع المخروطي. تم إجراء استئصال الصفيحة الفقرية في ما مجموعه 40 أنثى من فئران Wistar (المجموعة الضابطة: 10 فئران ؛ مجموعة الاختبار: 30 فأرا) تزن 200-220 جم ، وتم نقل النخاع المخروطي على مستوى L4-L5 في مجموعة الاختبار. تم إيواء جميع الفئران وإطعامها في ظل نفس الظروف البيئية لمدة ستة أسابيع. في مجموعة الاختبار ، تم إجراء إفراغ البول مرتين يوميا لمدة ستة أسابيع ، وتم تسجيل متوسط حجم البول المتبقي. تم إجراء مخطط المثانة في كلا المجموعتين. تم تسجيل وحساب السعة القصوى لقياس المثانة (MCC) ، وضغط فتح النافصة (DOP) ، وامتثال المثانة. أظهرت مجموعة الاختبار احتفاظا كبيرا في البول بعد الجراحة ، أثناء وبعد صدمة العمود الفقري. ومع ذلك ، لم يلاحظ أي خلل في المجموعة الضابطة. عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة ، كان MCC وامتثال المثانة في مجموعة الاختبار أعلى بكثير من مجموعة الاختبار (3.24 ± 2.261 مل مقابل 1.04 ± 0.571 مل ؛ 0.43 ± 0.578 مل / سم ساعة 2 O مقابل 0.032 ± 0.016 مل / سم ساعة 2 O) ، في حين أن DOP في مجموعة الاختبار كان أقل من السيطرة (20.28 ± 14.022 سمساعة2 O مقابل 35 ± 13.258 سم ساعة2 O). توفر هذه الطريقة لإنشاء نموذج حيواني لليورانيوم المنضب عن طريق استئصال النخاع المخروطي فرصة ممتازة لفهم الفيزيولوجيا المرضية لليورانيوم المنضب بطريقة أفضل.

يمكن إكمال الإجراء الكامل لاستئصال النخاع المخروطي في غضون 45 دقيقة من قبل الجراحين ذوي الخبرة. أجرى مختبرنا أكثر من 100 حالة من جراحات استئصال النخاع المخروطي. معدل النجاح أكثر من 95 ٪ ، كما هو محدد من خلال بقاء الفئران والتحريض الناجح لليورانيوم المنضب. أكد اختبار ديناميكا البول تحريض اليورانيوم المنضب.
بناء على تجربتنا ، يمكن تقييم تحريض اليورانيوم المنضب بشكل مبدئي من خلال حجم البول المتبقي. لوحظ احتباس البول مباشرة بعد الجراحة. في مجموعة الاختبار ، ظهرت نقطة ذروة الحجم في اليوم الثاني بعد...

نقدم طريقة لإنشاء نموذج نقص نشاط النافصة عن طريق استئصال النخاع المخروطي في الفئران. تم تحفيز نقص نشاط النافصة بنجاح في هذه الحيوانات. يمكن استخدام النموذج لدراسة وظيفة المسالك البولية.

نموذج نقص نشاط النافصة في الفئران بواسطة Conus medullaris Transection

The goal of the presented protocol was to establish a detrusor underactivity (DU) model in the rat through conus medullaris transection. Laminectomy was ...

يوفر إنشاء نموذج حيواني ل DU عن طريق قطع المخروط النخاعي فرصة ممتازة لبدء الفيزيولوجيا المرضية لقلة نشاط الديتروسور. بروتوكولنا هو أول من يستخدم قطع المخروط النخاعي للحث على قصور detrusor في نموذج حيواني. لإجراء قطع مخروطي النخاع ، أولا ، قم بعمل شق جلدي متوسط يبلغ طوله ثلاثة سنتيمترات على ظهر.استخدم المقص الجراحي لتعميق الشق من خلال الأنسجة تحت الجلد واستئصال العضلات المرتبطة بالعمود الفقري لكشف الضلع 13. وقم باستئصال العضلات المرتبطة بالعمود الفقري بعناية لفضح العمود الفقري. استئصال الأربطة فوق الشوكية وبين الشوكات.واستخدم المقص والملقط الجراحي لكشف العمود الفقري من L4 إلى L5. استخدم ملقط كيلي لإزالة العملية الشائكة الفقرية من L4 إلى L5 بعناية وأجزاء من العملية المستعرضة لكشف الحبل الشوكي. وكشف المخروط النخاعي تماما عند L4 إلى L5. استخدم مقص قزحية العين لتمرير النخاع المخروطي بالكامل. وأدخل عبوات الأنسجة لمنع انتعاش الحبل الشوكي.ثم استخدم خياطة 4-0 غير قابلة للامتصاص لإغلاق العضلات والجلد المغطى. وضع الجرذ في حاضنة 37 درجة مئوية للساعة الأولى بعد العملية ، مع المراقبة حتى يصبح قصيا أو يتحرك بنشاط. لوحظ احتباس البول مباشرة بعد الجراحة ، مع ظهور نقطة ذروة الحجم في اليوم الثاني بعد العملية ، ويتناقص تدريجيا لمدة 10 أيام تقريبا.بعد عشرة أيام من الجراحة ، يصل حجم الاحتفاظ إلى مستوى ثابت. يكشف اختبار ديناميكا البول أن السعة القصوى لقياس الخلايا والامتثال للمثانة أعلى بكثير في مجموعة الاختبار ، بينما ينخفض ضغط فتح المخرج في مجموعة الاختبار بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة الضابطة. يعد تحديد الضلع 13 بشكل صحيح خطوة أساسية للتعرف الناجح على الفقرات من L4 إلى L5.

detrusor-underactivity-model-in-rats-by-conus-medullaris-transection

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

قياس المثانة هي تقنية فعالة لقياس وظيفة المثانة من الحيوانات...

استعمال قياس المثانة في القوارض الصغيرة: دراسة في Chemosensation المثانة

وصفت مراحل العمليات الجراحية في زيادة المثانة باستخدام 3-D السقالات في نماذج الفئران والجرذان. لاختبار فعالية من تكوينات مادة بيولوجية لاستخدامها في عمليات تكبير المثانة، ويتم تقديم تقنيات لقياس المثانة كلا مستيقظا وتخدير.

تقييم المواد الحيوية لتكبير المثانة باستخدام تحليلات Cystometric في نماذج القوارض مختلفة

ما يقرب من 3-8 ملايين شخص في الولايات المتحدة يعانون من متلازمة ألم التهاب المثانة الخلالي / المثانة (IC / BPS)، وهي حالة تتميز المنهكة في جزء من آلام الحوض. من أجل دراسة المساهمات الجهاز العصبي إلى حالة، يتم استخدام نموذج الفسيولوجية للألم المثانة البولية في الفئران والجرذان.

الردود المثانة البولية انتفاخ مستدعى الحشوي الحركي نموذجا لألم المثانة في الفئران

النمذجة التقليدي جزئية انسداد المثانة منفذ في القوارض محفوف نفوق الحيوانات. اصابة إزالة التعصيب من تشريح جميع أنحاء القريبة مجرى البول وعنق المثانة هي أيضا مصدر قلق كبير. قمنا بتطوير وتقييم لمنتصف مجرى البول نموذج عرقلة آمنة وموثوق بها، وتجنب أوجه القصور في النموذج التقليدي.

التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في أنثى القوارض الصغيرة

تصف هذه الدراسة العمليات الجراحية والتقنيات التجريبية لإجراء قياس المثانة مستيقظا في الماوس تتحرك بحرية. وبالإضافة إلى ذلك، فإنه يوفر أدلة تجريبية لدعم الأمثل لها والتوحيد القياسي.

تقييم الإجراء لإجراء قياس المثانة مستيقظا في نموذج الفأر

هذا البروتوكول الأول يصف العملية الجراحية لزرع قسطرة المثانة جنبا إلى جنب مع أقطاب مصرة الاحليل الخارجي، والثانية، قياس وظيفة المثانة والإحليل الخارجية الدائمة العضلة العاصرة في الحيوانات مستيقظا مزروع.

قياسات العضلة العاصرة الاحليل سيستوميتريك والخارجية في الفئران مستيقظا مع القسطرة مزروع واقطاب السماح للقياسات المتكررة

ويتيح نموذج المثانة الخالي من الدعامات امكانيه الوصول المباشر إلى السوبوروثثيلال لدراسة أليات المحلية لتنظيم توافر الوسيط النشط بيولوجيا في بروبيوروثيلال/لأمينا بروبروا اثناء تخزين وتفريغ البول. التحضير يشبه بشكل وثيق ملء المثانة السليمة ويسمح باجراء دراسات حجم الضغط دون التاثيرات الجهازية.

A لامركزية (فيفو السابقين) نموذج المثانة Murine مع أزاله العضلات ديتروور للوصول المباشر إلى السوبوروثثيلال اثناء ملء المثانة

في البروتوكول الحالي ، تم تطوير تحريض تضيق مجرى البول في فئران Wistar ، تليها إعادة بناء مجرى البول مع طعم الغشاء المخاطي الشدقي. تم إجراء تصوير الإحليل الرجعي وتقييم دوبلر بالليزر ، للتحقق من صحة إعادة بناء مجرى البول (بعد تكوين التضيق) ووضع الكسب غير المشروع.

تحريض تضيق مجرى البول متبوعا برأب الإحليل بطعم الغشاء المخاطي الشدقي في نموذج الفئران

يصف البروتوكول الحالي نموذجا تدريجيا وقابلا للتكرار لانسداد الحالب من جانب واحد.

نموذج الفئران غير الناضج لانسداد الحالب أحادي الجانب القابل للانعكاس

العصب البصري transection هو النموذج المستخدم على نطاق واسع من اصابة الجهاز العصبي المركزي للبالغين. تسعين في المئة من خلايا الشبكية العقدة (RGCs) التي هي محاور عصبية مقطوع تماما (axotomy) يموت في غضون 14 يوما بعد axotomy. هذا النموذج هو قابل للتلاعب بسهولة تجريبية وقابلة للتكرار للغاية.

العصب البصري Transection : نموذج من موت الخلايا المبرمج الخلية العصبية الكبار في الجهاز العصبي المركزي

تعلم إنشاء نموذج نقص نشاط النافصة في الفئران باستخدام قطع النخاع المخروطي. تُستخدم هذه الطريقة الجراحية لدراسة وظائف المسالك البولية وآليات الخلل الوظيفي.

نموذج نقص نشاط النافصة في الفئران بواسطة Conus medullaris Transection

استكشف المزيد من الفيديوهات