مارس 3, 2021
توضح هذه المقالة طريقتين لتحريض انخفاض حرارة الجسم لفترة قصيرة في الفئران. أول، طريقة التعريفي السريع، ويستخدم التبريد النشط باستخدام المراوح ورذاذ الإيثانول لانخفاض سريع في درجة الحرارة. الطريقة الثانية هي طريقة التبريد التدريجي. ويتحقق ذلك باستخدام مزيج من التخدير isoflurane والحد من إعدادات درجة الحرارة على حصيرة الحرارة المنزلية. وهذا يؤدي إلى انخفاض تدريجي في درجة حرارة الجسم الأساسية دون استخدام أي أجهزة التبريد الخارجية.
بروتوكول التبريد التدريجي لديه معدل أبطأ من التبريد من الأساليب التجريبية الحالية. هذا النموذج هو ذات الصلة سريريا لأن الوقت لاستهداف درجة الحرارة هو أقرب إلى النطاق البشري. الميزة الرئيسية لهذه التقنيات هي بساطتها ورخيصها.
بالإضافة إلى ذلك، لا تتطلب هذه النماذج معدات متخصصة. المعدل السريري لالتبريد الذي تحقق من النموذج التدريجي سيسمح بإجراء تحقيق أكثر استنارة قبل السريرية في فوائد انخفاض حرارة الجسم كإجراء علاجي لمرضى السكتة الدماغية. ابدأ بوضع جرذ مخدر على حصيرة حرارية جراحية في وضعية السطخ مع الأنف في مخروط.
تأمين الأنف مع الشريط الجراحي. حلق الفراء من أسفل البطن الأيمن وحقن تحت الجلد 200 ميكرولتر من 0.05٪ bupivacaine كمخدر موضعي. تطبيق محلول مطهر على المنطقة حلق حديثا.
جعل شق طولي سنتيمترين على طول منطقة البطن اليمنى قريبة إلى الفخذ الأيمن عميقة بما يكفي لفضح الفضاء في تجعد الفخذ البطني واستخدام hemostats والملقط لإنشاء جيب تحت الجلد كبيرة بما يكفي لعقد جهاز تسجيل البيانات. أدخل جهاز تسجيل بيانات مراقبة درجة الحرارة في الجيب واستخدم الغرز 5-0 لإغلاق العضلات والجلد ، مع التأكد من أن مسجل البيانات لا يستريح ضد حصيرة التدفئة. للحث على انخفاض حرارة الجسم النشط ، المركز الأول موقف واحد معوجة المشبك 20 سنتيمترا من رأس الجرذ و 120 سنتيمترا من أسفل البطن وإرفاق مروحة 60 ملليمتر 12 فولت مع ما لا يقل عن 4000 دوران في الدقيقة الإعداد لكل موقف مع المراوح تهدف نحو أسفل الظهر من الفئران.
ضبط حصيرة الحرارة لدرجة الحرارة المستهدفة المطلوبة لبدء انخفاض حرارة الجسم وبدوره على كل من المشجعين. في وضعية المعرضة، ضعي ثلاثة أو أربعة بخاخات من الإيثانول بنسبة 70٪ كل خمس دقائق على أسفل ظهر الجرذ بينما كشكش الفراء للحصول على تحريض تبريد أسرع، وفي الوقت الذي تراقب فيه درجة حرارة المستقيم عن كثب. إيقاف تطبيق الإيثانول عندما تكون درجة حرارة المستقيم ضمن درجة واحدة من درجة الحرارة المستهدفة.
عندما تكون درجة الحرارة ضمن 0.5 درجة من الهدف، قم بإيقاف تشغيل المراوح للسماح لدرجة الحرارة بالانخفاض ببطء إلى الهدف دون الإفراط في التبريد. في حالة الإفراط في التبريد ، استبدل مروحة بمصباح حرارة حيوانية واستخدم مصباح الحرارة لتسخين الحيوان بشكل معتدل حتى درجة الحرارة المستهدفة. بمجرد الوصول إلى درجة الحرارة المستهدفة وتثبيتها، قم بمراقبة درجة الحرارة لفترة انخفاض حرارة الجسم المتبقية.
في نهاية فترة انخفاض حرارة الجسم، حدد حصيرة الحرارة إلى 37 درجة مئوية والسماح للحيوان بالحرارة على مدى فترة 30 دقيقة. للحث على انخفاض حرارة الجسم التدريجي القابل للتحقيق سريريا ، قم بخفض درجة حرارة حصيرة الحرارة المنزلية الأساسية المنظمة لدرجة الحرارة بزيادات صغيرة لتحقيق انخفاض حرارة الجسم في غضون فترة زمنية محددة سلفا. عند الوصول إلى درجة الحرارة المستهدفة، حافظ على درجة الحرارة المستهدفة للفاصل الزمني المطلوب دون أي تبريد خارجي.
لإعادة warm الحيوان في نهاية فترة انخفاض حرارة الجسم، وضبط حصيرة الحرارة للسماح للجرذ لإعادةwarm إلى 37 درجة مئوية على الفاصل الزمني المطلوب. عند الانتهاء من أي نوع من تجربة انخفاض حرارة الجسم، قم بإزالة مسجل البيانات للسماح بتحليل درجات حرارة الجسم المسجلة. في هذا التحليل، تم تحقيق انخفاض حرارة الجسم مع التبريد السريع إلى درجة حرارة مستهدفة قدرها 32.5 درجة مئوية في 15 دقيقة كما هو موضح.
ويمكن ملاحظة تجاوز طفيف في درجة الحرارة بسبب الفشل في وقف التبريد من حوالي 0.5 درجة مئوية فوق درجة الحرارة المستهدفة. تم الحفاظ على درجة الحرارة المستهدفة لمدة 30 دقيقة وبدأت إعادة الارهام في 1.5 ساعة. في هذه التجربة، تم استخدام نهج التعريفي انخفاض حرارة الجسم التدريجي للسماح لدرجة الحرارة المستهدفة من 33 درجة مئوية للوصول في ساعتين.
تم الحفاظ على درجة الحرارة المستهدفة لمدة 30 دقيقة قبل إعادة الحرب في 2.5 ساعة. تقنية التبريد التدريجي تقودنا إلى التحقيق في ما إذا كان معدل التبريد أكثر أهمية سريريا من شأنه أن يمنع ارتفاع الضغط داخل الجمجمة بعد السكتة الدماغية في الفئران.
تصف هذه المقالة طريقتين لتحريض انخفاض حرارة الجسم الكامل لفترات قصيرة في الفئران: طريقة تبريد سريع باستخدام المراوح ورذاذ الإيثانول، وطريقة تبريد تدريجي باستخدام التخدير بالإيزوفلوران وسجادة حرارية. تهدف هذه التقنيات إلى توفير معدلات تبريد ذات صلة سريريًا للتحقيقات ما قبل السريرية.
Translational gaps in therapeutic hypothermia research challenge the predictive confidence of preclinical neuroprotection studies. This article's rat models enable direct comparison of rapid and clinically relevant cooling rates, supporting mechanistic de-risking and target validation for neuroprotective interventions. These protocols position R&D teams to better align preclinical findings with clinical trial design and portfolio advancement decisions.
These hypothermia induction models bridge early discovery and preclinical validation, informing lead identification and translational research in neuroprotection.