Name: زرع الجلد الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-01-16T10:34:00.000+00:00
Duration: 6 min 42 s
Description: تعلم تقنية زرع الجلد في الفئران لدراسة الاستجابات المناعية باستخدام سلالات BALB/c وC57BL/6. يوضح هذا النموذج البصري خطوات العملية الجراحية ومراقبة رفض الزرع.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIH المناعة التدريب المنحة 60573 T32 منظمة العفو الدولية (كردستان) ، والمعاهد الوطنية للصحة منح جنرال موتورز 41514 (MDC)

قبل الشروع في التجربة : <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على موافقة IACUC </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم الأدوات الجراحية وQ - نصائح </li></ul> أولا الأنسجة المانحة الحصاد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الماوس المانحة (وفقا للمؤسسة SOP) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الرطب يعود الشعر من قاعدة الأذن مع الكحول </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حصاد الجلد المانحة بقطع الأذن في قاعدة قبالة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نسيج اللوحة في المكان على الجليد </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأذن تقسيم : قرصة الجانبين بطني وظهري من الأنسجة في قاعدة الأذن مع الفئران الأسنان ملقط ؛ برفق بعيدا الأنسجة ؛ الأنسجة تعويم الظهرية ، أسفل السطح الداخلي ، في برنامج تلفزيوني على الجليد ؛ تجاهل رفرف بطني كولاجيني </li></ol> II. إعداد المتلقي للزراعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير باستخدام الماوس الداخلي المعتمدة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة مسكن لتخفيف الألم بعد العملية (أي الملكية الفكرية ،05-0،1 Bupernex مغ / ز) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الماوس مكان في موقف الوحشي </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء قرصة إصبع لضمان مخدرا الحيوان بما فيه الكفاية </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الشعر الرطب مع الكحول ويحلق الصدر </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مسح منطقة نظيفة مع مسحة الكحول </li></ol> III. زرع الجلد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ~ جعل شق الطول 1 : الجلد خيمة مع الجرذان وخفض سن ملقط ~ 0،25-0،5 سم تحت ملقط </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الجلد المانحة من برنامج تلفزيوني ، ومكان فوق السرير الكسب غير المشروع (مع السطح الداخلي للجلد الأذن التي تواجه السرير الكسب غير المشروع) ، وإزالة الزائدة مع برنامج تلفزيوني العقيمة Q - غيض </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقليم بعناية بعيدا الجلد الزائد المانحة بحيث زرع تقع تماما داخل السرير الكسب غير المشروع (مع التأكد من أن ليست كرة لولبية من حواف الكسب غير المشروع في إطار الكسب غير المشروع ، وأنه لا مخلفات الجلد على الجذع المستلم) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لف ضمادة معقمة في المتلقي (مع قطعة شاش غير لاصقة وضعت على مدى الكسب غير المشروع الجلد) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من أن عصابة ليست ضيقة جدا (تقييم التنفس الحيوان) والتي أصبحت قادرة على الحركة بحرية الأسلحة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> آمنة مع ضمادة خياطة واحدة 2-0 الحرير </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> (تعافى تحت مصباح التدفئة حتى الحيوان بما فيه الكفاية من التخدير) حيوان في قفص مكان نظيف </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد المتلقي 1-2/day عن علامات الضيق وإدارة مسكن حسب الحاجة لتخفيف الألم </li></ol> رابعا. إزالة الضماد (6-7 أيام بعد الزرع) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير باستخدام الماوس الداخلي المعتمدة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع وإزالة خياطة الحرير </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام مقص نهاية حادة ، وقطع بعناية من خلال عصابة (التأكد من عدم تعطيل الكسب غير المشروع) ، وإزالة بلطف </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عودة الماوس لتنظيف القفص </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاختيار طعم ~ 8 ساعات بعد إزالة الضماد عن علامات scabbing أو الانكماش. إذا كان موجودا ، قد فشلت في الكسب غير المشروع يوعي وينبغي النظر فيها عطل فني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد يوميا بحثا عن علامات على الرفض (التي تعرف عادة بأنها نخر ~ 80 ٪ من أنسجة المانحة) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وزرع الجلد خيفي ترفض عادة بين 12 - D8 - مرجع آخر </li></ol> خامسا تلميحات مفيدة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حصاد الأنسجة المانحة على مقربة من قاعدة للأذن : 1) زيادة حجم الكسب غير المشروع ، و 2) توفير عبء متفاوتة البطني الذي سيسهل تقسيم </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دائما استخدام شفرة الحلاقة الجديدة للحلاقة المستلم </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان المسكن هو أن تعطى للملكية الفكرية وإدارتها قبل إجراء عملية زرع للحد من التعامل مع مرحلة ما بعد المرجع (تقليل فرصة لتعطيل الكسب غير المشروع) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان ذلك ممكنا ، إزالة القفازات قبل تطبيق ضمادة. قفازات تميل إلى أن العصا وتعقيد تطبيق ضمادة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وسوف يضع خياطة واحدة في نهاية عصابة سابق لأوانه تقليل إزالة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضمادة التفاف كما هو مسموح به ضيق في التنفس وتقييم قبل وضع خياطة. إذا ضمادة ضيق جدا ، وسوف الحيوانات توقف التنفس. إذا ضمادة واهية جدا ، وسوف الحيوانات إزالته. </li></ol>

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

كما هو موضح في هذه المقالة عن طريق الفيديو ، ونموذج زرع الجلد هو طريقة سريعة وسهلة لرصد ردود خيفي الخلايا التائية. خيفي زرع الجلد لديها مجموعة واسعة من التطبيقات وكانت تستخدم لفحص كفاءة مجموعة متنوعة من العوامل المثبطة للمناعة والبروتوكولات تحريض التسامح ، فضلا عن التحقيق في الآثار البيولوجية المختلفة من الأجسام المضادة حظر.

<table><tbody><tr><td>ملاقط تشريح دقيقة (منحنية)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4142</td><td></td></tr><tr><td>ملاقط سن جرذ (1x2 سنون، مستقيمة)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11053-10</td><td>n=2</td></tr><tr><td>مقص الحول (طرف غير حاد)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14074-11</td><td></td></tr><tr><td>ملاقط القزحية (منحنية)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>مقص زنبركي (مائل)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15006-09</td><td></td></tr><tr><td>حامل إبر Halsey الدقيق</td><td>Fine Science Tools</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>أطباق بقطر 10 cm</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Cellgro</td><td>21-040-CV</td><td></td></tr><tr><td>Bupernex (هيدروكلوريد البوبرينورفين)</td><td>Reckitt Benckiser</td><td>517201</td><td></td></tr><tr><td>حقن أنسولين (29 Ga)</td><td>Monoject</td><td>8881 600145</td><td></td></tr><tr><td>مسحات قطنية (Q-tips)</td><td>Solon Manufacturing Company</td><td>362</td><td></td></tr><tr><td>شفرات حلاقة أحادية الحافة (#9)</td><td>Smith &amp;amp; Nephew Inc.</td><td>67-0238</td><td></td></tr><tr><td>خيوط جراحة حريرية (2-0; PS-2)</td><td>Ethicon Inc.</td><td>583H</td><td></td></tr></tbody></table>

زرع الجلد الفئران

Murine Skin Transplantation

باعتبارها واحدة من النماذج الأكثر صرامة وأقل تحديا من الناحية التقنية ، وزرع الجلد هو طريقة قياسية لفحص استجابات المضيف لمستضدات الخلايا التائية المانحة MHC - متباينة. الهدف من هذه المادة عن طريق الفيديو هو تقديم المشاهد مع مظاهرة خطوة بخطوة البصرية زرع الجلد باستخدام نموذج الفأر. يتم تقسيم البروتوكول حيز 5 عناصر رئيسية هي : 1) حصاد الجلد المانحة ؛ 2) إعداد المتلقي للزرع ؛ 3) زرع الجلد ؛ 4) إزالة الضماد ورصد رفض الكسب غير المشروع ؛ 5) تلميحات مفيدة. يتقن مرة واحدة ، يجب أن تتخذ الإجراء نفسه &lt;10 دقيقة للتنفيذ.

خيفي زرع الجلد هو النموذج القياسي لفحص استجابات المضيف لمستضدات الخلايا التائية المانحة MHC - متباينة. هذا الفيديو مادة يوفر البرنامج التعليمي في كل خطوة البصرية المشاركة في تنفيذ عملية زرع&gt; BALB/c-- C57BL / 6 الجلد.

تُعد زراعة الجلد إحدى أكثر النماذج صرامة وأقلها تحدياً من الناحية التقنية، وهي طريقة قياسية لتقييم استجابات الخلايا التائية للمضيف تجاه...

مرحباً بكم في مختبر الدكتور Michael Kalen. أنا Kim Gard. سنقوم اليوم باستعراض نموذج لزراعة الجلد باستخدام مزيج السلالات الخيفية BC إلى black six، كأحد أكثر نماذج رفض الطعوم النسيجية صرامة وأقلها تحدياً من الناحية التقنية.تعد عملية زراعة الجلد تقنية معيارية تُستخدم لتقييم الاستجابات الخيفية، وتُستخدم عادةً لتقدير كفاءة استراتيجيات تحفيز التحمل المختلفة. لذا، لنبدأ الآن. تبدأ هذه الإجراءات بجمع الجلد من فأر المانح من سلالة BAB.أولاً، يتم القتل الرحيم للمانح وفقاً لإجراءات التشغيل القياسية للجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات (Iacuc SOP). الآن، قم بترطيب الشعر في القاعدة باستخدام الكحول، ثم استخلص الجلد عن طريق إزالة الأذن من أقرب نقطة ممكنة من القاعدة ووضعها على الثلج. بعد ذلك، قم بشق كل أذن مع التخلص من السديلة البطنية الكولاجينية وجعل النسيج يطفو على الثلج.الآن أصبح الجلد المانح جاهزاً للزراعة. تبدأ عملية الزرع بتخدير الحيوان المستقبل باستخدام الإجراءات المعتمدة. وبمجرد تخدير المستقبل بشكل كافٍ، يتم إخراج الحيوان من الغرفة وإعطاؤه bup و next عن طريق الحقن البريتوني (IP) لتسكين الألم.ضع الحيوان المستقبل في وضع جانبي وتأكد من تخديره بالكامل عن طريق اختبار قرص الإصبع. بلل الشعر بالكحول ثم قم بحلاقته. بمجرد حلاقة الحيوان المستقبل بدقة، قم بإجراء شق بطول يتراوح بين 1 إلى 2 سنتيمتر تقريباً.ضع مسحة المانح فوق الشق، وأزل السائل الزائد باستخدام مسحة قطنية معقمة. الآن، قم بقص لفافة جلد المانح الزائدة بعناية، والحيوان والضمادة. تأكد من أن الضمادة ليست مشدودة للغاية من خلال تقييم التنفس، ثم تحقق من أن الذراعين تتحركان بحرية.الآن، قم بتثبيت الضمادة بغرزة جراحية واحدة. ضع الفأر في قفص نظيف مع مصباح حراري حتى يتعافى الحيوان خلال الأيام القليلة الأولى. بعد الجراحة، يجب عليك مراقبة الحيوان بضع مرات يومياً بحثاً عن علامات الضيق وإعطاؤه bup necks عند الحاجة لتسكين الألم.تتم إزالة الضمادات بعد خمسة إلى سبعة أيام من الجراحة. سأقوم بتوضيح عملية إزالة الضمادة من فأر مستقبل في اليوم السادس بعد الزرع. بمجرد تخدير الفأر بشكل كامل، قم بإزالة الغرزة واستخدم مقصاً ذا طرف غير مدبب لقص الضمادة وإزالتها برفق، مع الحرص على عدم تعريض الطعم أو المزروع للتلف.أعد الحيوان إلى قفص نظيف وراقبه يومياً لظهور علامات الرفض. وبناءً على مجموعة السلالات التي تختارها، يتم رفض معظم عمليات نقل الجلد، وهو ما يُعرف عادةً بحدوث نخر بنسبة 80% بحلول اليوم الثامن إلى 12. هذا الفأر في اليوم الثامن بعد العملية الجراحية وقد خضع لعمليات نقل ثنائية الجانب.يظهر على اليسار زراعة متماثلة الجينات ضابطة لسلالة black six، والتي لن تتعرض للرفض. وعلى اليمين تظهر زراعة خيفية من سلالة BAB التي ستتعرض للرفض. وهنا تظهر زراعة أخرى في مرحلة الرفض حالياً.وأخيرًا، عملية زراعة جلد من تاريخ مختلف تعاني من رفض شبه كامل. وبذلك، توضح هذه الأمثلة الثلاثة التباين الطبيعي في حركية رفض زراعة الجلد. في التجربة السابقة، أوضحنا لكم كيفية إجراء عملية زراعة الجلد المرآتية.يُعد هذا النموذج طريقة سريعة وسهلة لمراقبة الاستجابات الخيفية (allogeneic responses) وله نطاق واسع من التطبيقات. فعلى سبيل المثال، يمكن استخدام زراعة الجلد لتقييم كفاءة العوامل المختلفة المثبطة للمناعة، والأجسام المضادة الحاجبة، وبروتوكولات تحفيز التسامح المناعي. وهذا كل شيء.شكراً للمشاهدة، وبالتوفيق في تجاربكم.

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

في هذا التقرير ، إلا أننا تصف البشرة ثلاثي الأبعاد إعادة بناء النموذج الذي يحاكي الجلد البشري في مجال العمارة وتكوينها. وقد تم التحقيق في فسيولوجيا الخلايا الصباغية ، تطور سرطان الجلد ومصير الخلايا الجذعية عن طريق الجلد باستخدام نموذج إعادة بناء الجلد. هذا النموذج هو مفيد أيضا كأداة لتقييم ما قبل السريرية على المخدرات.

الجلد ثلاثي الأبعاد إعادة بناء الإنسان النموذجي : أداة لدراسة بشرة العادية والتقدم الميلانوما

الأنسجة محددة تحليل لتجديد بصيلات الشعر باستخدام نموذج الفيروسة البطيئة للتوسط ربح أو خسارة وظيفة.

تحليل سريع لالوراثية طلائي-الوسيطة اشارة خلال تجديد الشعر

يوضح هذا الفيديو طريقة لتطعيم جلد الإنسان على فأر يعاني من نقص المناعة مع استجابة عدلات مكبوتة. تتضمن الطريقة وضع جلد بشري بسمك منقسم على سرير الكسب غير المشروع للفأر ، وإغلاقه ، وتغطيته للتعافي. في النهاية ، يلتصق جلد الإنسان بجلد الفأر ، مما يؤدي إلى تكوين الأوعية الدموية والدورة الدموية ، مما يؤدي إلى نجاح طعم الجلد.

تقنية لتطعيم جلد الإنسان في نموذج الفأر

النيسرية السحائية هو الممرض الذي يصيب الإنسان محددة الأوعية الدموية. في هذا البروتوكول يتم تقديمها microvessels الإنسان في الماوس عن طريق تطعيم الجلد البشري على الفئران المناعة. البكتيريا الالتزام على نطاق واسع في الأوعية الإنسان، مما يؤدي إلى تلف الأوعية الدموية وتطوير الطفح الفرفري احظ عادة في الحالات البشرية.

أنسنة نموذج الفأر لدراسة الالتهابات البكتيرية استهداف الأوعية الدموية الدقيقة

يعد زرع جلد الذيل نموذجا قويا لدراسة الرفض المعتمد على الخلايا التائية وتحريض التسامح أثناء الاستجابات المناعية الخيفية في الفئران. تتمثل مزايا هذا البروتوكول في الجراحة الغازية البسيطة ، وسهولة المراقبة دون الحاجة إلى التضحية بالفأر المتلقي.

زرع الجلد الذيل لدراسة خيفي CD4 T الردود الخليوي في الفئران

الفئران كامل سمك زرع الجلد هو نموذج راسخة لدراسة الرفض في مكان منيع للمستضد الخيفي. هنا، ونحن نقدم البرنامج التعليمي كل خطوة تشارك في أداء BALB / ج -&gt; C57BL / 6 زرع الجلد كامل سماكة.

الفئران كامل سماكة الجلد زراعة

ونحن نقترح بروتوكول يوضح كيفية التفريق بين الخلايا الكيراتينيه المستمدة من الخلايا الجذعية المستحثة pluripotent والليفية وتوليد أورجانويد جلد 3D، استخدام هذه الخلايا الكيراتينيه والليفية. ويتضمن هذا البروتوكول خطوة إضافية لتوليد نموذج فئران أنسنة. هذه التقنية المقدمة هنا سيحسن البحوث الجلد.

جيل أورجانويد الجلد 3D من سلك المستمدة من الدم الناجم عن الخلايا الجذعية Pluripotent

وكان الهدف من هذه الدراسة لتطوير نموذج مورين من حرق التئام الجروح. تم احراق حراري على الجلد الظهري للفئران باستخدام قالب نحاسي محمّد مسبقاً. تم احتراق الأنسجة المحترقة ومضافًا مع ترقيع جلدي تم حصاده من ذيل فأر متبرع مشابه وراثيًا.

نموذج مورين من جرح حرق أعيد بناؤها مع الكسب غير المشروع الجلد الجيني

يصف البروتوكول الحالي كيفية تطعيم جلد الإنسان على الفئران غير المصابة بالسمنة والسكرية (NOD) -scid interleukin-2 مستقبلات سلسلة غاما (NSG). يتضمن التقرير وصفا مفصلا لإعداد جلد الإنسان للزراعة ، وإعداد الفئران للزراعة ، وزرع جلد الإنسان ذي السماكة المنقسمة ، وإجراء التعافي بعد الزرع.

نموذج Xenograft للجلد للتلاعب بالاستجابات المناعية البشرية في الجسم الحي

تصف هذه الورقة تقنية معدلة لزراعة القلب الوعائي غير المتجانس مع تقنية معقمة محدثة وتسكين الألم والتخدير.

بروتوكول معدل لزراعة القلب غير المتجانس للفأر يتوافق مع المعايير المعاصرة لتقنية التعقيم والتخدير وتسكين الألم

نقدم نموذجا قابلا للتكرار للفأر لعملية تحويل الأوعية الدموية المركبة غير المتجانسة من الأطراف الخلفية إلى الرقبة. هذا البروتوكول الجراحي فوق المجهر، الذي يتضمن تداخل أوعية بحجم 0.3-0.5 مم، يدمج توجيه خيوط النايلون والسبل الوريدي. يوفر منصة موثوقة للدراسات الانتقالية حول التحمل، وإصابة نقص التروية-إعادة التروية، والآليات المناعية في عملية زرع الدم المركب الوعائي.

زراعة الأعضاء الخلفية غير المتجانسة في الفأر: نموذج جراحة فائقة للجراحة الدقيقة لزرع الأوعية الدموية المركبة

تعلم تقنية زرع الجلد في الفئران لدراسة الاستجابات المناعية باستخدام سلالات BALB/c وC57BL/6. يوضح هذا النموذج البصري خطوات العملية الجراحية ومراقبة رفض الزرع.

زرع الجلد الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات