نموذج زرع الكلى التقويمي للفئران لرفض اللوغراف الكلوي

زرع الكلى التقويمي الفئران هو نموذج مهم للتحقيق في آلية رفض allograft الكلوي في الدراسات قبل السريرية ويمكن أن تساعد في تطوير نهج جديد لتحسين البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل من allografts الكلى. مفاغرة شاملة للأوعية الكلوية في هذه الجراحة تتجنب نقص تروية الجزء السفلي من الجسم وتخثر الوريد الأجوف السفلي ، في حين أن مفاغرة الحالب بطريقة نفق من طرف إلى جانب يقلل من تسرب البول بعد العملية الجراحية وتطور الحالب. توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة في التحقيق في آليات الرفض المناعي وإصابة اللوغرافات الكلوية بعد زراعة الكلى.

ابدأ بشق البطن باستخدام مقص جراحي على طول خط الوسط من العانة المتماثلة إلى تحت الكسيفويد. ثم اسحب الشق المفتوح باستخدام السحب. أخرج الأمعاء من الجانب الأيمن من الشق ولفها بشاش مبلل لمنعها من الجفاف.

ثم فضح الكلى اليسرى. قم بفصل الشريان الكلوي الأيسر والوريد باستخدام ملقط دقيق ومسحات قطنية أقل من 20 مرة تكبير. قم بربط وعبور الوريد الكظري والوريد التناسلي إذا لزم الأمر.

فصل الحالب بمساعدة ملقط دقيق ، والحفاظ على الأنسجة الضامة الطرفية لضمان تدفق الدم إلى الحالب. قم بفصل الشريان الأورطي وقصه أو ربطه بحوالي خمسة ملليمترات فوق الشريان الكلوي الأيسر باستخدام مشبك وعائي أو خياطة أحادية الخيوط من البولي أميد 4-0. ثم انقل الوريد الكلوي الأيسر البعيد إلى اقتران الوريد التناسلي الأيسر والوريد الكظري.

باستخدام إبرة مشرط قياس 24 ، اغسل الكلى من الشريان الأورطي أسفل الشريان الكلوي الأيسر بمحلول UW بارد مثلج مكمل ب 100 وحدة لكل ملليلتر من الهيبارين حتى يتلاشى لون الدم. انقل الشريان الكلوي الأيسر بجوار الشريان الأورطي ، ثم انقل الحالب بجوار المثانة وافصل الكلى بمساعدة الملقط الدقيق والمقص. الحفاظ على الكلى اليسرى المانحة في محلول UW البارد الجليدي.

أقل من 20 مرة تكبير ، قم بفصل الشريان الكلوي الأيسر والوريد الكلوي للفأر المتلقي باستخدام مسحات القطن والملقط الصغير. قم بربط الوريد الكظري والوريد التناسلي إذا لزم الأمر. قم بقص الشريان الكلوي الأيسر والوريد الكلوي عند الجذر باستخدام مشابك الأوعية الدموية الدقيقة ، ثم قم بعبور الشريان الكلوي والوريد الكلوي على بعد ثلاثة ملليمترات من المشبك الوعائي الدقيق.

انفصال الحالب الأيسر وربطه بحوالي سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات تحت الكلى مع 8-0 خيوط البولي أميد الأحادية الخيط ونقلها عند الربط. استئصال الكلى اليسرى الأصلية المتلقية عن طريق فصل الكلى بمساعدة الملقط الصغير والمقص. زرع الكلى المانحة في الحفرة الكلوية اليسرى للفأر المتلقي ووضع الثلج حول كلية المتبرع المزروعة.

قم بالتبديل إلى التكبير 45 مرة ، ثم مفاغرة المتبرعين الشريان الكلوي والوريد الكلوي إلى الشريان الكلوي والوريد الكلوي المتلقين في نمط من البداية إلى النهاية باستخدام خيوط أحادية 10-0 من البولي أميد. لمفاغرة الشريان الكلوي مع الغرز المتقطعة ، ضع خيوط الإقامة في مواضع الساعة 12 والسادسة من المفاغرة. خياطة جانب واحد من المفاغرة على قدم المساواة بين اثنين من خيوط البقاء مع اثنين إلى ثلاثة غرز.

اقلب خيوط الإقامة وخيط بالمثل الجانب الآخر من المفاغرة بين غرزتي الإقامة بغرزتين إلى ثلاث غرز. لمفاغرة الوريد الكلوي مع الغرز المستمرة ، ضع خيوط الإقامة في وضعي الساعة السادسة و 12 من المفاغرة. خياطة جانب واحد من المفاغرة من موضع الساعة 12 مع أربع إلى خمس غرز باستخدام خيوط الجري.

اقلب خيوط الإقامة وبالمثل ، قم بخياطة الجانب الآخر من المفاغرة من وضع الساعة السادسة. قم بإعادة دمج الكلى المانحة عن طريق إطلاق المشبك الوعائي الدقيق غير الغازي للوريد الكلوي ، وتحديد مواقع النزيف وإجراء غرز إضافية إذا لزم الأمر. بعد ذلك ، قم بتحرير المشبك الوعائي الدقيق غير الغازي للشريان الكلوي ، وحدد مواقع النزيف وقم بعمل غرز إضافية إذا لزم الأمر.

أقل من 20 مرة تكبير أو ربط أو خياطة نهاية الحالب المانح مع خياطة أحادية الخيوط 4-0 البولي أميد كسحب لسحب النهاية عبر نفق المثانة المستلمة. إصلاح الحالب المتبرع مع المثانة المتلقية عن طريق خياطة الغدة الدرقية من الحالب المانحة مع طبقة العضلات من المثانة المتلقية في الخارج في أربعة مواضع متساوية البعد باستخدام 8-0 البولي أميد مونوفيليمنت خياطة. بعد ذلك ، قم بعبور نهاية الحالب المتبرع مع خياطة خارج المثانة المتلقية واسمح للحالب المتبرع بالانكماش مرة أخرى إلى المثانة المتلقية.

ضع الأمعاء مرة أخرى في تجويف البطن وأغلق شق البطن بخيوط مستمرة في طبقة العضلات ثم طبقة الجلد بخياطة أحادية الخيوط من البولي أميد 4-0. في غضون عشرة أسابيع بعد الزرع ، كشف تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين وتلطيخ التحول الحمضي الدوري عن التصلب الكبيبي والتليف الخلالي والضمور الأنبوبي والتصلب الشرياني الخلالي في اللوغراف الكلوي على النقيض من الكلى متساوي الزرع. أظهر تلطيخ الفضة سماكة الغشاء السفلي الكبيبي في كلية اللوغراف بالمقارنة مع الكلى متساوي الطعم ، مما يشير إلى نجاح نموذج زرع الكلى التقويمي للفئران.

لأن ثقب الأوعية الدموية في الكلى رقيق جدا ، لتجنب الخياطة الخاطئة ، تذكر إجراء المفاغرة في حقل التكبير العالي.