يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يعد توصيل العلاجات مباشرة إلى الجهاز العصبي المركزي إحدى طرق التحايل على الحاجز الدموي الدماغي. يوضح البروتوكول الحالي الحقن داخل المخ البطيني للجمع اللاحق للسائل الدماغي النخاعي وأعضاء الجسم. هذا يسهل التحقيق في الحركية الدوائية للأدوية والديناميكا الدوائية في النماذج الحيوانية لتطوير علاجات جديدة.
على الرغم من أن الحاجز الدموي الدماغي (BBB) يحمي الدماغ من الكيانات الغريبة ، إلا أنه يمنع أيضا بعض العلاجات من العبور إلى الجهاز العصبي المركزي (CNS) لتخفيف الأمراض أو العدوى. يتم إعطاء الأدوية مباشرة في الجهاز العصبي المركزي في والبشر للتحايل على BBB. يصف البروتوكول الحالي طريقة فريدة لعلاج التهابات الدماغ من خلال توصيل المضادات الحيوية داخل البطينين ، أي البولي ميكسين ، وهي المضادات الحيوية الأخيرة لعلاج البكتيريا سالبة الجرام المقاومة للأدوية المتعددة. تم تطوير بروتوكول جراحة تجسيمية مباشر لزرع قنية إرشادية تصل إلى البطين الجانبي في الفئران. بعد فترة نقاهة مدتها 24 ساعة ، يمكن حقن الفئران بوعي وبشكل متكرر من خلال قنية مثبتة على الدليل. يمكن توصيل الحقن يدويا كبلعة أو تسريب باستخدام مضخة حقن مجهرية للحصول على معدل تدفق بطيء ومضبوط. تم تأكيد الحقن داخل البطين بنجاح باستخدام صبغة إيفانز بلو. يمكن تصريف السائل الدماغي النخاعي (CSF) ، ويمكن جمع الدماغ والأعضاء الأخرى. هذا النهج قابل للتعديل إلى حد كبير للدراسات التي تنطوي على توصيل الدواء إلى الجهاز العصبي المركزي والتقييم اللاحق للنشاط الدوائي والديناميكي الدوائي.
الحاجز الدموي الدماغي (BBB) هو آلية وقائية حاسمة للجهاز العصبي المركزي (الجهاز العصبي المركزي). يفصل الحاجز التشريحي القابل للاختراق الانتقائي الدم المتداول ومذابه عن السائل خارج الخلية في الدماغ ، وبالتالي يمنع معظم الجزيئات من دخول الدماغ1،2،3،4 ، اعتمادا على حجمها ، ومحبة الدهون5 ، وتوافر آلية نقل نشطة2.
هذا الحاجز الوقائي مفيد للتنظيم الفعال لتوازن الدماغ المعقد وصحة الجهاز العصبيالمركزي 4،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
أجريت جميع التجارب وفقا للقانون الأسترالي لرعاية واستخدامها للأغراض العلمية. تمت الموافقة على التجارب من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة ملبورن (التطبيق # 1914890). تم استخدام ذكور وإناث فئران Sprague-Dawley التي تتراوح أعمارها بين 8 و 14 أسبوعا في التجارب.
1. الجراحة التجسيمية لقنية البطين الجانبي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول الجراحي المقدم ناجح للغاية ، حيث وصل الجراحون المدربون إلى >99.8٪ من معدل البقاء على قيد الحياة وأظهرت وزن الجسم الثابت بعد الجراحة في اليوم الأول ، مقارنة بوزنها قبل الجراحة في اليوم 0 (متوسط ± SD من 315.8 جم ± 42.1 جم لليوم 0 و 314.1 جم ± 43.0 جم لليوم 1 ، الشكل 3).
قبل جمع السائل الدماغي النخاعي ، يمكن أن يساعد حقن صبغة إيفانز الزرقاء بنسبة 1.1٪ في القنية المزروعة كتأكيد على تسليم الحقن إلى الموقع المقصود. سيكون السائل الدماغي النخاعي الذي تم جمعه.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يستخدم الباحثون والأطباء حقن القيمة المحلية المضافة للتحايل على آلية الحماية ل BBB وتوصيل الأدوية مباشرة إلى الجهاز العصبيالمركزي 12،18،19،21،24. العمل الحالي عبارة عن بروتوكول كامل للفيروس الدولي للمركبات لتوصيل الأدوية بكفاءة إلى الجهاز العصبي المركزي واستخراج السائل الدماغي النخاعي لتحليل الحرائك الدوائية. في بداية التجربة .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.
يشكر المؤلفون مرفق العلوم الطبية الحيوية للحيوانات في جامعة ملبورن على توفير ورعايتها. تم دعم هذا البحث من خلال منحة بحثية من المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية التابع للمعهد الوطني للصحة (R01 AI146241 ، GR ، والتلفزيون). JL هو زميل باحث رئيسي في المجلس الوطني الأسترالي للبحوث الطبية الصحية (NHMRC). المحتوى هو مسؤولية المؤلفين فقط ولا يمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية للمعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية أو المعهد الوطني للصحة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الأسيتون | تيرومو ، اليابان | SS + 01T | |
| 5 مل محاقن | Terumo ، اليابان | SS + 05S | |
| Acetone | Merck ، ألمانيا | 67641 | |
| صفائح واقية مقاعد البدلاء | Halyard ، الولايات المتحدة الأمريكية | 2765-C | |
| Betadine | Mundipharma ، هولندا | 1015695 | |
| بوبرينورفين ؛ Temgesic | Clifford Hallam Healthcare ، أستراليا | 1238366 | |
| Carprofen | Zoetis ، أستراليا | 10001132 | |
| Chlorhexidine | Tasman Chemicals ، أستراليا | 890401 | |
| مناديل Chux فائقة التعبئة (أو ما يعادلها) | Chux ، أستراليا | Clippers | المعقمة غير معقمة |
| Clippers | n / a | n / a | |
| مسحات قطنية | LP Italiana، إيطاليا | 112191 | |
| مسحوق أسمنت الأسنان المعقم (مسحوق العلاج الذاتي Vertex) | هنري شاين ، الولايات المتحدة الأمريكية | مذيب الأسمنت للأسنان VX-SC500GVD5 | |
| (سائل العلاج الذاتي Vertex) | هنري شاين ، الولايات المتحدة الأمريكية | VX-SC250MLLQ | |
| الإبر التي تستخدم لمرة واحدة: 18 جم ، 26 جم ، 30 جم | تيرومو ، اليابان | NN + 2525RL | |
| شفرات جراحية يمكن التخلص منها | Westlab ، أستراليا | 663-255 | |
| مقص تشريح | F.S.T. | 14082-09 | |
| قنيات وهمية | Bio Scientific ، أستراليا | C313DC / SPC | مقطوعة إلى 4.05 لتناسب قنية التوجيه |
| الإيثانول 80٪ | ميرك ، أستراليا | 10107 | |
| صبغة إيفان الزرقاء | Sigma | E2129 - 50G | |
| تشحيم العين | كليفورد هالام للرعاية الصحية ، أستراليا | 2070491 | |
| قلم تلميح شعر | شاربي ، الولايات المتحدة الأمريكية | D-4236 | |
| مصدر ضوء الألياف البصرية | n / a | n / a | |
| إبرة مسطحة (18 جم) أو ما شابه ذلك لتطبيق superglue | n / a | n / a | |
| ماصات زجاجية ، سحبت | Hirschmann Laborgeraete ، ألمانيا | 9100175 | |
| حقنة زجاجية 10 uL | هاميلتون ، الولايات المتحدة الأمريكية | 701 LT و 1701 LT | |
| دليل قنيات | Bio Scientific ، أستراليا | C313G / SPC | 22 جم ، قطع 4 مم أسفل قاعدة التمثال لقنية البطين الجانبي في فئران Sprague Dawley البالغة |
| معقم حبة Haemostat | |||
| Inotech ، سويسرا | IS-250 | ||
| وسادة حرارية | n / a | n / a | |
| بيروكسيد الهيدروجين 3٪ | Perrigo ، أستراليا | 11383 | |
| غرفة الحث (Perspex 300 مم × 200 مم) | n / a | n / قنية | |
| حاقن | Bio Scientific ، أستراليا | C313I / SPC | مقطوعة لتناسب قنية 4 مم + إسقاط 0.5 مم |
| Isoflurane | Clifford Hallam Healthcare ، أستراليا | 2093803 | |
| مبخر Isoflurane ونظام التنظيف المناسب | n / a | n / a | |
| قوارب وزن متوسطة الحجم | n / a | n / a | |
| معدنية | Met-App ، أستراليا | n / A | |
| مضخة حقنة صغيرة | عصر جديد ، الولايات المتحدة الأمريكية | NE-300 | |
| Microdrill | RWD Life Science Co ، الصين | 87001 | |
| Polymyxin B | Beta Pharma ، الصين | 86-40302 | |
| أنابيب Protein LoBind ، 0.5 مل | Eppendorf ، ألمانيا | Z666491 | |
| Ropivacaine 1٪ ؛ ناروبين | أسترازينيكا، مقص | PS09634 | |
| المتحدة، كبير | FST | 14511-15 | |
| مقص صغير | 14079-10 | ||
| مفك البراغي | n / a | n / a | |
| مسامير | السيد المواصفات ، أستراليا | n / a | |
| إطار مجسم | RWD Life Science Co ، الصين | n / A | المكونات الضرورية: قضبان أذن الفئران ، قضيب الأسنان ، مخروط أنف التخدير ، ذراع مع قراءات رقمية (X ، Y ، Z) وحامل قنية |
| محلول ملحي معقم 0.9٪ | باكستر ، الولايات المتحدة الأمريكية | AHB1323 | |
| سوبر حفر (37٪ حمض الفوسفوريك) جل | SDI Limited ، أستراليا | 8100045 | |
| Superglue | UHU ، ألمانيا | ملقط | |
| الأنسجة مع خطافات | FST | 11027-12 | |
| أنابيب ، PE-50 | Bio Scientific ، أستراليا | C313CT |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً