تطوير وتقييم نموذج الفئران لعيوب الغضروف كاملة السماكة

ما هذا البروتوكول لا يحاكي فقط حدوث وتطور FTCD السريرية ، ولكن أيضا يوفر نموذجا حيوانيا موثوقا به لتقييم العلاجات العلاجية ضد FTCD. لكن هذه التقنية سهلة التنفيذ وتمكن من مراقبة النمو فور الإصابة. يمكن لهذه التقنية أن تحاكي بنجاح عيوب الغضروف السريرية مما يوفر منصة لدراسة العملية المرضية لعيوب الغضروف وتطوير الأدوية العلاجية المقابلة.

يمكن تطبيق هذه الطريقة لدراسة عيوب الغضروف الرضحية ، وهي هشاشة العظام بعد الصدمة. عند تجربة هذه التقنية لأول مرة ، من المهم ثني الساق والشظية بزاوية 90 درجة لكشف قوقعة لقمة الفخذ بالكامل والحفاظ على لقمة الحفر عموديا على سطح الغضروف. ابدأ بوضع فأر مخدر على طاولة العمليات في وضع ضعيف.

ضع ستارة معقمة على الفئران ، وفضح مفصل الركبة الحليق والمطهر. باستخدام شفرة مشرط رقم 11 ، قم بعمل شق عمودي بسنتيمتر واحد في منتصف مفصل الركبة. وقطع كبسولة المفصل ووتر الفخذ الفخذي على طول حافة الرضفة الإنسية.

بعد ذلك ، اقلب الرضفة للخارج وقم بثني الساق والشظية بزاوية 90 درجة ، لفضح قوقعة اللقمة الفخذية. باستخدام مثقاب دائري 1.6 ملم ، يحدث عيب غضروفي بعمق 0.1 ملم في قوقعة اللقمة الفخذية. امسح موقع الجراحة بكرات قطنية مبللة بمحلول ملحي بنسبة 0.9٪ ، واستبدل الرضفة.

ثم الحفاظ على الركبة في وضع ممتد خياطة شق طبقة تلو الأخرى باستخدام خيوط غير قابلة للامتصاص 4-0. لقياس عتبة الانسحاب الميكانيكية أو MWT"من الفئران ، ضع الحيوان في غرفة بلاستيكية واحدة على منصة شبكة سلكية. ضع قاعدة الشبكة السلكية على ارتفاع ٥٠ سنتيمترا فوق طاولة.

ابدأ قياس MWT بعد 30 دقيقة من التكيف. بعد ذلك ، اضغط على خيوط Von Frey بشكل عمودي على سطح الغراس لمخلب الجرذ الخلفي. ثم ثني الفرشاة لمدة ثانيتين مع تجنب الجزء السميك من الجزء المركزي من المخلب.

قم بزيادة وزن التحفيز تدريجيا من 4 جرامات ، حتى تحدث استجابة إيجابية مثل انسحاب المخلب أو لعقه. بعد 3 أيام من النمذجة ، أظهرت الفئران في المجموعة النموذجية انخفاض MWT مقارنة بالمجموعة الوهمية. اقتراح فرط التألم في مجموعة النموذج.

ظل MWT لمجموعة النماذج منخفضا حتى بعد 17 يوما. يدل على طول حساسية الألم. أظهر تلطيخ الأنسجة المرضية للمجموعة الوهمية سطحا غضروفا مفصليا وسليما واضحا ، وتوزيعا متساويا للخلايا الغضروفية ، وتعبيرا عاليا عن الكولاجين من النوع الثاني.

في المقابل ، أظهرت مجموعة النموذج أسطح غضروفية مكتئبة ، وخلايا غضروفية مفقودة ، وزيادة التعبير عن مصفوفة ميتالوبروتيناز MMP13 ، وانخفاض التعبير عن الكولاجين من النوع الثاني. أهم شيء يجب تذكره هو أنه يجب تقليل الرضفة قبل الخياطة.