December 1st, 2023
يصف هذا البروتوكول طريقة لجمع عينات الدموع باستخدام شرائط شيرمر وسير عمل كمي متكامل لاكتشاف المؤشرات الحيوية للبروتين المسيل للدموع غير الغازية. يتيح سير عمل تحضير عينة محاصرة التعليق إعداد سريع وقوي لعينة الدموع والتحليل الطيفي للكتلة ، مما يؤدي إلى زيادة إنتاجية استرداد الببتيد وتحديد البروتين مقارنة بالإجراءات القياسية في المحلول.
يهدف بحثنا إلى إثبات استخدام إعداد عينة محاصرة معلق البروتين ، والمعروف باسم S trap للأبحاث القائمة على قياس الطيف الكتلي. يستخدم هذا البروتوكول إعدادا سريعا وقابلا للتكرار وموحدا لعينة السائل المسيل للدموع البشرية التي تم جمعها باستخدام الأبحاث الانتقالية في طب العيون. السائل الدمعي البشري هو سائل في الجسم يمكن جمعه لإجراء اختبارات جزيئية غير جراحية في طب العيون.
هناك الكثير من الطرق الموحدة لجمع السوائل المسيلة للدموع وإعداد العينات ، والتي تعتبر ضرورية لنجاح البحث السريري للأمراض والظروف. من الصعب مقارنة الطرق غير الموحدة وتفسيرها بين المنهجيات وبالتالي تؤثر على النتائج الكيميائية. تسمح هذه البروتوكولات بأخذ عينات من سوائل الجسم المسيل للدموع وتخزينها في درجة حرارة الغرفة.
هذا يساعد في تسهيل جمع العينات والشحن. يوفر استخراج الببتيد السريع والقوي لتحليل مطياف الكتلة ، مما يحسن استعادة الببتيد وتحديد الهوية. يحتوي هذا البروتوكول على الحد الأدنى من خطوات إعداد العينة لتقليل الخطأ والشكوك.
إن الأداء السريع والمتفوق لتحديد البروتين وقياسه بواسطة قياس الطيف الكتلي سيسهل الأطباء والباحثين في تطوير الاختبارات الجزيئية غير الغازية. سيكون تحسين إعداد العينة دائما إحدى الخطوات الحاسمة. بغض النظر عن طريقة الكشف ، فإن القيمة السريرية للسائل المسيل للدموع البشري لم يتم التحقيق فيها بشكل كامل بعد.
نأمل أن تفتح طريقة إعداد عينة الاقتراح الباب أمام التطبيق السريري المحتمل في المستقبل القريب.
يحدد هذا البروتوكول طريقة لجمع عينات الدموع البشرية باستخدام شرائط Schirmer وسير عمل موحد لتحديد مؤشرات البروتين في الدموع غير الغازية. تعمل طريقة تحضير العينة باستخدام مصائد التعليق على تعزيز استعادة الببتيد وتحديد البروتين من خلال التحليل الطيفي للكتلة.
Standardized, high-yield sample preparation for tear proteomics addresses a critical bottleneck in non-invasive biomarker discovery for ocular diseases. The suspension-trapping (S-Trap) workflow enhances reproducibility and protein identification, supporting translational research and pipeline continuity. This approach enables robust, scalable tear fluid analysis for early-stage biomarker validation and portfolio triage in ophthalmic R&D.
This S-Trap-based protocol integrates from clinical sample collection through to mass spectrometry-based protein identification, supporting workflows from early discovery to translational research.