April 28th, 2023
يظهر هنا بروتوكول لتصوير الدماغ بالكامل في الجسم الحي ليرقات الزرد باستخدام المجهر الفلوري ثلاثي الأبعاد. يتضمن الإجراء التجريبي إعداد العينات والحصول على الصور والتصور.
نحن نعمل على تطوير أنظمة المناعة البصرية والخوارزميات الحسابية لتسجيل وتحليل النشاط العصبي للدماغ بأكمله بدقة مكانية وزمانية عالية. أسماك المختبر هي نموذجي مثالي للبحث. بفضل كل شفافية بصرية وتوافر أدوات وراثية متنوعة ، قد تتدهور جودة الصورة البصرية بسبب الانحراف الناتج عن هلام Agarose المستخدم لتركيب العينات ، وقد تتحرك الأسماك أثناء التسجيل مسببة آثار الحركة في الصور أو تعيق دقة استخراج الإشارة من الصور.
لا توفر البروتوكولات المتاحة للجمهور سوى لمحة موجزة عن الإجراء التجريبي ، وتعيش أجزاء كبيرة من التفاصيل ، مثل تقنيات التركيب الدقيقة لتصلب الأغاروز ، وتحديد المواقع البسيط. لذلك ، هناك حاجة إلى بروتوكول فعال وقابل للتكرار للحصول على بيانات صور عالية الجودة. مع الحد الأدنى من الضوضاء والحركة.
يوفر بروتوكولنا إجراء تجريبيا محسنا وقابلا للتكرار. يتيح هذا البروتوكول تصوير الدماغ بالكامل في الجسم الحي على مدى فترة طويلة وتصورات بيانات التصوير المكتسبة. ركز سير العمل على تصوير الدماغ بالكامل ولكن يمكن تطبيقه بسهولة على تصوير الأعضاء الأخرى لكثير من أسماك الحمار الوحشي لدينا.
هدفنا هو كشف المبادئ الأساسية للحساب العصبي. لذلك سنواصل العمل على خط أنابيب يتضمن تصويرا واسع النطاق للنشاط العصبي والبنية والتحليل الحسابي لمثل هذا من أجل رسم خرائط الدماغ المنهجية.
تقدم هذه المقالة بروتوكولًا مفصلاً للتصوير الكلي للدماغ في الجسم الحي لزبرينة اليرقات باستخدام التصوير المجهري الفلوري ثلاثي الأبعاد. يفضل نموذج الزبرينة بسبب شفافيةه البصرية وإمكانية الوصول الجيني لدراسة الحساب العصبي والنشاط. يعالج البروتوكول المشكلات الشائعة مثل التشوهات الناتجة عن الحركة وتشوهات هلام الأغاروز، مما يضمن الحصول على بيانات صور عالية الجودة.
Three-dimensional fluorescence imaging of larval zebrafish brains enables high-resolution, in vivo mapping of neural structure and activity, supporting early-stage neuroscience discovery. This protocol addresses reproducibility and artifact reduction, providing a robust foundation for mechanistic de-risking and target validation in neurobiological research. Its adaptability and quantitative outputs position it as a reusable capability for enterprise R&D pipelines focused on neural circuit analysis and functional screening.
This imaging protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum, enabling hypothesis testing, pathway mapping, and quantitative analysis in vertebrate neuroscience models.